1樓:往者不可
加入底層平板後可以彌補培養皿底部不平的缺陷,這樣可以使所有的噬菌斑都位於近乎同一平面上。上層瓊脂層較稀,可以形成形態較大,便於觀察和計數的噬菌斑。
什麼是噬菌體效價,簡述雙層平板法的原理與主要操作
2樓:噠噠噠噠噠噠哪
噬菌體的分離純化及效價的測定
1 目的
1.1瞭解噬菌體效價的含義及其測定原理。
1.2學會檢查噬菌體的方法。
1.3掌握用雙層瓊脂平板法測定噬菌體效價的操作技能。
2 原理
噬菌體是一類專性寄生於細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,
用常規微生物計數法無法測得其數量。
當烈性噬菌體侵染細菌後會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量子代噬菌體,
然後它們再擴散和侵染周圍細胞,
最終使含有敏感菌的懸液由混濁逐漸變
清,或在含有敏感細菌的平板上出現肉眼可見的空斑──噬菌斑。
瞭解噬菌體的特性,
快速檢查、分離,並進行效價測定,對在生產和科研工作中防止噬菌體的汙染具有重要作用。
檢樣可以是發酵液、空氣、汙水、土壤等(至於無法取樣而需檢查的物件,可以用無菌
水浸溼的棉花塗拭表面作為檢查樣品)
。為了易於分離可先經增殖培養,使樣品中的噬菌體數量增加。
採用生物測定法進行噬菌體檢查,
約需12h
左右,因而不能及時判斷是否有噬菌體汙染。
通過快速檢查可大致確定是否有噬菌體汙染
,以採取必要的防治措施。
根據正常發酵
(培養)
液離心後菌體沉澱,
上清液蛋白含量很少,
加熱後仍然清亮;
而侵染有噬菌體的發酵
(培養)
液經離心後其上清液中因含有自裂解菌中逸出的活性蛋白,加熱後發生蛋白質變性,
因而在光線照射下出現丁達爾效應而不清亮
。此法簡單、
快速,對發酵液汙染噬菌體的判斷亦較準
確。但不適於溶源性細菌及溫合噬菌體的診斷,對侵染噬菌體較少的一級種子培養液
也往往不適用。
噬菌體的效價即1
ml樣品中所含侵染性噬菌體的粒子數。效價的測定一般採用雙層瓊脂平板法。
由於在含有特異宿主細菌的瓊脂平板上,
一般一個噬菌體產生一個噬菌斑,
故可根據一定體積的噬菌體培養液所出現的噬菌斑數,計算出噬菌體的效價。
此法所形成的噬菌
斑的形態、大小較一致,且清晰度高,故計數比較準確,因而被廣泛應用。
為什麼野生型的噬菌體dna不宜作為基因工程載體
a 質粒是基因工程常用的運載體,a正確 b 噬菌體的衍生物是基因工程常用的運載體,b正確 c 染色體不能作為基因工程的運載體,c錯誤 d 動植物病毒是基因工程常用的運載體,d正確 故選 c.為什麼野生型的 噬菌體dna不宜作為基因工程載體 常用的運載體 質粒 噬菌體的衍生物 動植物病毒.故選 b.作...
乙醯苯胺的製備試驗中，為什麼開始要小火加熱10min
本實驗的醯化bai反du應是先成鹽後脫水，先小火zhi加熱dao10min是為了使苯胺和乙專酸成鹽。實驗屬步驟及過程 1.投料 在25ml圓底燒瓶中，加入10ml苯胺 1.5ml冰醋酸及少許鋅粉 約0.01g 然後裝上一短的刺形分餾柱，其上端裝一溫度計，支管通過支管接引管與接受瓶相連，接受瓶外部用冷...
為什麼要進行耳聾的基因檢測,為什麼要進行耳聾基因的檢測
你好 檢查耳聾基因。才能知道你身體裡有沒有耳聾基因。有的話遺傳率是多少 沒有的話更好,都是為了讓你的下一代沒有耳聾的困擾。能更好的生活。希望我都回答能幫到你。可以預防耳聾基因遺傳到下一代 科技越來越發達,基因對人的影響是決定性的,是否有耳聾風險,通過基因的分析是可以得到大量的資訊的,可以查詢23密碼...