1樓:匿名使用者
比濁抄法又稱濁度測定法襲,原理是懸浮顆粒在液體中bai造成du
透射光的減弱,zhi減弱的程度dao與懸浮顆粒的量相關,據此可定量測定物質在溶液中呈懸浮狀態時濃度的方法。也就是利用培養液中微生物的數量不同造成的吸光度差異來確定微生物的生長量。比濁法和比色法所依據的原理是相同的,實驗方法也相似。
通常,比色計或分光光度計都可用於比濁分析。也有專門用於比濁分析的儀器,即濁度計或比濁計。
測定微生物的生長有哪些方法
2樓:聽風
常用測定微生物生長的方法有:
1)、稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌.
2)、比濁法.原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點:比較準確.
3)、測含氮量,大多數微生物的含氮量佔乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)、血球計數板法.優點:簡便、快速、直觀.缺點:結果包括死菌和活菌.
5)、液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查mpn表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點:
可計算活菌數,較準確.缺點:比較繁瑣.
6)、平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的資訊.
缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.
3樓:匿名使用者
常用測定微生物生長的方法有:
1)稱乾重法,多用不真菌等
2)比濁法.多用於細菌,微生物在特定波長下有相應的吸收,可用紫外分光光度計測定其對應的值,繪製微生物的生長曲線。
3)測含氮量:凱氏定氮法測微生物中的含氮量,然後計算細胞乾重。
4)血球計數板法.
5)平板菌落計數法。
1.測定微生物數量的方法有哪些?
4樓:麻煩不見了噶
細菌計數1.計數器測定法:
即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(o.
1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行,可立即得出結果。
本法不僅適於細菌計數,也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。
2、電子計數器計數法:
電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過一個細胞,當一個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成一個脈衝,自動記錄在電子記錄裝置上。
該法測定結果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
3、活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然後將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測汙染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所採用的方法。
使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入o.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(ttc);③本法限用於形成菌落的微生物。
廣泛應用於水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是最常用的活菌計數法。
4、比濁法
比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定範圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(od值)表示樣品菌液濃度。
此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。
5、測定細胞重量法
此法分為溼重法和乾重法。溼重法系單位體積培養物經離心後將溼菌體進行稱重;乾重法系單位體積培養物經離心後,以清水洗淨放人乾燥器加熱烘乾,使之失去水分然後稱重。
此法適於菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6、測定細胞總氮量或總碳量
氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱ccu)
這種方法通常用於很小,用一般的比濁法無法計數的微生物,比如支原體等,因為支原體的液體培養物是完全透明的,呈現為清亮透明紅色,因此無法用比濁法來計數,由於支原體固體培養很困難,用cfu法也不容易計數,因此需要用特殊的計數方法,即ccu法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標,來計數微生物的相對含量的,下面以解脲脲原體為例單介紹其操作:,簡
(1)取12只無菌試管,每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。
(2)在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液,充分混勻,從中吸取0.2ml加入第二管,依次類推,10倍梯度稀釋,一直到最末一管
(3)於37度培養,以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的ccu,也就是支原體的最大代謝活力,比如第六管出現顏色改變,他的相對濃度就是10的6次方ccu/ml.
一般來說,比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數,但是對支原體這樣比較特殊的微生物,用ccu法比較合適。
5樓:匿名使用者
1.顯微鏡直接觀察
2.平板計數
3.血球計數版計數
4.微生物特定成分分析
5.乾重法
6.比濁法
6樓:匿名使用者
活菌測量有血球計數板,此外還有細胞稱重法
常用測定微生物生長量的方法有幾種
7樓:騎秀逸閉豔
v常用測定微生物生長的方法有:1)稱乾重法。可用離心法或過濾法測定。
優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌。
2)比濁法。原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定。
優點:比較準確。3)測含氮量,大多數微生物的含氮量佔乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.
25即可測得其粗蛋白的含量。4)血球計數板法。優點:
簡便、快速、直觀。缺點:結果包括死菌和活菌。
5)液體稀釋法。對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查mpn表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量。優點:
可計算活菌數,較準確。缺點:比較繁瑣。
6)平板菌落計數法。取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數。優點,可以獲得活菌的資訊。
缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響。
測定微生物的生長有哪些方法?各有何優缺點
8樓:句月聽風
常用測定
微生物生長的方法有:
1)、稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌.
2)、比濁法.原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點:比較準確.
3)、測含氮量,大多數微生物的含氮量佔乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)、血球計數板法.優點:簡便、快速、直觀.缺點:結果包括死菌和活菌.
5)、液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查mpn表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點:
可計算活菌數,較準確.缺點:比較繁瑣.
6)、平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的資訊.
缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.
在測定微生物生長曲線中比濁法與血球板計數法,兩者有何不同?
9樓:涼念若櫻花妖嬈
兩者的工作原理不同。
比濁法無法判斷出微生物的死活,一般用於非動物細胞(細菌,真菌等),原理參照分光光度計,得出的資料相對不精確。優點是可以應用於較大密度和量的細胞。
比濁法是用分光光度法對無色的微生物懸浮液進行測定,得到的是活細胞的數目,而血球板計數法是在光學顯微鏡下直接計數的方法,但得到的是包括死細胞在內的細胞數。
血球計數板通常用於動物細胞,測量較為精確,使用臺盼藍染色以後可以分辨細胞的死活。不過也有缺點,一是假如測量的細胞的原始密度及高,在不斷稀釋的過程當中很容易產生誤差,其次,血球計數板中假如細胞大量成團,則觀察者很難進行計數。一般血球計數板要求4角上的4個相對較大的格子中數出的細胞總數在200個左右,這個時候是比較準確的。
不同點總結起來就是,比濁法適用於密度大,非動物細胞,精確度低,不辨死活。
血球計數板精度相對較高,常用於動物細胞,可辨別死活,適用於較低的密度。
10樓:匿名使用者
不同,比濁法是用分光光度法對無色的微生物懸浮液進行測定,得到的是活細胞的數目,而血球板計數法是在光學顯微鏡下直接計數的方法,但得到的是包括死細胞在內的細胞數。
11樓:瑞士風
比濁法無法判斷出微生物的死活,一般用於非動物細胞(細菌,真菌等),原理參照分光光度計,得出的資料相對不精確。優點是可以應用於較大密度和量的細胞。
血球計數板通常用於動物細胞,測量較為精確,使用臺盼藍染色以後可以分辨細胞的死活。不過也有缺點,一是假如測量的細胞的原始密度及高,在不斷稀釋的過程當中很容易產生誤差,其次,血球計數板中假如細胞大量成團,則觀察者很難進行計數。一般血球計數板要求4角上的4個相對較大的格子中數出的細胞總數在200個左右,這個時候是比較準確的。
不同點總結起來就是,比濁法適用於密度大,非動物細胞,精確度低,不辨死活。
血球計數板精度相對較高,常用於動物細胞,可辨別死活,適用於較低的密度。
此外,兩者的工作原理不同。
高中測定微生物數量的方法
12樓:bie___汀
1、直接計數bai法:常用的是du顯微鏡直接計數法zhi,這種方
dao法是先將待測樣品製成專懸浮液,然後取一屬定量的懸液放在顯微鏡下進行計數。根據在顯微鏡下觀察到的微生物數目來計算出單位體積內的微生物總數。直接計數法所需裝置簡單,可迅速得到結果,而且在計數的同時能觀察到所研究的微生物的形態特徵,其缺點是難以計數微小的細菌。
這種方法一般適用於培養懸浮液中各種單細胞細菌體的計數。
2、間接計數法:最常用的是稀釋平板計數法,它是根據微生物的培養特徵而設計的技術方法。這種方法在樣品中含菌數較少的情形下,也可以完成計數。
應用稀釋平板計數法計數是,需要將待測樣品配製成均勻的系列稀釋液,儘量使樣品中的微生物細胞分散開。再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分佈於平板中的培養基內;或是將一定量的稀釋液,與融化後冷卻至45°c左右的瓊脂培養基混合,傾入無菌培養皿中,搖勻、靜置待凝。經過培養後,就由單個微生物生長繁殖形成一個菌落,這樣的一個菌落就代表一個微生物個體,統計培養基中出現的菌落數,即可推算出檢測樣品中的活菌數。
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