1樓：知識小店兒
1）雙分子熒光互補（bifc）技術，有人在做。
中山醫學院黎明濤教授與chang-deng hu教授合作，引進bifc技術，已經發表了相關**(mol cell biol. 2009;29(9):2431-2442)。
雙分子熒光互補(bimolecular fluorescence complementation，bifc)分析技術，是由hu等在2023年最先報道的一種直觀、快速地判斷目標蛋白在活細胞中的定位和相互作用的新技術。該技術巧妙地將熒光蛋白分子的兩個互補片段分別與目標蛋白融合表達，如果熒光蛋白活性恢復則表明兩目標蛋白發生了相互作用。其後發展出的多色熒光互補技術(multicolor bifc)，不僅能同時檢測到多種蛋白質複合體的形成，還能夠對不同蛋白質間產生相互作用的強弱進行比較。
目前，該技術已用於轉錄因子，g蛋白βγ亞基的二聚體形式，不同蛋白質間產生相互作用強弱的比較以及蛋白質泛素化等方面的研究工作上。
該方法利用綠色熒光蛋白(green fluorescent protein，gfp)及其突變體的特性作為報告基因，將熒光蛋白分割成兩個不具有熒光活性的分子片段，再分別與目標蛋白連線。如果兩個目標蛋白因為有相互作用而靠近，就使得熒光蛋白的兩個分子片段在空間上相互靠近，重新形成活性的熒光基團而發出熒光。在熒光顯微鏡下，就能直接觀察到兩目標蛋白是否具有相互作用，並且在最接近活細胞生理狀態的條件下觀察到其相互作用發生的時間、位置、強弱、所形成蛋白質複合體的穩定性，以及細胞訊號分子對其相互作用的影響等，這些資訊對研究蛋白質相互作用有一定意義。
2）有雙分子熒光互補的試劑盒。
軒昊科技的定量pcr超級試劑可以用來進行以dna或者cdna為模板的靈敏、便捷和無汙染的定量pcr擴增。超級反應液是把緩衝液、dutp、transitor® taq dna聚合酶和ung酶等預混成即用型試劑。你可以大量節省混合配置試劑的時間，並最大程度的控制pcr影響因素以保證穩定和可重複的結果。
熱啟動的transitor® taq酶大大提高了pcr的特異性，而ung酶防汙染系統能夠控制pcr產物的汙染而產生假陽性結果。所有這些，都是您選用超級pcr試劑進行實驗理由，因為您可以大量減少實驗數量和節省研究經費、時間。
3）雙分子熒光互補的載體有：胞漿型和內質網型。
2樓：南霧嶺後
我曾開發過紅色譜方面的技術。
我的同學中就有人發表過bifc的技術文章：
3、這些載體可以和發表文章的作者索取。其中好用的是綠色和黃色光譜方面的。
3樓：子車靜柏溫昶
基因診斷是用放射性同位素、熒光分子等標記的dna...dna雙螺旋結構和鹼基互補配對原則保證了複製能夠精確。這與生長素的濃度高低和植物器官的種類等有關。
雙分子熒光互補的介紹
4樓：賞葉7wk55蘞
雙分子熒光悉模腔互碼皮補(bimolecular fluorescence complementation，bifc)分析技術，是由hu等在2023年最先報道的一種直觀、快速地判斷目標蛋白在活細胞中的定位和相互作用的新技術·該技術巧妙地將熒光蛋白分子的兩個互補片段分別與目標蛋白融合表達，如睜衫果熒光蛋白活性恢復則表明兩目標蛋白發生了相互作用·其後發展出的多色熒光互補技術(multicolor bifc)，不僅能同時檢測到多種蛋白質複合體的形成，還能夠對不同蛋白質間產生相互作用的強弱進行比較·目前，該技術已用於轉錄因子，g蛋白βγ亞基的二聚體形式，不同蛋白質間產生相互作用強弱的比較以及蛋白質泛素化等方面的研究工作上·
雙分子熒光互補實驗的意義
5樓：手機使用者
該方法利用綠色熒畢歲光蛋白(green fluorescent protein，gfp)及其突變體的特性作為報告基因，將熒光蛋白分割成兩個不具有熒光活性的分子片段，再分別與目標蛋白連線。如果兩個目標蛋白因為有相互作用而芹伏靠近，就使得熒光蛋白的兩個分子片段在空間上相互靠近，重新形成活性的熒光基團而發出熒光。在熒光顯微鏡下，就能直接觀察到兩目標蛋白是否具有相互作用，並且在最接近活細胞生嫌數攜理狀態的條件下觀察到其相互作用發生的時間、位置、強弱、所形成蛋白質複合體的穩定性，以及細胞訊號分子對其相互作用的影響等，這些資訊對研究蛋白質相互作用有一定意義。
雙分子熒光互補的bifc技術原理
6樓：阿瑟啦
將蛋白在某些特定的位點切開，形成不發熒光的n和c端2個多肽，稱為n片段(n-fragment)和c片段(c-fragment)。這2個片段在細胞內共辯茄表達或體外混合時，不能自發地組裝成完整的熒光蛋白，在該熒光蛋白的激發光激發時不能產生熒光。但是，當這2個熒光蛋白的片段分別連線到1組有相互作用的目標蛋白上，在細胞內共表達或體外混合這2個融合蛋白時，由於目標蛋白質的相互作用，熒光蛋白的2個片段在空間上互相靠近互補，重新構建成模猜完整的具有活性的熒光蛋白分子，並在該熒光蛋白的激發光激發下，發射熒光。
簡言之，如果目標蛋白質之間有相互作用，則在激發光的激發下，產生該熒光蛋白的熒光。反之，若蛋白質之間沒有相互作用，則不能旦灶型被激發產生熒光。
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