1樓:手機使用者
沉澱線靠近抗原孔,則提示抗體含量大;靠近抗體孔,則提示抗原含量較多版;不出現沉權澱線則表明抗體或抗原的缺乏或抗原過剩;另外,如出現多條沉澱線,則說明抗原和抗體皆不是單一的成分。因此,可用於鑑定抗原或抗體的純度。
雙向瓊脂擴散實驗主要用於哪些方面
2樓:邂逅
雙向瓊脂擴散試驗常用於定性檢測,也可用於半定量檢測。
將抗原內與抗體分別加
容入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉澱線。根據有否出現沉澱線,可用已知的抗體鑑定未知的抗原,或用已知的抗原鑑定未知的抗體。
臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血清中的甲胎蛋白,作為原發性肝癌的早期輔助診斷。
常用瓊脂擴散試驗的瓊脂濃度為多少?
3樓:廖佳一
1.材料和試劑
(1)ph8.6,0.1m巴比妥——巴比妥鈉緩衝液
巴比妥鈉 10.3 g
巴比妥 1.84 g
硫柳汞 100 mg(防腐劑)
蒸餾水加熱溶解並定容至500ml
(2)1%預復瓊脂(或瓊脂糖)
1g瓊脂(或瓊脂糖)加蒸餾水100ml溶化即可。
(3)1%瓊脂糖凝膠
1g瓊脂糖加50ml蒸餾水置水溶中煮沸溶解或用與波爐加熱溶解(注意不要溢位且注意加入蒸發的水),然後再加入50ml上述巴比妥緩衝液混勻,置4°C儲存備用。
(4)抗原及相應免疫血清。
單向瓊脂擴散試驗 是一種常用的定量檢測抗原的方法。將適量稀釋後的抗體與等量瓊脂混勻,澆注成板,凝固後,在板上打孔,孔徑3mm,孔間距10mm,孔中加入抗原,每孔10μl,放置溼盒中,37°C溫箱,抗原就會向孔的四周擴散,邊擴散邊與瓊脂中的抗體結合。24h-48h後觀察結果,在兩者比例適當處形成白色沉澱環。
沉澱環的直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標準抗原製成標準曲線,則從曲線中可求出標本中抗原的含量。本試驗主要用於檢測標本中各種免疫球蛋白和血清中各種補體成分的含量,敏感性很高。
雙向瓊脂擴散試驗 測定時將加熱溶化的瓊脂或瓊脂糖澆至玻片上,等瓊脂凝固後,打多個小孔,將抗原和抗體分別加入小孔內,使抗原和抗體在瓊脂板上相互擴散。當二個擴散圈相遇,如抗原和抗體呈特異性的結合且比例適當時,將會形成抗原抗體複合物的沉澱,該沉澱可在瓊脂中呈現一條不透明的白色沉澱線。如果抗原與抗體無關,就不會出現沉澱線,因此可以通過該試驗,用特異性抗體鑑定抗原,或反之用已知抗原鑑定抗體。
另外沉澱線的特徵與位置不僅取決於抗原,抗體的特異性和濃度,而且與其分子的大小及擴散速度有關,當抗原體存在多種成分時,將呈現多條沉澱線以至交叉反應線,因此可用來檢查抗原和免疫血清的特異性、純度或濃度比較抗原之間的異同點,因而應用範圍較廣。
雙向瓊脂擴散實驗能幹什麼
4樓:櫻花茶道
常用於定性檢測,也可用於半定量檢測。將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉澱線。
根據有否出現沉澱線,可用已知的抗體鑑定未知的抗原,或用已知的抗原鑑定未知的抗體。臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血清中的甲胎蛋白,作為原發性肝癌的早期輔助診斷。 甲種胎兒蛋白(α-fetal protein, afp),是胎兒組織及體液中的正常組織成份。
胎兒在第9周才出現此種蛋白,13~19周達高峰,到21周後逐漸下降,胎兒出生後該蛋白即行消失或含量甚微,普通試驗方法檢查不出,而肝癌病人及個別卵巢癌或**癌病人的血清檢出有此種蛋白。 可溶性抗原(如蛋白質、多糖、脂多糖、病毒的可溶性抗原、結合蛋白等)與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉澱。 抗原和抗體加到瓊脂板上相對應的孔中,兩者各自向四周擴散,如兩者相對應,濃度比例合適,則經一定時間後,在抗原、抗體孔之間出現清晰緻密的白色沉澱線。
每一抗原與其相對應抗體只能形成一條沉澱線,若同時含有若干對抗原抗體系統,因其擴散速度的不同,可在瓊脂中出現多條沉澱線。且根據沉澱線融合情況,還可鑑定兩種抗原是完全相同還是部分相同。所以,可用此法來分析和鑑定標本中多種抗原或抗體成份,並用以測定抗原或抗體的效價。
在雙向瓊脂擴散試驗中,為什麼抗原抗體要選擇適當比例
5樓:春素小皙化妝品
當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉澱線。根據有否出現沉澱線,可用已知的抗體鑑定未知的抗原,或用已知的抗原鑑定未知的抗體。
沉澱線靠近抗原孔,則提示抗體含量大;靠近抗體孔,則提示抗原含量較多;不出現沉澱線則表明抗體或抗原的缺乏或抗原過剩;另外,如出現多條沉澱線,則說明抗原和抗體皆不是單一的成分。因此,可用於鑑定抗原或抗體的純度。
擴充套件資料
抗體效價的滴定雙向擴散試驗是抗血清抗體效價滴定的常規方法。固定抗原的濃度,稀釋抗體;或者抗原和抗體雙方皆作不同的稀釋,經過自由擴散,形成沉澱線,以出現沉澱線最高的抗體稀釋度為該抗體的效價。
抗原或抗體純度鑑定用混合抗原或抗體鑑定抗體或抗原,出現一條沉澱線說明待測抗原或抗體純,出現多條沉澱線說明不純。
雙向擴散試驗簡單易行,用途廣泛,但該技術靈敏度低,出現結果慢,不能精確定量,這些弱點在相當程度上限制了它的應用。
6樓:聽風
這是為了便於觀察,以便得出科學的結論。
雙向瓊脂擴散試驗常用於定性檢測,也可用於半定量檢測。將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉澱線。
根據有否出現沉澱線,可用已知的抗體鑑定未知的抗原,或用已知的抗原鑑定未知的抗體。臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血清中的甲胎蛋白,作為原發性肝癌的早期輔助診斷。
沉澱線靠近抗原孔,則提示抗體含量大;靠近抗體孔,則提示抗原含量較多;不出現沉澱線則表明抗體或抗原的缺乏或抗原過剩;另外,如出現多條沉澱線,則說明抗原和抗體皆不是單一的成分。因此,可用於鑑定抗原或抗體的純度。
雙向瓊脂擴散實驗中的抗體和抗原各是什麼?
7樓:匿名使用者
這個實驗中的抗原抗體並沒有特別固定,雙向瓊脂擴散試驗常用於定性檢測,也可用於半定量檢測。可用已知的抗體鑑定未知的抗原,或用已知的抗原鑑定未知的抗體。臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血清中的甲胎蛋白,作為原發性肝癌的早期輔助診斷。
雙向瓊脂擴散實驗含相同抗原表位的抗原沉澱線為什麼吻合 說下這個實驗形成沉澱線的原理 謝謝
8樓:歐陽俠
原理其實很簡單:
1、抗體是可溶的(這個沒問題吧?)
2、抗原
分為可溶性抗原和顆回粒性抗原,顆粒性抗原指答的就是像細菌、紅細胞這樣的顆粒,它們的凝集表現為凝塊。而可溶性抗原(比如毒素、多糖等)與抗體反應,則表現為沉澱或渾濁,需要數分鐘或數小時才能完成。
雙向瓊脂擴散實驗使用的就是可溶性抗原與抗體反應,形成的是沉澱,隨著抗原抗體量的多少,在擴散最恰當比例的位置形成沉澱線。
在雙向瓊脂擴散試驗中，為什麼抗原抗體要選擇適當比例
當兩者在最適當比例處相遇時，即形成一條清晰的沉澱線。根據有否出現沉澱線，可用已知的抗體鑑定未知的抗原，或用已知的抗原鑑定未知的抗體。沉澱線靠近抗原孔，則提示抗體含量大 靠近抗體孔，則提示抗原含量較多 不出現沉澱線則表明抗體或抗原的缺乏或抗原過剩 另外，如出現多條沉澱線,則說明抗原和抗體皆不是單一的成...
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