1樓：匿名使用者
藥紙片擴散法做敏感試驗時，待檢菌液的濃度為什麼必須為0.5麥氏比濁標準
簡述k-b紙片瓊脂擴散法原理及影晌因素。
2樓：匿名使用者
k-b紙片
瓊脂擴散法原理:將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上。紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分溶解後不斷地向紙片周圍區域擴散形成遞減的梯度濃度。
在紙片周圍抑菌濃度範圍內測試菌的生長被抑制,從而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度,並與該藥對測試菌的最低抑菌濃度(mic)呈負相關關係,即抑菌圈愈大,mic愈小。 影響紙片法藥敏試驗結果的因素有:
1培養基的質量,如ph、深度、硬度和表面溼度等。對每批商品化或自配mh瓊脂必須用標準質控菌株進行檢測,合格後方能使用;2藥敏紙片的質量,含藥量和儲存方式;3接種菌量正確與否是影響結果的重要因素之一,取決於麥氏比濁標準的配製,正確使用和儲存;4試驗操作質量;5孵育條件,溫度和時間;6抑菌圈測量工具的精度;7質控標準菌株本身的藥敏特性是否合格,有無變異。
什麼是進行藥物敏感試驗的基礎
做藥敏試驗需要什麼
3樓：平哥看
藥敏試驗根據美國臨床標準委員會（nccls）推薦的k-b瓊脂法進行，藥敏紙片選擇中國生物製品鑑定所藥敏紙片，試驗所選擇藥物必須包括下列抗生素：氨苄西林（amp），阿莫西林/克拉維酸（amc），頭孢噻吩（cft），頭孢噻肟（ctx），慶大黴素（gen），萘啶酸（nal），環丙沙星（cip），四環素（tbt），利福平（***），複方新諾明（**z）。藥敏結果判定標準按照nccls手冊2005版。
1. 操作方法：
（1）將待檢菌接種於普通營養瓊脂平板，37℃培養16～18小時，然後挑取普通營養瓊脂平板上的純培養菌落，懸於3ml生理鹽水中，混勻後與菌液比濁管比濁。以有黑字的白紙為背景，調整濁度與比濁管（0.5麥氏單位）相同。
（2）用無菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上擠壓去掉多餘菌液。用棉拭子塗布整個m-h培養基表面，反覆幾次，每次將平板旋轉60度，最後沿周邊繞兩圈，保證塗均勻。
（3）待平板上的水分被瓊脂完全吸收後再貼紙片。用無菌鑷子取藥敏紙片貼在平板表面，紙片一貼就不可再拿起。每個平板貼5張紙片，每張紙片間距不少於24mm，紙片中心距平皿邊緣不少於15mm。
在菌接種後15分鐘內貼完紙片。
（4）將平板反轉，孵育18～24小時後取出，用遊標卡尺測量抑菌圈直徑，從平板背面測量最接近的整數毫米數並記錄（附表6）。抑菌環的邊緣以肉眼見不到細菌明顯生長為限。有的菌株可出現蔓延生長，進入抑菌環，磺胺藥在抑菌環內出現輕微生長，這些都不作為抑菌環的邊緣。
結果判斷依據鑑定所藥敏紙片判定標準。
（5）每次藥敏試驗必須用atcc 25922大腸桿菌做質控。只有當質控菌株的抑菌圈直徑在允許範圍內測試菌株的結果才可以報告。atcc 25922的結果必須與測試菌株同時記錄和報告在附表6中。
0.5麥氏比濁管配製方法：
0.048m bacl2 (1.17% w/v bacl2 . 2h2o) 0.5ml
0.36n h2so4 (1%, v/v) 99.5ml
將二液混合，置螺口試管中，放室溫暗處儲存。用前混勻。有效期為6個月。
2. 注意事項：
(1) 製備mh瓊脂平板應用直徑90mm平皿，在水平的實驗臺上傾注。瓊脂厚為4±0.5mm（約25-30ml培養基），瓊脂凝固後塑料包裝放4℃儲存，在5 日內用完，使用前應在37℃培養箱烤乾平皿表面水滴。
傾注平皿前應用ph計測ph值是否正確(ph應為7.3)。ph過低會導致氨基糖苷類，大環內酯類失效，而青黴素活力增強。
(2) 藥敏紙片長期儲存應於－20℃，日常使用的小量紙片可放在4℃，但應至於含乾燥劑的密封容器內。使用時從低溫取出後,放置平衡到室溫後才可開啟，用完後應立即將紙片放回冰箱內的密封容器內。 過期紙片不能使用, 應棄去。
(3) 不穩定藥物如亞胺培南, 頭孢克洛, 克拉維酸複合藥等, 應冷凍儲存, 最好在-40 ℃以下。
(4) 保證質控菌株不變異的簡便方法，將新得到的凍幹菌株接種含血的m-h平板復活。然後每株細菌接種10支高層瓊脂管，放置冰箱儲存。每月取出一支，傳出細菌供常規用。
待用剩至最後一支，可傳種在m-h平板上，再接種一批高層瓊脂管備用。如此可保證原始菌種永不接觸抗菌素。
3.質量控制
質量控制方法 是用與常規實驗相同的操作方法，測定質控菌株的抑菌環。應使用新鮮傳代的菌種。接種菌液的塗布方法等均同常規操作，測定的抗菌素種類也應與常規測定的種類相同。
問答題，藥敏試驗kb法原理，結果報告，影響因素。
4樓：歐陽俠
原理：將含藥物的紙片貼在接種有待測菌的固體培養基上，通過藥物在培養基上的擴散，觀察是否出現抑菌環，推斷是否抑制細菌的生長。藥物擴散的距離越遠，藥物濃度越低抑菌能力越強，因此可根據抑菌環的大小，判定藥物對細菌的抑制作用強弱。
結果報告：敏感、中介、耐藥（即：s、i、r）影響因素：
1培養基的質量,如ph、深度、硬度和表面溼度等。對每批商品化或自配mh瓊脂必須用標準質控菌株進行檢測,合格後方能使用;
2藥敏紙片的質量,含藥量和儲存方式;
3接種菌量正確與否是影響結果的重要因素之一,取決於麥氏比濁標準的配製,正確使用和儲存;
4試驗操作質量;
5孵育條件,溫度和時間;
6抑菌圈測量工具的精度;
7質控標準菌株本身的藥敏特性是否合格,有無變異。
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