1樓：北京索萊寶科技****
提取線粒體dna方法：（僅供參考）
（1）triton法： 取10的7次方細胞沉澱,懸浮於5ml的triton溶解液中.溫和振盪片刻後,室溫下放置10min.
反應完畢的溶液以8000r/min離心1min,上清即為mtdna.
（2）鹼變性法： 取107細胞沉澱,依次加入溶液a(4℃)150λl,冰浴中將沉澱吹打分散後加入300λl溶液b(常溫),將eppendrof管緩慢顛倒10次,冰浴裂解變性6～8min,再加入225λl溶液c(0～4℃),輕柔混勻,冰浴復性20～25min.反應完畢的溶液以10000rmin離心6min,4℃,取上清.
1.3.3改進高鹽沉澱法[3] 取107細胞沉澱,加入溶液5500λl,混勻,2000r/min,10min,棄上清.
沉澱加溶液5500λl,混勻,3500r/min,10min,棄上清.沉澱加溶液950λl,混勻後加入20mg/ml蛋白酶k50λl和10%sds120λl,快速混勻.40℃過夜或50℃4h.
加入300λl飽和醋酸鈉,混勻,輕搖15s.15000r/min,4℃,15min,取上清eppendrof管中.取上清後步驟相同.
上清中加入等體積酚∶氯仿∶異醇(25∶24∶1),溫和振盪8min,10000r/min,10min4℃,取上層水相重複該過程抽提一次,輕取上層水相.加入2倍體積冰乙醇或等體積異丙醇,冰浴30min,15000r/min,10min,棄上清.用70%冰乙醇漂洗沉澱,15000rmin,2min,徹底去上清.
沉澱於空氣中自然部分乾燥25min,加入適量rte液溶解.貯於4℃
2樓：smile我的愛人
先裂解細胞後，按照梯度離心的方法分離細胞器
腸道菌群的dna提取試劑盒 能提出來線粒體的dna 嗎
3樓：理高格
酚－氯仿方法是提取核酸的經典方法，主要原理是利用核酸、蛋白等雜質在水相和有機相中溶解度不同而重新分配。
試劑盒原理是在特定溶液環境下（高鹽、低ph)使核酸吸附在固相介質（一般是矽膠膜）上，洗滌去除雜質後，再改變溶液環境使dna溶解到純水或te中。
酚氯仿方法經典、便宜，用的都是實驗室常用試劑，提純效率和純度都很高，但缺點是費時費力，苯酚和氯仿還有一定毒性，我見過的實驗室很少有用這種方法的。
試劑盒嚴格來說也分好多種，經典的是離心柱的，就是把矽膠膜固定在離心管中，類似於超濾膜，用離心力或者負壓讓液體通過矽膠膜，核酸就留在膜上。在經過洗滌、洗脫的步驟得到核酸。這種方法的優點是操作簡單、時間短，現在也能達到很高的質量，**也不貴。
缺點是不易放大，需要多次離心。
試劑盒基本步驟是先使樣本裂解，在特定溶液中通過離心流過矽膠膜，再經過幾次洗滌，最後加上洗脫液，離心後核酸就溶解到洗脫液中。具體的你可以根據你自己的需要到網上查一下說明書，現在做試劑盒公司的很多，步驟大同小異。
試劑盒也不是一定很便宜，對一些難度高（病毒核酸、法醫樣本核酸）或者要求高（去內毒素）的用途也比較貴。還有一種磁珠法提取，不需要離心，易於放大，可以用於自動化操作。這種高階一點的產品基本上是外國公司壟斷的。
我在提取線粒體時遇到了瓶頸，希望各位高手指點，謝謝！ 我使用的是碧雲天的線粒體提取試劑盒，在提取過程
4樓：質粒提問
最近我也在提線粒體，請問你有什麼問題？咱們共同**下
提取普通dna有線粒體dna嗎
5樓：北京索萊寶科技****
提取線粒體dna方法：（僅供參考）
（1）triton法： 取10的7次方細胞沉澱,懸浮於5ml的triton溶解液中.溫和振盪片刻後,室溫下放置10min.
反應完畢的溶液以8000r/min離心1min,上清即為mtdna.
（2）鹼變性法： 取107細胞沉澱,依次加入溶液a(4℃)150λl,冰浴中將沉澱吹打分散後加入300λl溶液b(常溫),將eppendrof管緩慢顛倒10次,冰浴裂解變性6～8min,再加入225λl溶液c(0～4℃),輕柔混勻,冰浴復性20～25min.反應完畢的溶液以10000rmin離心6min,4℃,取上清.
1.3.3改進高鹽沉澱法[3] 取107細胞沉澱,加入溶液5500λl,混勻,2000r/min,10min,棄上清.
沉澱加溶液5500λl,混勻,3500r/min,10min,棄上清.沉澱加溶液950λl,混勻後加入20mg/ml蛋白酶k50λl和10%sds120λl,快速混勻.40℃過夜或50℃4h.
加入300λl飽和醋酸鈉,混勻,輕搖15s.15000r/min,4℃,15min,取上清eppendrof管中.取上清後步驟相同.
上清中加入等體積酚∶氯仿∶異醇(25∶24∶1),溫和振盪8min,10000r/min,10min4℃,取上層水相重複該過程抽提一次,輕取上層水相.加入2倍體積冰乙醇或等體積異丙醇,冰浴30min,15000r/min,10min,棄上清.用70%冰乙醇漂洗沉澱,15000rmin,2min,徹底去上清.
沉澱於空氣中自然部分乾燥25min,加入適量rte液溶解.貯於4℃
為什麼線粒體和葉綠體都有DNA，線粒體和葉綠體為什麼是半自主性細胞器？
線粒體和葉綠體分別進行呼吸作用和光和作用都需要酶的參與 線粒體和葉綠體中的dna用來合成各自所需的酶 目前科bai 學家對此尚無定論 du,其中比較被大家認可的是葉綠體zhi和線dao粒體都是由遠古生內活在植物細胞內的微生物 像細菌之類容的 隨著時間的變化逐漸變成了植物細胞的一部分了.這一說法一方面...
什麼叫線粒體DNA的複製分離
被分離出來的線粒bai 體，可以du用自身的dna為模板zhi 合成出新的daodna。這就說明線粒體專dna也具有自我複製的能力。屬並具有自己的dna聚合酶。在電鏡下所見到的線粒體dna複製過程，基本上與細菌 病毒等複製方式相類似，也為半保留複製，並出現有叉型複製形分子。值得注意的是，線粒體dna...
線粒體中的DNA和細胞核中的DNA是相同的嗎
肯定不同，細胞核中 抄的dna是用來襲做遺傳密碼和合成蛋白bai質用的，而線粒du體中的dna是自己攜帶的與細zhi胞核中的不同，線dao粒體有自己的一套遺傳系統，能按照自己的dna編碼合成一些蛋白質。可以這樣說，你自己身體中線粒體中的dna是你的母親直接遺傳給你的，與細胞核中的無任何關係。線粒體和...