不同原理的細胞支原體汙染檢測有哪些?

2025-02-09 01:44:41 字數 1320 閱讀 3715

1樓:網友

經典的方法是菌落培養法,耗時很長,有時需要28天,應用受到很大限制。

螢光染料常用於檢測支原體汙染,使用方便,但是誤差較大,需要有豐富的使用經驗才能判斷較為準確。

現在用得最多的是pcr法,這類產品廠家很多,我們用得較多的是炎熙的支原體pcr檢測試劑盒,靈敏度高,也很穩定。

較新出現的是發光法檢測,根據支原體特異的酶活性與發光反應相關聯,靈敏度能達到接近pcr法,用得較多的是lonza的試劑盒。

細胞培養中的支原體汙染用什麼方法最好

2樓:北京索萊寶科技****

組織細胞培養工作中,可以從以下幾方面來預防支原體的汙染:控制環境汙染;嚴格實驗操作;細胞培養基和器材要保證無菌;在細胞培養基衝加入適量的抗生素。

抗生素主要用於消毒培養液,是培養過程中預防微生物汙染的重要手段,也是微生物汙染不嚴重時的「急救」方法。不同抗生素殺滅微生物不同,應根據需要選擇。

在細胞培養過程中如果發現破碎的細胞甚多,培養細胞需要頻繁改善營養環境才能支援長期傳代培養時,應該懷疑支原體汙染。支原體汙染難以觀察特殊的外觀變化,培養液也不渾濁。

支原體汙染細胞後,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有:抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。要注意的是:

支原體沒有細胞壁,故作用於細胞壁生物合成的抗生素,如內醯胺類、萬古黴素等是不敏感的;對多粘菌素、利福平、磺胺藥物普遍耐火藥。對支原體最有抑制活性抗生素是四環素類、大環內酯類等,氨基糖苷類、氯黴素對支原體有較小的抑制作用。必要時更換所有培養用物。

通常,濾過除菌的方法對支原體是沒有作用的。

由於一些微生物,如支原體,病毒等能通過濾膜,所以過濾藥品仍潛在被外源微生物汙染的危險,近年來,60co輻射滅菌技術在醫藥、食品等領域廣泛應用,由於輻射滅菌能夠徹底殺滅所有微生物。有試驗證實以2mrad輻射處理的各培養基樣品達到了無菌要求,經多批培養試驗,輻射滅菌安全可靠;輻射滅菌的培養基營養效能不低於過濾組,證明輻射滅菌對培養基效能無不良影響;對血清的輻射滅菌試驗效果也表明60coγ射線不影響培養效果。把乾粉培養基經無菌操做定量分裝於滅菌容器內,輻射後以乾粉原型貯藏,不但培養基的純淨性得到保障,而且營養效能較過濾後以水溶液形式儲存更穩定,對谷氨醯胺等這類水溶液不穩定者特別合適。

支原體汙染的介紹

3樓:驗證碼丶0斸

在細胞培養過程中,支原體感染發生率達到63%,因嫌槐而細胞培養過程中被支原體汙染是乙個世界性的難題。當細隱謹胞(特別是傳代細胞)被支原體汙染後,細胞內芹攜友的dna、rna及蛋白表達發生改變,而細胞的生長率一般並未發生顯著的影響,因而細胞被支原體汙染一般難以察覺。

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