製備單轉殖抗體用於篩選的培養基含有什麼

2025-03-27 12:10:04 字數 1641 閱讀 3889

1樓:網友

hat系次黃嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶呤(aminopterin)和胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidin)三種物質各英告殲氏文首字之綴列,hat培養基也就是指含有這三種物質的細胞培養基。對具有合成dna原料的核苷酸的形成上,在細胞內具有起始合成途徑(de novo pathway)和中間合成途徑(salvage pa-thway)。由於氨基蝶呤可阻礙起始合成途徑,所以培養基中含有它時,細胞便只有中間合成途徑,所以必須襪散供給核苷酸。

至於缺失中間合成途徑的細胞,可失去增殖能力臻於死亡。根據這一點,不僅把混存於細胞群中的正常細胞,通過試管內培養進行選擇,例如嘌呤的中間合成途徑缺失株和嘧啶的中間合成途徑缺失株,由於可以互補,所以兩者的雜改轎種細胞,即使在氨基蝶呤的存在條件下也可以增殖。在這種情況下,利用hat培養基可對雜種細胞進行選擇。

次黃嘌呤和胸腺嘧啶脫氧核苷可作為中間合成途徑的原料而進行新增。

2樓:匿名使用者

激素,氨基酸,核苷酸,血清,只能讓雜交的細胞成長的篩選成分。

製備單轉殖抗體時,選擇培養基要選擇融合的(  )。

3樓:考試資料網

答案】:b單轉殖抗體技術的流程為:①小鼠脾細胞和骨髓瘤細胞在聚乙二醇(peg)作用下發生細胞融合;②加入hat選擇培養基(唯亮含h、a和t)後,未融合的骨髓瘤細胞因其從頭合成途徑被氨基蝶呤阻斷,指汪寬而又缺乏hgprt不能利用補救途徑合成dna,從而死亡;③未融合的脾細胞難以在體外培養而死陵卜亡;④融合細胞因從脾細胞獲得hgprt,故可在hat選擇培養基中存活和增殖。

單轉殖抗體時體內培養與體外培養各自的優缺點

4樓:養生達人花花

1) 動物體內生產單抗。

的方法。迄今為止,通常情況下均採用困肆哪動物體內生產單抗的方法。

優點:該法操作簡便、經濟。

缺點:腹水。

中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括ig),因此在很多情況下要提純後才能使用,而且還有汙染動物病毒的危險,故而最好用spf級小鼠。

2) 體外培養生產單抗的方法。

優汪碼點:單轉殖抗體。

的濃縮和純化比較方便。

缺點:需要特殊裝置。而且這種方法制備的單抗量極為有限,不適用於單抗的大規模生產。要想在體外大量製備單抗,就必須進行雜交瘤細雹局胞的大量(高密度)培養。單位體積。

內細胞數量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產量就越大。

單轉殖抗體是怎麼製備的?

5樓:哈秋聊教育

單轉殖抗體是由單一b細胞轉殖產生的高度均。

一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常採用雜交瘤技術來製備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏b細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為b細胞雜交瘤。

用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群,可製備針對一種抗原表位的特異性抗體,即單轉殖抗體。

單轉殖抗體是人工製備的雜交瘤細胞生產的,雜交瘤細胞是由乙個經抗原啟用後的b細胞與乙個骨髓瘤細胞融合形成。單轉殖抗體優點:純度高,靈敏度高,特異性強,交叉反應少,製備的成本低。

缺點:對技術有一定的要求,而且通過抗原的化學處理很容易丟失表位。

運用動物細胞工程技術製備單克隆抗體的正確操作步驟是

要獲得單克隆bai 抗體,首先需要du2製備特異性抗原zhi 將該抗原dao注射給3免疫動物 然後回4製備免疫答的細胞和骨髓瘤細胞 通過物理法 化學法或生物法7誘導細胞融合 由於融合細胞中可能含有自身融合細胞,因此需要1篩選雜交瘤細胞 在通過篩選獲得5能產生特定抗體的雜交瘤細胞 最後6大量培養雜交瘤...

體細胞雜交技術可用於單克隆抗體的製備和克隆動物對嗎

體細胞雜交技術可用於單克隆抗體的製備,但是目前為止,還無法用於克隆動物 是生物工程細胞融合技術。不是 體細胞雜交 體細胞雜交技術可用於克隆動物和製備單克隆抗體。請問這句話為什麼是錯的。體細胞雜交技術是植物細胞工程的技術手段,克隆動物和製備單克隆抗體是動物細胞工程的應用,克隆動物運用的技術手段是細胞核...

單轉殖抗體的轉殖號什麼意思

轉殖號一般是用來標示單轉殖抗體。的抗原表位的。但是這個號本身就像實驗室樣品編號一樣,沒有具體的含義,只是標示這個抗體篩選自哪一株細胞。因為即使是抗同乙個抗原的抗體,識別抗原的位點慎昌純也會有所區別,只有轉殖號一致的抗體,抗原表位是完全相同的,因此在抗原識別的各種特性上都一樣。例如抗a蛋白的抗體,用這...