1樓:匿名使用者
擴增dna,體內有結核桿菌就能提取出他的dna,經pcr擴增後dna數量就會變多(pcr擴增是特異性的,也就是說只擴增結核桿菌dna),數量多來了就方便檢測了
2樓:匿名使用者
polymerase chain reaction (pcr)是bai一個化學反應:聚合酶鏈式反du應。zhi是一種分子生物學技術,dao用於擴增特定的
內dn**段,被廣泛地運用在醫
容學和生物學的實驗室,例如用於判斷檢體中是否會表現某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因複製,以及親子鑑定。
定量pcr中的δrn值指的是什麼啊?
3樓:團長是
δrn = r+n - r-n ,計算δrn ,其中, r+n 是表示每點測量的熒光強度, r-n 表示熒光基線強度
實時熒光定量pcr是利用熒光訊號的變化,實時檢測pcr擴增反應中每次迴圈擴增產物量的變化,通過迴圈閾值和標準曲線的分析對標本中起始模板拷貝數進行定量分析。
擴充套件資料:特點實時熒光定量pcr由於熒光物質的應用,可以通過光電傳導系統直接探測pcr擴增過程中熒光訊號的變化以獲得定量結果,克服了常規pcr的許多缺點,具有如下優勢:
1能對模板定量;
2封閉反應,無需pcr後處理,汙染少,假陽性率低;
3觀察和記錄自動化,結果直觀,避免人為判斷帶來的誤差;
4工作效率高,利於實現高通量檢測。
實時熒光定量pr的缺點表現:
1需要特殊裝置以及熒光探針,成本較高;
2不能顯示pcr產物的片段長度;
3定量準確性還有待提高。
4樓:藍色葡萄風信子
δrn 的值表示pcr過程中探針降解的量,就是pcr產物的量實時定量pcr的發明歸功於兩個重要的發現:
一是發現dna taq酶有5′ 3′外切酶活性二是利用熒光能量傳遞技術構建了雙標記寡核苷酸探針即taqman探針
在pcr過程中,這些熒光訊號可以被探測器所「即時」捕獲,電腦軟體可以通過等式
δrn = r+n - r-n 計算δrnr+n 是表示每點測量的熒光強度
r-n 表示熒光基線強度
實時熒光定量pcr與普通pcr的區別是什麼?結果有何異同?能說明的問題是什麼?
5樓:麼破1自我
二者結果相同。都能說明生物體外的特殊dna複製的整個過程的擴增效率和溶解溫度情況。
區別:1、二者系統組成不同
熒光定量pcr儀比普通的pcr儀多了熒光訊號採集系統和計算機分析處理系統。
2、二者原理不同
熒光定量pcr實時監測與dna結合的熒光染料激發的熒光,普通ocr通過檢測插入dna中核算染料的量來測定pcr最終產物量。
3、二者反應要求不同
熒光定量pcr對擴增片段有較高的要求,一般為100-300bp,普通pcr可以擴增長點的片段。
4、二者應用不同
熒光定量pcr主要是用來定量分析和確定基因轉錄水平的,普通的pcr儀是做定性分析和擴增基因片段,定量pcr儀可以做普通pcr儀的工作,反之不行。
5、二者測量成本不同
定量pcr儀**較為昂貴,普通的基因擴增儀(pcr儀)只能夠定性地分析是否存在目標片段。但是**要低很多,而且執行成本也要低很多。
實時熒光定量pcr技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的侷限,實現了每一輪迴圈均檢測一次熒光訊號的強度,並記錄在電腦軟體之中,通過對每個樣品ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。
6樓:匿名使用者
原理不同:熒光定量pcr實時監
測與dna結合的熒光染料激發的熒光;普通pcr通過檢測插入dna中核算染料的量來測定pcr最終產物量,一般是紫外光。
反應要求:熒光定量對擴增片段有較高的要求,一般為100-300bp;普通定量可以擴增長點的片段。如果不需要檢測產物分子量大小,熒光定量可以不進行電泳就對產物進行定量分析,普通pcr必須電泳。
結果:熒光定量可以實現精確定量,普通pcr則不行。熒光定量體現可以看到整個擴增過程,可以看到擴增效率,溶解溫度,直接得到的標準曲線等,這些是普通pcr無法實現的。
如果還不清楚建議去丁香園等**逛逛,希望可以幫到你
7樓:匿名使用者
所謂實時熒光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入熒光基團,利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序,最後通過標準曲線對未知模板進行「定量分析」的方法。
記住,實時熒光定量是定量分析
8樓:匿名使用者
熒光pcr是為了測量mrna表達量的 普通pcr是為了擴增目的片段的
9樓:匿名使用者
熒光定量是定量的,普通pcr是定性的,結果一個是說明含有多少,另一個說明有還是沒有,前者更精確一點
什麼是實時熒光定量pcr,檢測指標是什麼?
10樓:奔馬的香香豬
實時檢測pcr擴增,在擴增的指數期對起始模板進行定量,在擴增過程中,熒光訊號隨著pcr產物的增加而增強。我們實驗室使用的bioghsc super probe kit pcr實驗檢測dna,測得的迴圈數在28左右,整個pcr過程有4個階段,基線期---指數增長期---線性增長期---平臺期,指數增長期內,pcr有高度重複性,一般的檢測指標是看線性圖譜的擴增曲線的起跳值(ct值)。
11樓:錢塘書生
你要檢測什麼東西啊?
實時熒光定量pcr是檢測模板dna的拷貝數、基因表達量、基因突變等的
12樓:閱微基因
所謂實時熒光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入熒光基團,利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。參考資料:http:
請教下大神,實時定量pcr(qpcr)實驗,看擴增曲線的意義是什麼?
13樓:科研高手
你好,擴增曲線可以粗略地判斷擴增效
率。sybr green的雙delta ct法要求目的基因和內參的擴增效率基本一致。如果不一致,需要對公式進行修正,部分qpcr儀的配套軟體可以做到,直接輸入每對引物的擴增效率。
但無論如何,保證高擴增效率是實驗成功的關鍵。如果擴增效率一致,不同ct的曲線顯示出來就基本是平行的位移,其傾斜程度基本一致。而如下圖一樣,一條比較「陡」,另一條比較「平」,那麼意味著擴增效率不一致。
有可能是引物效率不一,或者個別樣品、反應孔存在抑制pcr的汙染等。
來自:肽度時界威客吳博士,有科研難題、科研需求就上肽度時界吧!
什麼是實時熒光定量pcr?有什麼作用?請詳細說明。
14樓:月光_傾城
好多生物工作做廣告做培訓噢。你怎麼不去看一下。
結核桿菌入侵機制
只是結核桿菌入侵機制吧。能提出這個問題說明你也是搞這行的，我就直接說機制咯 結核桿菌可以通過呼吸道，粘膜，外露創傷或者血液傳播。進入人體後，首先能引起機體免疫應答，也就是特異性免疫，這主要是效應t細胞在其作用。這個過程機體會釋放大量吞噬細胞，也就是巨噬體。結核桿菌之所以容易感染人體而不容易被殺死就是...
如何用PCR技術檢測結核桿菌
結核桿菌可以導致全身性疾病，特別是在發展中國家，其發病率較高，危害性極大.近幾年結核桿菌的變異性較大，對抗癆藥物的耐藥性增加，從而使結核病的發病大幅度增高.雖然傳統的塗片抗酸染色 細菌培養以及胸片檢查對大部分結核能作出正確的診斷，但對某些病人亦可造成誤診或漏診 動物接種雖特異性較高，但因時間較長，不...
什么叫痰塗片陽性肺結核，什麼叫痰塗片陽性肺結核
就是說已經感染了抗酸桿菌，得了肺結核，陽性表示目前極有可能傳染給其他人，屬於較厲害的傳染期，儘快 國家一線藥物都是免費的。簡單的說就是痰檢中發現抗酸桿菌的肺結核患者 痰培養與痰塗片的區別？他們各自有什麼優勢？痰塗片只能檢查肺結核麼？痰培養是將痰液均勻塗抹在細菌培養基上進行細菌培養，觀察是否有治病菌。...