1樓:匿名使用者
用於求出比色常數k-單位吸光度值相當樣品的質量 k=c/od 作圖求斜率即可 這樣才能根據樣品的吸光度求出樣品的濃度 進而得知水解情況 即酶活 k受許多因素影響 不是一個規定的值 每次實驗都要分別測定
澱粉酶的活性測定為什麼要用麥芽糖製作還原糖的標準曲線
2樓:匿名使用者
穀物種子萌發時澱粉酶活力的測定
幾乎所有植物中都存在澱粉酶,尤其是萌發的禾穀類種子,澱粉酶活性最強.主要是α-澱粉酶和β-澱粉酶.種子萌發時,澱粉酶活性隨萌發時間迅速增加,將澱粉分解成小分子糖類,供幼苗生長.
α-澱粉酶隨機水解澱粉的α-1,4-糖苷鍵,作為澱粉分解的起始酶而起主要作用;其水解產物為麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原性糖;β-澱粉酶水解非還原端的第二個α-1,4-糖苷鍵,水解產物為麥芽糖,並能使一部分糊精糖化.本實驗以萌發種子為材料,測定其中α-澱粉酶和β-澱粉酶活性的差異.
【原理】
兩種澱粉酶具有不同理化特性,α-澱粉酶不耐酸,在ph3?6以下迅速鈍化;β-澱粉酶不耐熱,在70°C下15min則被鈍化.據此,在測定時鈍化其中之一,就可以測定出另一種酶的活力,本實驗採用加熱鈍化β-澱粉酶測出α-澱粉酶活力,再與非鈍化條件下測得的總澱粉酶活力比較,求出β-澱粉酶活力.
澱粉的水解產物麥芽糖及其他還原性糖能與3,5-二硝基水楊酸試劑反應,使其還原生成紅色3-氨基-5-硝基水楊酸.在一定範圍內,其顏色深淺與澱粉酶水解產物的濃度成正比,可用麥芽糖(或葡萄糖)濃度表示,用比色法測定澱粉生成的還原糖的量,以單位重量樣品在一定時間內生成的麥芽糖的量表示酶活力.
【儀器與用具】
分光光度計;離心機;恆溫水浴器;研缽;具塞刻度試管25ml 13支,刻度吸管1ml、2ml、5ml各1支;容量瓶50ml 2支.
【試劑】
麥芽糖標準液(1mg/ml):稱取100mg麥芽糖,用蒸餾水溶解並定容至100ml.
dns試劑(3,5-二硝基水楊酸):精確稱取3,5-二硝基水楊酸1g,溶於20ml 12mol/l naoh溶液中,加入50ml蒸餾水,再加入30g酒石酸鉀鈉,待溶解後用蒸餾水定容至100ml.蓋緊瓶塞,勿使co2進入.
若溶液混濁,可過濾後使用.
1mol/l ph5?6的檸檬酸緩衝液:a液(0?
1mol/l檸檬酸):稱取分析純檸檬酸21?01g,用蒸餾水溶解並定容至1l;b液(0?
1mol/l檸檬酸鈉):稱取檸檬酸鈉29?41g用蒸餾水溶解並定容至1l;取a液55ml與b液145ml混勻,即為0?
1mol/l ph5?6的檸檬酸緩衝液.
1%澱粉溶液:稱取1g澱粉溶於100ml 1mol/l ph5?6的檸檬酸緩衝液中.
酶活力測定中為什麼各樣品與底物測定的時間要嚴格一致
3樓:淵源
酶活力測復定中為什麼各樣品與底
制物測定的時bai間要嚴格一致?
du答:本實驗中zhi用磷酸苯二鈉為底物。dao磷酸苯二鈉經過酸性磷酸酯酶作用,水解以後即生成酚和 無機磷,其反應式如下:
o || c6h6-o-p-ona + h2o ≈ c6h6-oh + na2hpo4 | ona 由上式可見,當有足夠量的底物磷酸苯二鈉存在時,酸性磷酸酯酶的活力越高,所生成的產物酚和無機磷也越多。反應速率只在反應的最初一段時間範圍內保持恆定。隨著時間的延長,底物濃度的降低和產物濃度的升高,使逆反應加強。
凝血酶時間測定為什麼用乏血小板血漿
這樣可以控制 由於個體之間血小板數量不同而導致凝血時間的長短.血漿凝血酶原時間測定與凝血酶時間測定有什麼區別 樓主您好 1 凝血酶時間是反映的體內抗凝物質,所以它的延長說明纖溶亢進,測定的是加入標準化凝血酶後纖維蛋白的形成時間,所以在低 無 纖維蛋白原症,dic以及類肝素物質存在 如肝素 sle和肝...
化學需氧量的測定為什麼要做空白實驗
不做空白也行啊,只要給出一個您已經知道的化學需氧量的標準樣就行 不用已經知道的點只可以做出斜率,而不知道截距,再給出一個點,才能知道截距的呀 用於校正一般環境下對系統的影響 化學需氧量的測定實驗為什麼要做空白實驗 分析bai化學實驗做空白實驗為du了減少系統誤差。zhi以測定dao自來水的硬度為內例...
測定酶促反應速率為什麼要以初速度
酶活力大bai小,不是要去表du示酶催化效率的高低的.它是zhi 酶含量的dao一個單位.是因為在檢查酶是否專存在及含量的時屬候,不能直接用重量或者體積來衡量,通常是用催化某一化學煩贏得能力來表示,就是用酶活力大小表示.現在我們來看你的問題 我們很清楚酶促反應中,產物的生成量對反應時間的圖形,它是一...