pcr引物到底是什麼?在PCR過程中起什麼作用

2021-05-17 13:44:52 字數 5661 閱讀 1534

1樓:浦恨真汝嬋

pcr技術中的引物的

bai本質和作用。du

引物是一小

zhi段單鏈dna或rna,引物可以做為daodna複製專開始時dna聚合酶的結合位屬點,在細胞外的條件下,只有通過引物,dna才可以開始進行復制。

引物是人工合成的兩段寡核苷酸序列,一個引物與感興趣區域一端的一條dna模板鏈互補,另一個引物與感興趣區域另一端的另一條dna模板鏈互補。

啟動子和引物兩者的區別:

啟動子是dna分子上能與rna聚合酶結合並形成轉錄起始複合體的區域,在許多情況下,還包括促進這一過程的調節蛋白的結合位點,決定rna聚合酶轉錄起始位點的dna序列。

引物是一小段單鏈dna或rna,引物可以做為dna複製開始時dna聚合酶的結合位點,在細胞外的條件下,只有通過引物,dna才可以開始進行復制。引物是人工合成的兩段寡核苷酸序列,一個引物與感興趣區域一端的一條dna模板鏈互補,另一個引物與感興趣區域另一端的另一條dna模板鏈互補。

啟動子是位於結構基因前的非編碼區對轉錄起調控作用的一段dna序列。引物則是遊離於dna複製的模板鏈之外的對dna複製起調控作用的一小段單鏈dna或rna。

2樓:陀芷天鈔彭

通俗的講,引物就是為了增幅目的dna而匯入的短小dn**斷,在pcr反應中,新合成的dna是要接在引物上才能繼續按照模版dna複製。引物的設計因需要增幅的序列而不同。

3樓:卿天亦逮季

我是bai高中生(至少三個du月以前還是)所zhi以我所說的你大概可以dao理解

pcr的意思是聚合內酶鏈式反應,是容一種擴增dna的技術(就是複製dna)

dna複製其實很複雜,dna聚合酶有一種特性,他只能把脫氧核糖核酸接到一段現有的dna或rna上,這樣你就能明白了吧。第一個位置上的脫氧核糖核酸沒辦法弄到了。在人體內這個部分是由rna聚合酶完成的,先由這個酶在基因的第一段複製出一小段rna,然後再由dna聚合酶在後面添上以後的dna。

這段rna就叫rna引物。等都填完後再由引物酶把這段rna切掉換成dna(這種做法有一個毛病,會引起5'端縮短,不過你不需要理解)

pcr中可以用已經合成的dna引物來代替rna引物。這些就是引物的作用

4樓:朋珍瑞潮靖

。。。高中。抄。。現

在高中生物還有pcr啊。。。真高階

引物就是一段小的dn**段,作用麼,簡單的說就是定位的作用,讓pcr知道該p哪一段dna咯~

就好比是一條很長的鎖鏈,你只想要得到中間的某一段,頭上的和尾上的多於部分都是不需要的,你要告訴生產廠家你要的那段的位置,他們才能幫你準確的複製你想要的那段,所以你就需要兩個小片段,在你要的那段兩端做上標記,以方便廠家確認位置,但這兩端標記呢,又不是隨便找的,而是和你要的那小段的兩端是一樣的,這樣廠家就能根據這兩端,再加上整條鏈子的特性來幫你生產複製你需要的那段了。pcr的引物起的就是這個作用。

不知道比喻的是否準確。。。希望你能明白。。。

pcr技術中「引物」是什麼?有什麼作用?引物需要複製嗎?

5樓:90阿

引物是一段短的單鏈rna或dn**段,可結合在核酸鏈上與之互補的區域,其功能是作為核苷酸聚合內作用容的起始點,核酸聚合酶可由其3′端開始合成新的核酸鏈。體外人工設計的引物被廣泛用於聚合酶鏈反應、測序和探針合成等。

引物是人工合成的兩段寡核苷酸序列,一個引物與感興趣區域一端的一條dna模板鏈互補,另一個引物與感興趣區域另一端的另一條dna模板鏈互補。

在pcr(聚合酶鏈式反應)技術中,已知一段目的基因的核苷酸序列,根據這一序列合成引物,利用pcr擴增技術,目的基因dna受熱變性後解鏈為單鏈,引物與單鏈相應互補序列結合,然後在dna聚合酶作用下進行延伸,如此重複迴圈,延伸後得到的產物同樣可以和引物結合。   pcr引物設計的目的是找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板dna序列。如前述,引物的優劣直接關係到pcr的特異性與成功與否。

對引物的設計不可能有一種包羅永珍的規則確保pcr的成功,但遵循某些原則,則有助於引物的設計。

6樓:匿名使用者

pcr技術中「引物」是一小段dna,其作用是:作為dna複製的起點,當一次複製完成後,引物也不到了一條鏈上,下次複製時,引物也需複製。

7樓:大地君

引物就是一段dna啊,能讓dna聚合酶識別並在引物後進行鹼基互補配對。需要的

pcr引物到底是什麼?在pcr過程中起什麼作用?

8樓:等著吃鳥的蟲

我是高中生(至少來三個月以前還是源)所以我所說的你大概可以理解pcr的意思是聚合酶鏈式反應,是一種擴增dna的技術(就是複製dna)

dna複製其實很複雜,dna聚合酶有一種特性,他只能把脫氧核糖核酸接到一段現有的dna或rna上,這樣你就能明白了吧。第一個位置上的脫氧核糖核酸沒辦法弄到了。在人體內這個部分是由rna聚合酶完成的,先由這個酶在基因的第一段複製出一小段rna,然後再由dna聚合酶在後面添上以後的dna。

這段rna就叫rna引物。等都填完後再由引物酶把這段rna切掉換成dna(這種做法有一個毛病,會引起5'端縮短,不過你不需要理解)

pcr中可以用已經合成的dna引物來代替rna引物。這些就是引物的作用

9樓:匿名使用者

通俗的講,引物就是為了增幅目的dna而匯入的短小dn**斷,在pcr反應中,新合成的dna是要接在引物上才能繼續按照模版dna複製。引物的設計因需要增幅的序列而不同。

10樓:好問小貓

。。。高中。。。現在高中生物還有pcr啊。。。真高階引物就是一段小的dn**段,作用回麼,簡單的說就是定位答的作用,讓pcr知道該p哪一段dna咯~

就好比是一條很長的鎖鏈,你只想要得到中間的某一段,頭上的和尾上的多於部分都是不需要的,你要告訴生產廠家你要的那段的位置,他們才能幫你準確的複製你想要的那段,所以你就需要兩個小片段,在你要的那段兩端做上標記,以方便廠家確認位置,但這兩端標記呢,又不是隨便找的,而是和你要的那小段的兩端是一樣的,這樣廠家就能根據這兩端,再加上整條鏈子的特性來幫你生產複製你需要的那段了。pcr的引物起的就是這個作用。

不知道比喻的是否準確。。。希望你能明白。。。

11樓:匿名使用者

一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板dna序列

12樓:johnny王子

現在的高中生物就有這個啦??!

my god!

就是一段引導合成的小序列,一般在20-27個bp左右為佳

pcr中,引物是什麼意思?

13樓:淵源

引物就是為了增幅bai目的dna而導du入的短小dn**斷,在zhipcr反應中,新合成的dna是要接在引dao物上才能繼續按照模

專版dna複製屬.引物的設計因需要增幅的序列而不同.舉個例子來說,你要增幅如下序列:

accctcccgccccccccgtat

(互補鹼基不寫了)

那麼一般來說,你就要匯入以accctc結尾的引物使得增幅繼續下去,具體方法和注意事項樓主可以看gee_an大俠的資料.

查了一下測序公司的網頁,如果要同定微生物,樓主需要準備如下東東:

1、待測菌體.試管或培養皿都可以,但必須是純粹的待測菌體,不能含有其他的微生物.

2、提純的dna.如果1有致病性或傳染性,那麼樓主就得自己提純dna再交給測序公司.dna純度要求可以做pcr.

pcr技術擴增目的基因中的引物有什麼作用?

14樓:曜血

引物的功能是作為核苷酸聚合的起始點,引導dna的合成。

能設定迴圈次數,及控制複製次數。pcr迴圈次數主要取決於模板dna的濃度。一般的迴圈次數選在30~40次之間,迴圈次數越多,非特異性產物的量亦隨之增多。

15樓:匿名使用者

1.與dna複製中的作用類似,但是在細胞內有其他的酶進行這項工作。在pcr技術中,只加入了四種底物和taq酶,模板。dna聚合酶只能在有3『端時才能複製下去。

2.決定擴增片段。擴增目的基因,就要根據目的基因兩側序列設計引物,這樣只有目的基因擴增了,得到大量目的基因。這是pcr技術的一項重要應用。

16樓:霍文宣

沒有引物,dna複製的起點就不確定了,用於dna複製的dna單鏈是很長的,不光是目的基因(和其他你所需要的),而在基因工程中我們需要的dn**段比較起來是很短的,也就是說只要一對引物(這個寡聚核苷酸片段)之間所夾的這一部分的dn**段,為了準確地合成這段所需基因,我們需要一對引物的參與。

17樓:匿名使用者

引物可以做為dna複製開始時dna聚合酶的結合位點,在細胞外的條件下,只有通過引物,dna才可以開始進行復制。引物是已知序列的dna小片段。

pcr的基本原理是什麼?其基本流程如何?

18樓:靠名真tm難起

一、基本原理:pcr技術的基本原理類似於dna的天然複製過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。dna的半保留複製是生物進化和傳代的重要途徑。

雙鏈dna在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在dna聚合酶的參與下,根據鹼基互補配對原則複製成同樣的兩分子拷貝。

在實驗中發現,dna在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低後又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制dna的變性和復性,加入設計引物,dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的體外複製。

二、pcr由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:

1、模板dna的變性:模板dna經加熱至93℃左右一定時間後,使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備。

2、模板dna與引物的退火(復性):模板dna經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合。

3、引物的延伸:dna模板--引物結合物在72℃、dna聚合酶(如taqdna聚合酶)的作用下,以dntp為反應原料,靶序列為模板,按鹼基互補配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板dna鏈互補的半保留複製鏈。

重複迴圈變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的「半保留複製鏈」,而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。每完成一個迴圈需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

19樓:倚樓丶丶聽風雨

pcr的一般過程是什麼

20樓:匿名使用者

pcr是在試管中進行的dna複製反應,基本原理是依據細胞內dna半保留複製的機理,以及體外dna分子於不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉變的性質,人為地控制體外合成系統的溫度,以促使雙鏈dna變成單鏈,單鏈dna與人工合成的引物退火,然後耐熱dna聚合酶以dntp為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈dna。pcr全過程每一步的轉換是通過溫度的改變來控制的。需要重複進行dna模板解鏈、引物與模板dna結合、dna聚合酶催化新生dna的合成,即高溫變性、低溫退火、中溫延伸3個步驟構成pcr反應的一個迴圈,此迴圈的反覆進行,就可使目的dna得以迅速擴增。

dna模板變性:模板雙鏈dna?單鏈dna,94℃。

退火:引物+單鏈dna?雜交鏈,引物的tm值。

引物的延伸:溫度至70℃左右,taqdna聚合酶以4種dntp為原料,以目的dna為模板,催化以引物3』末端為起點的5』→3』dna鏈延伸反應,形成新生dna鏈。新合成的引物延伸鏈經過變性後又可作為下一輪迴圈反應的模板pcr,就是如此反覆迴圈,使目的dna得到高效快速擴增。

pcr的原理是什麼,它有什麼用途

pcr技術必須有人工合成的合理引物和提取的樣品dna,然後才進行自動熱迴圈,最後進行產物鑑定與分析。引物設計與合成目前只能在少數技術力量較強的研究院 所進行,臨床應用只需購買pcr檢測試劑盒就可開展工作,pcr自動熱迴圈中影響因素很多,對不同的dna樣品,pcr反應中各種成份加入量和溫度迴圈引數均不...

定量pcr中的Rn值指的是什麼啊

rn r n r n 計算 rn 其中,r n 是表示每點測量的熒光強度,r n 表示熒光基線強度 實時熒光定量pcr是利用熒光訊號的變化,實時檢測pcr擴增反應中每次迴圈擴增產物量的變化,通過迴圈閾值和標準曲線的分析對標本中起始模板拷貝數進行定量分析。擴充套件資料 特點實時熒光定量pcr由於熒光物...

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