細胞培養的上清中有目的蛋白需要用來刺激其他細胞,怎麼去除培養

2021-03-20 05:15:26 字數 4334 閱讀 3592

1樓:

有區別。細胞培養液是一種含有細胞分泌蛋白和死細胞的細胞培養液,而細胞因子是免疫反應、造血和炎症反應產生和維持所必需的蛋白質類物質。

如何用western blot方法從細胞培養上清中檢測目的蛋白

2樓:

western blot中蛋白樣品調節濃度有很多方法 先檢測出各個蛋白樣品的濃度,根據體積通過不同單位的loading buffer將樣品稀釋成不同的體積,即可以保證各個蛋白樣品濃度一致 或者在樣品裂解的時候,用裂解液或者pbs去稀釋蛋白樣品,達到調節濃度的。

如何提取細胞上清中的有意義蛋白

3樓:文帝寶寶

做細胞培液上清中的蛋白,應該用無血清培液。光牛血清中的蛋白就夠你分析的了,更何況多數分泌蛋白的量都是含量很少的。

求助,用酵母表達蛋白,目的蛋白怎麼純化去除培養基中

4樓:***

蛋白純化要根據你的具體情況選擇合適方案。

首先看你的蛋白是在胞外還是胞內。如果是胞外蛋白,發酵液離心後就取上清;胞內蛋白就要菌體,然後細胞破碎了。

之後的純化要看你的蛋白性質如何,純度要求高不高,還有加沒加tag等等。如果有tag,就可以通過親和層析快速純化出來。如果產生了包涵體,純化也比較容易,但復性就難說了。

在細胞培養液中加入血清的有哪些作用

5樓:匿名使用者

培養細胞用的培養基為人工合成,但動物細胞生活的內環境還有一些成分尚未研究清楚,加入動物血清是為了給體外培養的細胞提供一個類似生物體內的環境,此外動物血清中也包含了一些動物的激素和酶,可以促進細胞的發育。主要作用有:

1、提供基本營養物質或合成培養基所缺乏的營養物質:如氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等;

2、提供有利於細胞生長增殖所需的激素、生長因子;

3、提供貼壁細胞所需的貼壁因子和擴充套件因子;

4、對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用,使細胞免受蛋白酶的損傷;

5、血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用;

6、血清中的結合蛋白還可消除某些毒素和金屬對細胞的毒性作用。

6樓:像昨天

提供營養物質書上就是這麼寫的

培養細胞新增血清有什麼促進作用

7樓:匿名使用者

培養細胞用的培養基為人工合成,但動物細胞生活的內環境還有一些成分尚未研究清楚,加入動物血清是為了給體外培養的細胞提供一個類似生物體內的環境,此外動物血清中也包含了一些動物的激素和酶,可以促進細胞的發育。主要作用有:

1、提供基本營養物質或合成培養基所缺乏的營養物質:如氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等;

2、提供有利於細胞生長增殖所需的激素、生長因子;

3、提供貼壁細胞所需的貼壁因子和擴充套件因子;

4、對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用,使細胞免受蛋白酶的損傷;

5、血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用;

6、血清中的結合蛋白還可消除某些毒素和金屬對細胞的毒性作用。

8樓:匿名使用者

血清主要作用:

提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質.

提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(氫化可的鬆、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等.生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等.

提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵.結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用.

提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷.

對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用.這種作用是偶然發現的,現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用.

因為胰蛋白酶已經被廣泛用於貼壁細胞的消化傳代.血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用.血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用,如seo3,硒等.

血清應用於細胞培養中的優缺點各是什麼

9樓:匿名使用者

血清應用於細胞培養

中的優點:

血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,具有極為重要的功能。

1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。

2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。

3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。

4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子**。

5.起酸鹼度緩衝液作用。

6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩餘胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

成分不明確,血清儲存期短,至多一年。不能排除血清中含有易變物質,使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態。血清可能促進某些細胞的生長(成纖維細胞)同時抑制另一類細胞生長(表皮細胞)。

血清含一些對細胞產生毒性的物質,影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。 取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產生潛在影響可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。 血清製作過程複雜、批間差異大成分不能保持一致使用使得實驗和生產的標準化困難,其中的蛋白質使得某些轉基因蛋白生物藥品生產中分離純化工作很難完成。

質量不穩定,**昂貴,進出口管制影響盈利,使用不方便。

10樓:匿名使用者

個人觀點,僅供參考

血清成分複雜,更好的提供了動物細胞在體外可能需要的各種生長因子

缺點是成分複雜含有大量蛋白在提取培養基中的分泌蛋白時加大了難度,而且血清中可能會帶入寄生性生物汙染

11樓:匿名使用者

無血清細胞培養基

優 點更利於細胞生長;效能更加一致 ;容易進行純化和下游加工 ;細胞功能的精確評估 ;增強生長和/或產量 ;生理反應性的較好對照 ;增強細胞內中介物的檢測 ;可以消除來自血清的不均一性;可降低生產成本,簡化分離純化步驟,避免病毒汙染造成的危害;增加確定性;在培養基中新增抗生素時,降低至少在有血清培養基中所使用濃度的50%。提高了細胞培養的可重複性,避免了由於血清批次之間差異的影響;**充足、穩定。

侷限性配製無血清培養液必須使用高質量的水,在無血清培養基中通常要加入激素和生長因子;有化學限定性;**昂貴;細胞在無血清培養基中易受某些機械因素和化學因素的影響,培養基的儲存和應用不如傳統的合成培養基方便,針對性強,一種無血清培養基僅適合某一類細胞的培養。

天然培養基(含血清)

優點:血清含許多對細胞有利成分,能夠提供豐富的營養組分;有促生長效果;

侷限性:成分不明確;血清儲存期短(至多一年),不能排除血清中含有易變物質;使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態,血清可能促進某些細胞的生長(成纖維細胞)同時抑制另一類細胞生長(表皮細胞),血清含一些對細胞產生毒性的物質,影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。 取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產生潛在影響,可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。

血清製作過程複雜、批間差異大,成分不能保持一致,使用使得實驗和生產的標準化困難,其中的蛋白質使得某些轉基因蛋白生物藥品生產中分離純化工作很難完成。 質量不穩定,**昂貴,進出口管制影響盈利.,使用不方便

動物細胞培養的培養基為什麼要加入動物血清

12樓:哈靈培養基廠家

第一:血清的成份可能有幾百種之多,目前對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難。

第二:血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清儲存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制。

第三:不能排除血清中含有易變物質,這被認為是「瓶中惡化"的原因之一。3.血清主要作用

第四:對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。

這種作用是偶然發現的,現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用於貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用。

血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用

為什麼動物細胞的培養要加入血清

怎麼用培養上清液測細胞增殖,有用細胞培養液的上清做western的嗎

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