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培養基的選擇:
細胞培養是實驗室裡最常見和最基本的實驗了,但卻不是最簡單的。別小看細胞培養,這裡可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好,轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。
影響細胞培養的因素很多,讓我們先從培養基和血清說起。
◆ mem是由eagle』s基礎培養基(bme)發展而來的,其中增加了組分的範圍及濃度。
◆ 改良的bem(dmem)培養基是為小鼠成纖維細胞設計的,現在常用於貼壁細胞的培養。dmem的氨基酸濃度是mem的兩倍,維生素濃度是mem的4倍,採用雙倍的hco3-和co2濃度起到更好的緩衝作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/l,後來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/l,這就是大家常說的低糖和高糖了。
◆ amem含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應用於各種細胞型別,包括對營養成分要求苛刻的細胞。
◆ ham』s f12是為在低血清濃度下克隆cho細胞而設計的,現在也廣泛應用於克隆形成率的分析及原代培養。f12還可以與dmem等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物,這種培養基已應用於許多原代培養及更難養的細胞系的培養。
◆ rpmi 1640培養基是專為淋巴細胞培養而設計的,現在已廣泛應用於懸浮細胞的培養。
準備幾種培養基,然後花大約兩週的時間做一個簡單的細胞生長實驗,來選擇其中最適合的。
以前大部分實驗室都是用乾粉培養基,但配製過程就較為繁瑣,要溶解、調ph值,過濾,過程中可能會產生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質並不理想,所以培養的效果會有差異。
如何去除懸浮細胞中的死細胞,懸浮細胞培養如何去除死細胞
將培養bai瓶豎立放一段時間 50min左右du 然後用吸管輕zhi輕吸取dao 上面1ml的細胞懸專液,移入另一個新屬 的已加培基的培養瓶中。或者ficoll分離,就像分離pbmc一樣,先把細胞混勻,然後小心緩慢地把細胞加入到ficol中,1000g離心20分鐘,收集位於ficoll和培養基之間的...
植物組織培養和動物細胞培養的區別
動物細胞培養bai與植物du組織培養的區zhi別培養基不 同 植物dao細胞 固體培回養基 動物細答胞 液體培養基 培養基的成分不同 動物細胞培養必須利用動物血清,植物組織培養則不需要。產物不同 植物組織培養最後一般得到新的植物個體,而動物細胞培養因為動物體細胞一般不能表達其全能性,因此得到的是同一...
組織培養和動物細胞培養的區別,植物組織培養和動物細胞培養的區別
動物細胞培養與來植物組織培養源 的區別培養基不bai 同 植物細du胞 固體培養zhi 基 動物細胞 dao液體培養基 培養基的成分不同 動物細胞培養必須利用動物血清,植物組織培養則不需要。產物不同 植物組織培養最後一般得到新的植物個體,而動物細胞培養因為動物體細胞一般不能表達其全能性,因此得到的是...