高效液相色譜儀的發展歷史
1樓：漢匠文化
1960年代，由於氣相色譜對高沸點有機物分析的侷限性，為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質，氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。
1960年代末科克蘭（kirkland）、哈伯、荷瓦斯（horvath)、莆黑斯、裡普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀，開啟了高效液相色譜的時代。
高效液相色譜含坦衫使用信運粒徑更細的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數，以高壓驅動流動相，使得經典液相色譜需要數日乃至數月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內完成。
1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現代實踐》一書，標誌著高效液相色譜法 (hplc）正式建立。
在此後的時間裡，高效液相色譜成為最為常用的分離和檢測手段，談腔在有機化學、生物化學、醫學、藥物開發與檢測、化工、食品科學、環境監測、商檢和法檢等方面都有廣泛的應用。
高效液相色譜同時還極大的 **了固定相材料、檢測技術、資料處理技術以及色譜理論的發展。
1960年代前，使用的填充粒大於100μm，提高柱效面臨著困境，後來的研究人員便採用微粒固定相來突破著一瓶頸。
簡述高效液相色譜的應用
2樓：網友
關於高效液相色譜的應用如下：
一、分離混合物
高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的範圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定鉛核和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。
通過與試樣預處理技術相配合，高效液相色譜法所達到的高解像度和高靈敏度，可分離並同時測定性質上十分相近的物質，能夠分離複雜混合物中的微量成分。並且隨著固定相的發展，還可在充分保持生化物質活性的條件下完成對其的分離。
二、儀器聯用
高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是乙個重要的發展方向。高效液相色譜一質譜聯用技術譁旅受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等：高效液相色譜一紅外光譜聯用也發展很快，如在環境汙染分析測定水中的烴類等．使環境汙槐蘆掘染分析得到新的發展。
三、生化分析
由於高效液相色譜法具有高解像度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域，並已成為解決生化分析問題有前途的方法。
高效液相色譜法在藥物分析中的應用
3樓：生活達人若兮老師
高效液相色譜法在藥物分析中的應用如下：
1、在藥物鑑別中的應用
在hplc法中，保留時間與組分的結構和性質有關，是定性的引數，可用於藥物的鑑別，在中國藥典中就有大量的藥物採用此法進行鑑別。隨著高效液相色譜技術的發展和在藥典中的重要性不斷提高，出現了一些採用高效液相色譜法鑑別藥物的新方法。
例如，克拉黴素、利福平滴眼液、崗梅等7種冬青屬中草藥、南北五味子的鑑別。這無疑為進一步完善、開發藥物鑑別的方法提供了一種新的思路。
2、在雜質檢查中的應用
歷年來各國藥典中收載了多種藥物採用hplc法進行雜質檢查的方法，並且可採用hplc法進行雜質檢查的藥物種類在逐年頒佈的藥典中有所增加。隨著hplc技術的不斷發展，有不少國內配核鎮外藥物分析工作者研究和**了hplc法在藥物的有關物質檢查方面的應用，並建立了一些新方法。
例如，鹽酸噻吩諾啡、奧沙西泮原料藥及其片氏塵劑、鹽酸喹那普利原藥、氟他胺中有關物質的檢查。這些方法簡便、可行且專屬性較強。
3、在含量測定中的應用
用高效液相色譜法測定合成藥及其製劑的含量，可以消除藥物中的雜質，製劑中的附加劑及共存藥物的干擾。此外，國內還對醋酸可的松滴眼液、喹諾酮類抗菌藥、芩連口服液中黃芩苷、氫溴酸右美沙芬片、注射用硫酸奈替公尺星等藥物的hplc測定方法進行研究。
天然藥物的化學成分複雜，其有效成分可能有乙個，也可以有多個，這對於控制藥品質量，建立質量標準來說比較困難。
例如，羅漢果種類較多，結構相似，其定量分析方法現普遍應用的仍主要為比色法，但誤差較大、結果不準確。陳維軍等建立了羅漢果皂苷的hplc分析方法，可用於羅漢果皂苷提取物中皂苷成分的分析。
丹七片由丹參、三七兩味藥材加工而成，收藏於衛生部部頒標準，其主要成分為丹參酮，但無含量測定方法。譚生建立了用hplc法測定丹七片中丹參酮含量的方法。複方製劑各組分之間具有協同作用，其質量控制較難，故藥典上很少收載。
近年來高效液相色譜在這方面的工作報道較多。例如，複方魚腥草片中的黃芩苷含量的測定，牙周康膠囊中的甲硝哇和芬布芬的同時測定，燒燙靈軟膏中磺胺醋酞鈉和磺培粗胺的含量的快速測定，複方感冒片中那可汀的含量測定，均取得了理想的效果。
高效液相色譜原理
4樓：知識之窗
高效液相色譜（hplc）的原理：以高壓下的液體為流動相，並採用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。高效液相色譜對樣品的適用性廣，不受分析物件揮發性和熱穩定性的限制，因而彌補了氣相色譜法的不足。
在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約佔20%，而80%則需用高效液相色譜來分析。高效液相色譜和氣相色譜在基本理論方面沒有顯著不同，它們之間的重大差別在於作為流動相的液體與氣體之間的性質的差別。
高效液相色譜法的構造。
可分為「高壓輸液幫浦」、「色譜柱」、「進樣器」、「檢測器」、「餾分收集器」以及「資料獲取與處理系統」等部分。
高效液相色譜法有「四高一廣」的特點
高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。
高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析乙個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小於1小時。
高效：分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果，比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
高靈敏度：紫外檢測器可達，進樣量在μl數量級。
應用範圍廣：百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析，顯示出優勢。
正向高效液相色譜原理？反相高效液相色譜，正相分配色譜，反相分配色譜之間的關係，區別
這問題問的，太不具體了！原理一句兩句說不清，簡單的說 正相 固定相極版性大於流權動相的極性，比如固定相是矽膠柱，流動相是正己烷 反相正好相反，固定相極性小於流動相的極性，比如固定相是c18柱，流動相是甲醇 原理就是不同物質在流動相和固定相的化學作用力不同保留情況不同，因此把不同物質分開 反相高效液相...
高效液相色譜儀保留時間的長短，高效液相色譜中的持留時間是什麼意思？
保留時間 是樣品從進入色譜柱到流出色譜柱所需要的時間，不同的物質在不同的色譜柱上以不同的流動相洗脫會有不同的保留時間，因此保留時間是色譜分析法比較重要的引數之一。保留時間由物質在色譜中的分配係數決定 rt t0 1 kvs vm 式中rt表示某物質的保留時間，t0是色譜系統的死時間，即流動相進入色譜...
高效液相色譜柱一般在室溫進行分離，氣相色譜柱則必須恆溫，為什
氣相色譜不必須要恆溫，也可以程式升溫 液相一般選擇一個近室溫溫度進行測定，它分離樣品主要是依據流動相 液相色譜抄的色譜柱在 襲分析時其實是恆溫的 有時是因為室溫相差不大，不強制要求不配柱箱而已，建議配柱箱。氣相色譜柱 首先氣相色譜的原理就是利用 物質的沸點高低或是極性的強弱 在不同柱子的保留時間不同...