1樓:匿名使用者
二者bai應該都是可以的,具
du體要看自身的實驗條zhi件哪個操作dao更方便以及抗體版的性質。
看你的實驗要權求,冰凍片要求較高(低溫環境,液氮,冰凍切片機,oct包埋劑等等),石蠟片的製作就比較簡單,試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用於哪種**
免疫組化的話,一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話,都可以的,冰凍切片比較容易操作,不需要修復;石蠟切片的話操作起來步驟比較多,相對來說比較複雜一點,而且還需要抗原的修復過程,再者就是你購買的抗體適合哪種切片,應該說明書上面會寫清楚的,祝你好運!
石蠟切片能不能做免疫熒光
2樓:南京金益柏生物科技****
免疫熒光當然冰bai凍切片較好,du但石蠟切片同樣zhi可以做出來dao的。冰凍切片不需要固定,從版
而有效保護了抗原權的活性,如果是石蠟切片,可能損失了許多抗原,儘管有抗原修復,抗原修復主要機制是將因甲醛作用而導致的抗原活性封閉重新啟用,所以還是有影響,但一般來說應該可以通過這一步有效恢復,標本固定時間比較重要,時間越長,抗原修復時間和溫度都要增加。
其次是抗體的問題,可能要摸索一下濃度。
冰凍切片的缺點就是結構破壞厲害。而石蠟切片形態結構保持較好,因為有效的固定很重要。
如果有冰凍切片機,可以試一下冰凍切片,可能效果會理想一些的。
略知一些而已。
關於細胞免疫熒光染色的問題
3樓:匿名使用者
(1)你的二抗是用fitc標記的,為避免熒光分解,分裝及熒光顯微鏡觀察時均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/l ph9.0-9.5的碳酸氫鹽緩衝液,後者能使玻片透明;
(3)關於免疫酶染色,如果是用過氧化物酶做標記,就必須用3%h2o2以去除內源性過氧化物酶;2n鹽酸需要使用,目的是使dna變性,讓brdu抗體能夠充分地與已經摻入的brdu結合。
做間接法免疫熒光染色,如何設定對照?
參考見解:最好是同一視野在未用熒光激發下進行對照,看是否非特異性染色。
(1)空白對照:如果你做的是石蠟切片免疫組化,這個對照必須有,目的是看自發熒光,脫蠟後直接在熒光顯微鏡下觀察。
(2)陰性對照:標本直接滴加二抗,呈陰性反應。
(3)抗原對照:標本加同種動物的未免疫血清,以pbs沖洗後,在加抗免疫球蛋白熒光抗體。因未免疫動物的血清中無特異性抗體,應呈陰性反應。
石蠟切片有什麼優缺點
4樓:稀飯小鹹菜粥
教學中,光鏡下
觀察切片標本多數是石蠟切片法制備的。組織離開回機體後很快就會死亡答和產生組織腐敗,失去原有正常結構,因此,組織要經固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能清晰辨認其形態結構。
優點:1、組織細胞形態清晰
2、切片可長期儲存,供教學、科研及病理診斷及復察,並可利用蠟塊作其他專案的回顧性研究。
3、可以切(2~3微米)的薄片,**薄而均勻,無皺褶。
缺點:1、石蠟製片程式及環節繁多,需數日才能完成1個週期。
2、製片過程中很易造成組織內抗原性的喪失,在用於免疫組化染色時影響結果的敏感性。
5樓:匿名使用者
石蠟切片(
baiparaffin section)組織學常規du製片技術中最為廣泛zhi應用dao的方法。石蠟切片不僅用於回觀察正答常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用於其他許多學科領域的研究中。
石蠟切片法包括取材、固定、洗滌和脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與粘片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片等步驟。一般的組織從取材固定到封片製成玻片標本需要數日,但標本可以長期儲存使用,為永久性顯微玻片標本。
組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片
6樓:南京金益柏生物科技****
二者應該都是可以的,具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。
看你的實驗要求,冰凍片要求較高(低溫環境,液氮,冰凍切片機,oct包埋劑等等),石蠟片的製作就比較簡單,試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用於哪種**
免疫組化的話,一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話,都可以的,冰凍切片比較容易操作,不需要修復;石蠟切片的話操作起來步驟比較多,相對來說比較複雜一點,而且還需要抗原的修復過程,再者就是你購買的抗體適合哪種切片,應該說明書上面會寫清楚的,祝你好運!
石蠟切片的免疫熒光可以對蛋白進行定量嗎
7樓:南京金益柏生物科技****
包埋好的復標本用切片
制機切石蠟切片(5微米),並將蠟片貼附於多聚賴氨酸處理過的載玻片上。
經60°C烘片2-8小時(都試過,沒啥差別,但非實質性器官應適當延長時間)。
二甲苯i脫蠟30分鐘(若要保證脫蠟完全可將其加熱至40-60°C),二甲苯ii脫蠟10分鐘。
8樓:愛派尚飾品旗
勸集會遊行桌諦香菇忻
石蠟切片做免疫熒光實驗,有嚴重的自發熒光,請問有什麼好的方法可以消除自發熒光呢? 5
9樓:濛濛濛濛
以不同波長的激發光,在不激發熒光報告基團時激發組織的自發熒光,從而將靶訊號與背景光區分開,消除自發熒光
或者使用濾光片,將自發熒光濾去,但是這樣做會影響強度值。
關於石蠟切片免疫熒光如何消除自發熒光
10樓:南京金益柏生物科技****
可以用遠紅外波長的熒光範圍內的二抗,在此範圍內基本看不到自發熒光的訊號;也可以用丙酮固定不用醛類物質。都可以減少自發熒光的產生
玉石上蠟用 什麼蠟 保養玉用石蠟可以嗎
用液體石蠟比較好。液體石蠟，是礦物油，不易變質，沁透力也好於植物油。玉器上蠟的方法有 1 浸蠟法。方法是 把幹蠟或水蠟放在容器裡面慢慢加熱直到蠟融化後把玉器放到裡面並翻動使其均勻受蠟，約3分鐘後將玉器撈出放涼後，用乾布抹去表面多餘的蠟。2 幹蠟上蠟法。方法是 把幹蠟研碎均勻放在玉器的表面，然後用電吹...
可以用Pinky作英文名麼，Muse可以用作英文名麼？
可以，英文名字的話可以隨意取，而且可以自己造。有一位泰國女藝人就叫pinky muse可以用作英文名麼？可以muse是可以做英文名的，翻譯為繆斯，繆斯是希臘神話中主司藝術與科學的九位古老文藝女神的總稱。她們代表了通過傳統的 和舞蹈 即時代流傳下來的詩歌所表達出來的神話傳說，所以給孩子取名叫繆斯，代表...
金馬傑作可以用住房公積金么，金馬傑作可以用住房公積金麼
住房公積金的用途 住房公積金應當用於職工購買 建造 翻建 大修自住住房，任何單位和個人不得挪作它用。職工有下列情形之一的，可以提取職工住房公積金賬戶內的儲存餘額 一 購買 建造 翻建 大修自住住房的 二 離休 退休的 三 完全喪失勞動能力，並與單位終止勞動關係的 四 出境定居的 五 償還購房貸款本息...