1樓:千葉雅之
你的問bai題沒辦法回答。du
你的有機相比例是多zhi少?到底是甲醇
dao還是乙腈?樣品是什麼?極性回怎麼樣?
答還有你配置了多少毫升的流動相?要知道1000ml里加1ml和100ml里加1ml是不同的概念!一般都不會說變化1ml,會計算一下變化了多少,比如1%
打個比方,你的有機相比例是50%,你變化1%,那可能也就變動不到1min,如果你的有機相比例是5%,那變化了1%可能就得前後變動3-5min。
你的樣品也是。比如出峰時間靠前,那麼變化幅度可能就比較小。如果出峰時間靠後,那麼幅度就會很大。
不過一般來說,流動相是靠量筒量取的。1ml應該屬於誤差範圍內。
液相 保留時間一致 如何解讀
2樓:千葉雅之
液相色譜圖其實就是一個橫軸是保留時間,縱軸是電訊號的圖譜。
在同一條件下,保留時間是特徵標識,所以保留時間一致的就是同一種物質。
比如在這張色譜圖中,保留時間是4.0133min的是土黴素,9.7347min的是金黴素。
那麼我再次進樣,保留時間4.01min左右保留時間的物質都可以看做是土黴素;9.73min左右保留時間的就是金黴素。
而電訊號強弱相當於峰高。它可以讀取出一個引數叫做峰面積。同一個物質,峰面積大小和濃度成正比。
比如這張圖,已知土黴素保留時間為4.0133min,峰面積是1000,濃度是1.0mg/ml。
那麼我測定一個未知濃度的樣品,出峰時間為4.0102min(這就算是一致了),峰面積為500
這個物質就是土黴素,根據峰面積和濃度成正比的規律計算,樣品濃度就應該是0.5mg/ml
高效液相色譜法如果將流動相中甲醇的比例提高,對測樣品的保留時間有何影響
3樓:千葉雅之
一般來說反相色譜中提高甲醇或者乙腈等有機相比例之後,樣品的保留時間會縮短,出峰會提前。
操做液相色譜時影響保留時間的變化的因素有哪些?
4樓:匿名使用者
影響液相色譜保留bai時間的因素:du
1、流動相的比例與zhi
極性。對於不同的dao柱子,分離
版度和保留時間往往都會有權點差別,所以在操作的時候:a、可以適當調整流動相的比列,如甲醇—水(90:10),如分離效果與保留時間延長,可以調整88:
12或者92:8或者95:5等。
b、有時候還需要更換流動相的組成,甲醇就可以換成乙腈,看具體的實際操作而定。
2、柱子與柱溫。不同的柱子保留時間會有所差別,主要是載體的吸附性和固定液的純度不同,但保留時間一般不會相差太大,可以根據對照品或者標準品的保留時間指定。柱溫在hplc操作時,一般就調整到室溫或者30度。
3、流速。流速的大小,液相色譜一般調整在0.8ml/min或者1.0ml/min。
4、進樣量。進樣量大,保留時間往往會延長。
5、輸液系統的壓力,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,保留時間將會縮短。
具體的影響因素還要在實際操作中慢慢考察,經過調整後才可以的到較好的色譜條件。
5樓:匿名使用者
你說的時間變化的問題,可能是柱溫影響的吧,夏天溫度比較高,柱溫箱有時溫度不夠恆定,我最近也是這樣,出峰時間變化有點大
6樓:匿名使用者
柱子本身的性質引數、流動相的比例組成、柱子穩度、流速、進樣量還有一個是系統壓力。
液相保留時間誤差在什麼範圍?謝謝!!!
7樓:寧寧不哭
1.保留時間一樣不一定是同一種物質
一般用dad檢測器,保留時間一樣+紫外吸收一樣基本可以確定為同一物質2. 發文章的時候的圖是機器給出來的,當然可以在此基礎上進行修飾,但是保留時間不可以改,比如進行色譜圖的組合等是可以的
正向高效液相色譜原理？反相高效液相色譜，正相分配色譜，反相分配色譜之間的關係，區別
這問題問的，太不具體了！原理一句兩句說不清，簡單的說 正相 固定相極版性大於流權動相的極性，比如固定相是矽膠柱，流動相是正己烷 反相正好相反，固定相極性小於流動相的極性，比如固定相是c18柱，流動相是甲醇 原理就是不同物質在流動相和固定相的化學作用力不同保留情況不同，因此把不同物質分開 反相高效液相...
液相色譜能測甲酸嗎,液相色譜能測甲酸嗎
酸性的hplc不能測 出峰時間太早了 鹼性的也不能用,建議用酸性hplc加正庚烷試試 今天專特意找高屬手討論了這個問題,甲酸是不能測出來的,原因是吸收太弱,即使你用254的波長也不能有理想的效果,所以測不出來 可以換其他的方法測 液相色譜的流動相中加的甲酸一定要是色譜級別的嗎 如果要求不是特別高的話...
液相色譜兩個峰分不開可以積分麼,液相色譜有兩個部分重疊峰怎麼分割積分
要看情況。要是同一種物質的代謝物或者異構體,計算的時候可以同時積分。如果不是同一種物質,肯定不行。液相色譜有兩個部分重疊峰怎麼分割積分 一般直接從兩個峰連線處的峰谷處中間切開連線底部的積分線就可以了,如果峰分不開,建議使用峰高當作響應值來測定,如果使用峰面積定量,由於一部分的峰被切掉,會導致響應值偏...