1樓:乘龍
「是的 只有編碼區的基因才可以控制合成蛋白質 」
「當然,沒有的話擴增不了的」。
這兩個全部是胡說。
只要有一定長度的dna模板,引物正確特異性好,pcr條件合適,就可以擴增模板,而模板是編碼還是非編碼沒有區別。跟合成不合成蛋白質更是無關,你擴增的是核酸不是氨基酸;而能不能擴增主要看你的模板和引物的選擇。
目前發現,基因的5'及3'非翻譯區(utr,就是非編碼區)對基因表達有著多種重要的調節功能,所以當今針對這些序列做的研究非常多。難道研究這些幾千幾萬bp的片段都是合成的?顯然大部分是pcr出來的。
比如,大部分研究mirna的文獻,都在做3'utr的克隆,都要用到pcr技術。
如果lz還不信,我可以告訴你,本人親自做過的兩個實驗:
1、以細胞系cdna為模板,擴增某基因的3'utr片段,約1000bp,測序正確。
2、以細胞系全dna為模板,擴增某基因的5'utr片段,約4300bp(已經大於其5'utr長度,含有一部分染色體上非該基因的dn**段),測序正確。
歡迎交流,祝lz實驗順利。
2樓:匿名使用者
擴增的目的片段完全是由你所要做的研究決定的,片段只是手段,不是目的,你的研究專案要求你擴增什麼你就得擴增什麼咯
3樓:燒賣公主
是的 只有編碼區的基因才可以控制合成蛋白質
4樓:yls葉綠素
當然,沒有的話擴增不了的
為什麼用pcr擴增目的基因不需要知道目的基因的全部序列?
5樓:八荒怪人
需要,因為pcr技術就是細胞內dna複製過程在體外的體現,過程中有很多酶參與,在細胞內需要atp,在體外更需要提供能量,在pcr所加的緩衝液中已經加入了atp,所以在加了緩衝液後不用再單獨加入atp
6樓:匿名使用者
只需設計出引物,taq酶與引物結合後,根據鹼基互補配對原則,會自動延伸合成子鏈
pcr技術擴增目的基因時,所選取的模板是什麼?pcr技術擴增基因的模板是什麼?它們之間有何區別?
7樓:匿名使用者
你好,你要擴增**,那裡就是你的說的目的片段。和基因本身沒有什麼具體關係。可以擴增基因內的一部分序列(內含子也好、外顯子也好、內含子+外顯子也好),可以擴增基因外的間隔序列,完全是根據實驗需要來定的。
利用pcr技術擴增目的基因,為什麼是三次
8樓:匿名使用者
pcr擴增就是迴圈步驟,一般進行20-40個迴圈。每次迴圈*2(不考慮擴增效率)。
你說的三次是什麼意思?
最多這樣(自己看圖理解):
至此,就是三個迴圈,卡住了一個大小區間(比如100bp),接下來 以此不斷重複。
網上有很多人爭議,認為pcr技術只能擴增目的基因而不能獲取目的基因,你如何認為?
9樓:小蠻
個人認為你提取的必然是基因組dna,那麼對總dna而言,確實包含你的目的基因,但是這版樣整合在基因組裡的權目的基因對你來說根本沒用,所以你必須用pcr擴增,本來沒有你單獨的目的基因,通過你的引物設計和pcr擴增,你可以獲得大量單一的你的目的基因片段。
所以pcr擴增是技術,是手段,但目的是獲得你的目的基因~~~
10樓:匿名使用者
我認復為這個話也沒有錯。
制pcr技術只能擴增目的基
因bai。
但是du要獲取目的基因,首zhi先需要大量dao的目的基因,因此也不能夠說它完全錯。看你如何理解獲取目的基因這個實驗的過程,如果你理解為過程中首先要獲得大量材料,那麼它就沒有錯。
11樓:山兔子王
能夠擴增,就能夠獲取。
請回答基因工程方面的有關問題: (1)利用pcr技術擴增目的基因,其原理與細胞內dna複製類似(如下圖所示)。
12樓:吾乃蘿莉控
(1)①15/16;②三
(2)①引物i和引物ⅱ區域性發生鹼基互補配對而失效;②引物i』自身摺疊後會出現區域性鹼基互補配對而失效
(3) dna聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續結合到雙鏈dn**段的引物鏈上
(4)見下圖
pcr技術擴增目的基因中的引物有什麼作用?
13樓:曜血
引物的功能是作為核苷酸聚合的起始點,引導dna的合成。
能設定迴圈次數,及控制複製次數。pcr迴圈次數主要取決於模板dna的濃度。一般的迴圈次數選在30~40次之間,迴圈次數越多,非特異性產物的量亦隨之增多。
14樓:匿名使用者
1.與dna複製中的作用類似,但是在細胞內有其他的酶進行這項工作。在pcr技術中,只加入了四種底物和taq酶,模板。dna聚合酶只能在有3『端時才能複製下去。
2.決定擴增片段。擴增目的基因,就要根據目的基因兩側序列設計引物,這樣只有目的基因擴增了,得到大量目的基因。這是pcr技術的一項重要應用。
15樓:霍文宣
沒有引物,dna複製的起點就不確定了,用於dna複製的dna單鏈是很長的,不光是目的基因(和其他你所需要的),而在基因工程中我們需要的dn**段比較起來是很短的,也就是說只要一對引物(這個寡聚核苷酸片段)之間所夾的這一部分的dn**段,為了準確地合成這段所需基因,我們需要一對引物的參與。
16樓:匿名使用者
引物可以做為dna複製開始時dna聚合酶的結合位點,在細胞外的條件下,只有通過引物,dna才可以開始進行復制。引物是已知序列的dna小片段。
PCR技術獲取目的基因時為什麼要至少經過3次迴圈才能從DNA
一般需要獲bai得的基因是有一du定長度的,zhi而模板長度很長。設計的引物dao決回定了擴增產物的長度。第一答個迴圈,引物與模板互補,此時變成兩個模板,但因為模板很長,沒有什麼終止擴增,所以第一個迴圈擴增出來的新片段很長很長。第二個迴圈以新的長片段為模板進行,但新片段的一端是引物開頭的,所以第二個...
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