PCR技術擴增目的基因是否一定要編碼區的基因

2021-03-07 02:03:07 字數 2852 閱讀 2087

1樓:乘龍

「是的 只有編碼區的基因才可以控制合成蛋白質 」

「當然,沒有的話擴增不了的」。

這兩個全部是胡說。

只要有一定長度的dna模板,引物正確特異性好,pcr條件合適,就可以擴增模板,而模板是編碼還是非編碼沒有區別。跟合成不合成蛋白質更是無關,你擴增的是核酸不是氨基酸;而能不能擴增主要看你的模板和引物的選擇。

目前發現,基因的5'及3'非翻譯區(utr,就是非編碼區)對基因表達有著多種重要的調節功能,所以當今針對這些序列做的研究非常多。難道研究這些幾千幾萬bp的片段都是合成的?顯然大部分是pcr出來的。

比如,大部分研究mirna的文獻,都在做3'utr的克隆,都要用到pcr技術。

如果lz還不信,我可以告訴你,本人親自做過的兩個實驗:

1、以細胞系cdna為模板,擴增某基因的3'utr片段,約1000bp,測序正確。

2、以細胞系全dna為模板,擴增某基因的5'utr片段,約4300bp(已經大於其5'utr長度,含有一部分染色體上非該基因的dn**段),測序正確。

歡迎交流,祝lz實驗順利。

2樓:匿名使用者

擴增的目的片段完全是由你所要做的研究決定的,片段只是手段,不是目的,你的研究專案要求你擴增什麼你就得擴增什麼咯

3樓:燒賣公主

是的 只有編碼區的基因才可以控制合成蛋白質

4樓:yls葉綠素

當然,沒有的話擴增不了的

為什麼用pcr擴增目的基因不需要知道目的基因的全部序列?

5樓:八荒怪人

需要,因為pcr技術就是細胞內dna複製過程在體外的體現,過程中有很多酶參與,在細胞內需要atp,在體外更需要提供能量,在pcr所加的緩衝液中已經加入了atp,所以在加了緩衝液後不用再單獨加入atp

6樓:匿名使用者

只需設計出引物,taq酶與引物結合後,根據鹼基互補配對原則,會自動延伸合成子鏈

pcr技術擴增目的基因時,所選取的模板是什麼?pcr技術擴增基因的模板是什麼?它們之間有何區別?

7樓:匿名使用者

你好,你要擴增**,那裡就是你的說的目的片段。和基因本身沒有什麼具體關係。可以擴增基因內的一部分序列(內含子也好、外顯子也好、內含子+外顯子也好),可以擴增基因外的間隔序列,完全是根據實驗需要來定的。

利用pcr技術擴增目的基因,為什麼是三次

8樓:匿名使用者

pcr擴增就是迴圈步驟,一般進行20-40個迴圈。每次迴圈*2(不考慮擴增效率)。

你說的三次是什麼意思?

最多這樣(自己看圖理解):

至此,就是三個迴圈,卡住了一個大小區間(比如100bp),接下來 以此不斷重複。

網上有很多人爭議,認為pcr技術只能擴增目的基因而不能獲取目的基因,你如何認為?

9樓:小蠻

個人認為你提取的必然是基因組dna,那麼對總dna而言,確實包含你的目的基因,但是這版樣整合在基因組裡的權目的基因對你來說根本沒用,所以你必須用pcr擴增,本來沒有你單獨的目的基因,通過你的引物設計和pcr擴增,你可以獲得大量單一的你的目的基因片段。

所以pcr擴增是技術,是手段,但目的是獲得你的目的基因~~~

10樓:匿名使用者

我認復為這個話也沒有錯。

制pcr技術只能擴增目的基

因bai。

但是du要獲取目的基因,首zhi先需要大量dao的目的基因,因此也不能夠說它完全錯。看你如何理解獲取目的基因這個實驗的過程,如果你理解為過程中首先要獲得大量材料,那麼它就沒有錯。

11樓:山兔子王

能夠擴增,就能夠獲取。

請回答基因工程方面的有關問題: (1)利用pcr技術擴增目的基因,其原理與細胞內dna複製類似(如下圖所示)。

12樓:吾乃蘿莉控

(1)①15/16;②三

(2)①引物i和引物ⅱ區域性發生鹼基互補配對而失效;②引物i』自身摺疊後會出現區域性鹼基互補配對而失效

(3) dna聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續結合到雙鏈dn**段的引物鏈上

(4)見下圖

pcr技術擴增目的基因中的引物有什麼作用?

13樓:曜血

引物的功能是作為核苷酸聚合的起始點,引導dna的合成。

能設定迴圈次數,及控制複製次數。pcr迴圈次數主要取決於模板dna的濃度。一般的迴圈次數選在30~40次之間,迴圈次數越多,非特異性產物的量亦隨之增多。

14樓:匿名使用者

1.與dna複製中的作用類似,但是在細胞內有其他的酶進行這項工作。在pcr技術中,只加入了四種底物和taq酶,模板。dna聚合酶只能在有3『端時才能複製下去。

2.決定擴增片段。擴增目的基因,就要根據目的基因兩側序列設計引物,這樣只有目的基因擴增了,得到大量目的基因。這是pcr技術的一項重要應用。

15樓:霍文宣

沒有引物,dna複製的起點就不確定了,用於dna複製的dna單鏈是很長的,不光是目的基因(和其他你所需要的),而在基因工程中我們需要的dn**段比較起來是很短的,也就是說只要一對引物(這個寡聚核苷酸片段)之間所夾的這一部分的dn**段,為了準確地合成這段所需基因,我們需要一對引物的參與。

16樓:匿名使用者

引物可以做為dna複製開始時dna聚合酶的結合位點,在細胞外的條件下,只有通過引物,dna才可以開始進行復制。引物是已知序列的dna小片段。

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