PCR技術獲取目的基因時為什麼要至少經過3次迴圈才能從DNA

2021-04-18 17:14:04 字數 3124 閱讀 5635

1樓:

一般需要獲bai得的基因是有一du定長度的,zhi而模板長度很長。設計的引物dao決回定了擴增產物的長度。第一答個迴圈,引物與模板互補,此時變成兩個模板,但因為模板很長,沒有什麼終止擴增,所以第一個迴圈擴增出來的新片段很長很長。

第二個迴圈以新的長片段為模板進行,但新片段的一端是引物開頭的,所以第二個迴圈得到的片段就是我們需要的長度,但只是一條鏈,所以還不能分離出目的基因。第三個迴圈,當以第二個迴圈得到的新片段為模板時,因為這個片段的長度就是需要擴增的長度,所以當第三個迴圈完成時,這個片段是需要的長度,且是雙鏈dna,這就得到了需要的目的基因了。所以至少要3個迴圈才能分離出目的基因。

pcr為什麼是第三輪才獲得目的基因 20

2樓:南瓜蘋果

原因如下:

一般需要獲得的基因是有一定長度的,而模板長度很長。設計的引物決定了擴增產物的長度。第一個迴圈,引物與模板互補,此時變成兩個模板,但因為模板很長,沒有什麼終止擴增,所以第一個迴圈擴增出來的新片段很長很長。

第二個迴圈以新的長片段為模板進行,但新片段的一端是引物開頭的,所以第二個迴圈得到的片段就是我們需要的長度,但只是一條鏈,所以還不能分離出目的基因。

第三個迴圈:當以第二個迴圈得到的新片段為模板時,因為這個片段的長度就是需要擴增的長度,所以當第三個迴圈完成時,這個片段是需要的長度,且是雙鏈dna,這就得到了需要的目的基因了。所以至少要3個迴圈才能分離出目的基因。

擴充套件資料

pcr的每個迴圈過程包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三個不同的事件:

①變性:加熱使模板dna在高溫下(94℃左右)雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈;

②退火;使溶液溫度降至50~60℃,模板dna與引物按鹼基配對原則互補結合;

③延伸:溶液反應溫度升至72℃,耐熱dna聚合酶以單鏈dna為模板,在引物的引導下,利用反應混合物中的4種脫氧核苷三磷酸(dntp),按5'一3』方向複製出互補dna。

3樓:匿名使用者

因為前兩輪迴圈擴增產物上目的基因上都帶有模板dna其他片段,即擴增產物比目的基因的dn**段長,第三輪就有了純目的基因片段了。附件是pcr過程的flash動畫,看看就明白了。

4樓:天涯戎馬

第一輪起始變性,模板dna完全解鏈

第二輪,上游引物與模板dna結合位點結合開始複製,直至模板鏈末端,注意,這次的產物包含了目的dna以及下游的一部分

第三輪,下游引物與第二輪的產物結合,向與第二輪複製相反的方向複製,得到了目的dna。

在以後的複製中,若以前面的目的基因產物為模板的話,一輪就得到新的目的dna了,並不是所有的都需經過三輪

5樓:貓哭耗子

不明白第三輪是什麼意思 一般25-35個迴圈才獲得目的基因啊,高溫變性、低溫退火和適溫延伸,為一個迴圈!

利用pcr技術擴增目的基因,為什麼是三次

6樓:匿名使用者

pcr擴增就是迴圈步驟,一般進行20-40個迴圈。每次迴圈*2(不考慮擴增效率)。

你說的三次是什麼意思?

最多這樣(自己看圖理解):

至此,就是三個迴圈,卡住了一個大小區間(比如100bp),接下來 以此不斷重複。

pcr技術中為什麼3次迴圈才能得到目的基因

7樓:匿名使用者

原因如下:

1、第一個迴圈擴增出來的新片段很長很長。

2、第二個迴圈以新的長片段為模板進行,但新片段的一端是引物開頭的,所以第二個迴圈得到的片段就是我們需要的長度,但只是一條鏈,所以還不能分離出目的基因。

3、第三個迴圈,當以第二個迴圈得到的新片段為模板時,因為這個片段的長度就是需要擴增的長度,當第三個迴圈完成時,這個片段是需要的長度,且是雙鏈dna,這就得到了需要的目的基因了。

8樓:蕭峰虛竹與段譽

因為在前兩個迴圈內產生的dna鏈中都會有除目的基因外的多餘部分,只有到了第三次迴圈才會得到只有目的基因的dna鏈。

生物疑問 利用pcr技術擴增含目的基因的dna分子來形成目的基因,需要3步.為什麼?過程是什麼?

9樓:德基廣場

pcr技術copy過程簡介

1.將目的基因與引物,以及耐高溫的dna聚合酶加入pcr擴增儀中。加熱到90~95℃。讓目的基因解旋。

2.降溫至55~60℃,讓引物與①中的dna單鏈結合。

3.加熱至70~75℃,讓耐高溫的dna聚合酶工作,大量擴增目的基因。

pcr擴增技術獲取目的基因的原理是?

10樓:匿名使用者

pcr技術的基本原理 類似於dna的天然複製過程,其特異性依賴於與靶序列兩端版互補的寡核苷酸引物。pcr由變性權--退火--延伸三個基本反應步驟構成:①模板dna的變性:

模板dna經加熱至93℃左右一定時間後,使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;②模板dna與引物的退火(復性):模板dna經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:dna模板--引物結合物在taqdna聚合酶的作用下,以dntp為反應原料,靶序列為模板,按鹼基配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板dna 鏈互補的半保留複製鏈重複迴圈變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的「半保留複製鏈」,而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。

每完成一個迴圈需2~4分鐘, 2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍

11樓:匿名使用者

①模板dna的變性:抄模板dna經加熱至93℃左

襲右一定時間後,使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;②復性:模板dna經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:dna模板--引物結合物在72℃、dna聚合酶的作用下,以靶序列為模板,按鹼基互補配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板dna鏈互補的半保留dna。

簡而言之的話就是鹼基互補配對

12樓:秒懂**

pcr擴增:是體外酶促合成特異dn**段的一種方法

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是的 只有編碼區的基因才可以控制合成蛋白質 當然,沒有的話擴增不了的 這兩個全部是胡說。只要有一定長度的dna模板,引物正確特異性好,pcr條件合適,就可以擴增模板,而模板是編碼還是非編碼沒有區別。跟合成不合成蛋白質更是無關,你擴增的是核酸不是氨基酸 而能不能擴增主要看你的模板和引物的選擇。目前發現...

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