1樓：華達呢密麻麻
影響轉化效率的因素很多，主要有：感受態細胞製備的質量、受體菌生長期（大腸桿菌在對數生長期易產生感受態）、質粒的大小和構型、所用試劑的純度、接種前菌種的保藏方式、冰浴時間（延長冰浴時間可略微提高轉化率）、器皿的清潔度、化合物及無機離子（rb+、mn+、二甲基亞碸能適當提高轉化率）、質粒與細胞個數的比例（質粒與細胞個數比例在1:1以下時，轉化率隨著加入dna的量增加而呈線性增加）。
（1）細胞生長狀態和密度。密度不足或過高會使轉化率下降。
（2）質粒dna的質量和濃度。用於轉化的質粒dna應主要是共價閉環dna。轉化率與外源dna的濃度在一定範圍內成正比，量過多貨體積過大時，轉化率下降。
（3）試劑的質量。
（4）防止雜菌和其他外源dna的汙染。
（5）根據所需質粒dna的特性，設定相應的選擇性培養基進行篩選，有的可能還需進行多補篩選。
2樓：bie___汀
不一定所以需要通過質粒上的標記基因檢測
3樓：貓太郎
很多野生型大腸桿菌非重組酶缺陷 非內切酶缺陷 等
所以不是轉不進去 是質粒在這些宿主中很不穩定
為什麼不是所有的大腸桿菌都成功轉入了質粒
4樓：匿名使用者
影響轉來化效率的因素很多源,主要有：感受態細胞製備的質量、受體菌生長期（大腸桿菌在對數生長期易產生感受態）、質粒的大小和構型、所用試劑的純度、接種前菌種的保藏方式、冰浴時間（延長冰浴時間可略微提高轉化率）、器皿的清潔度、化合物及無機離子（rb+、mn+、二甲基亞碸能適當提高轉化率）、質粒與細胞個數的比例（質粒與細胞個數比例在1:1以下時,轉化率隨著加入dna的量增加而呈線性增加）.
（1）細胞生長狀態和密度.密度不足或過高會使轉化率下降.
（2）質粒dna的質量和濃度.用於轉化的質粒dna應主要是共價閉環dna.轉化率與外源dna的濃度在一定範圍內成正比,量過多貨體積過大時,轉化率下降.
（3）試劑的質量.
（4）防止雜菌和其他外源dna的汙染.
（5）根據所需質粒dna的特性,設定相應的選擇性培養基進行篩選,有的可能還需進行多補篩選.
如何將一個質粒dna轉入到大腸桿菌感受態細胞中
5樓：萘兒帕爾特管一
不對,通過轉化到感受態
細菌中,不是細胞.感受態的大腸桿菌,可以自己製作也可以通過購買回.之後答將細菌凃到含有抗生素的板子上,長出克隆後挑取單克隆,將單克隆加入含有抗生素的細菌培養基中培養,之後提取質粒,提取質粒可以購買相應的試劑盒,按照試劑盒的說明書操作即可.
質粒是帶有抗性基因的,只有含有該質粒的細菌才能在含有對應抗生素的培養基中存活並增殖,這樣就能確保是你的表達載體質粒.當然為了防止雜菌的汙染,整個過程中最好是無菌操作.而表達載體質粒有可能出現突變等情況,所以可以在提出質粒之後,取少量質粒送測序,來確保序列的無誤.
大腸桿菌bl21為什麼可以用來表達蛋白
不行的，一般克隆bai用菌如dh5 du質粒高拷貝zhi，但誘導表達就不行dao。bl21等典型表達專菌株，用於高效屬表達克隆於含有噬菌體t7啟動子的表達載體 如pet系列 的基因。t7噬菌體rna聚合酶位於 噬菌體de3區，該區整合於bl21的染色體上。人體內蛋白質的種類很多，性質 功能各異，但都...
大腸桿菌感受態製備時為什麼用無抗性的培養基
因為感受態細胞本來就不具備抗性。後期用載體質粒轉化感受態細胞時,我們就是回根據 轉化成功的答大腸桿菌 載體質粒進入該感受態細胞 能在含抗生素的培養基上生長 而轉化不成功 載體質粒沒有進入感受態細胞 的感受態細胞則由於沒有抗性而不能生長 這一原理來判斷是否轉化成功。de3就是bl21吧。沒聽說這個菌株...
為什麼很多中國男人（不知道是不是所有的都這樣）都鄙視母系血統
怎麼我見不到這種情況？肯定不是所有的人這樣認為，是隻有一小部分無知的人這麼認為的。否則我中華民族談何崛起？熱戀中的情侶怎麼戴戒指 處於熱戀期情侶要佩戴熱戀情侶戒指。男女戒壁可以合攏拼成一枚鎖孔圖案，失去一枚，另一枚殘缺品，只送給自己一直在找的另一半，寓意一生有你才安好。戴戒指是有講究的。按西方的傳統...