1樓:匿名使用者
人類基因能在細菌質粒插入並表達,因為生物界共用一套遺傳密碼,我們現在已能把胰島素基因放細菌表達。
質粒是什麼?
2樓:靠名真tm難起
質粒(plasmid)是細菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體(或擬核)以外的dna分子,存在於細胞質中,具有自主複製能力,使其在子代細胞中也能保持恆定的拷貝數,並表達所攜帶的遺傳資訊,是閉合環狀的雙鏈dna分子。
質粒不是細菌生長繁殖所必需的物質,可自行丟失或人工處理而消除,如高溫、紫外線等。質粒攜帶的遺傳資訊能賦予宿主菌某些生物學形狀,有利於細菌在特定的環境條件下生存。
質粒(plasmid) 廣泛存在於生物界,從細菌、放線菌、絲狀真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人類機體中都含有。從分子組成看,有dna 質粒,也有rna 質粒; 從分子構型看,有線型質粒、也有環狀質粒: 其表型也多種多樣。
細菌質粒是基因工程中最常用的載體。
3樓:匿名使用者
質粒(plasmid)
質粒是真核細胞細胞核外或原核生物擬核區外能夠進行自主複製的遺傳單位,包括真核生物的細胞器(主要指線粒體和葉綠體)中和細菌細胞擬核區以外的環狀脫氧核糖核酸(dna)分子。現在習慣上用來專指細菌(大腸桿菌)、酵母菌和放線菌等生物中細胞核或擬核中的dna以外的dna分子。在基因工程中質粒常被用做基因的載體(vector)。
許多細菌除了擬核中的dna外,還有大量很小的環狀dna分子,這就是質粒(plasmid)(補充:部分質粒為rna)。質粒上常有抗生素的抗性基因,例如,四環素抗性基因或卡那黴素抗性基因等。
有些質粒稱為附加體(episome),這類質粒能夠整合進細菌的染色體,也能從整合位置上切離下來成為遊離於染色體外的dna分子。
目前,已發現有質粒的細菌有幾百種,已知的絕大多數的細菌質粒都是閉合環狀dna分子(簡稱cccdna)。細菌質粒的相對分子質量一般較小,約為細菌染色體的0.5%~3%。
根據相對分子質量的大小,大致上可以把質粒分成大小兩類:較大一類的相對分子質量是40×106以上,較小一類的相對分子質量是10×106以下(少數質粒的相對分子質量介於兩者之間)。每個細胞中的質粒數主要決定於質粒本身的複製特性。
按照複製性質,可以把質粒分為兩類:一類是嚴緊型質粒,當細胞染色體複製一次時,質粒也複製一次,每個細胞內只有1~2個質粒;另一類是鬆弛型質粒,當染色體複製停止後仍然能繼續複製,每一個細胞內一般有20個左右質粒。這些質粒的複製是在寄主細胞的鬆弛控制之下的,每個細胞中含有10-200份拷貝,如果用一定的藥物處理抑制寄主蛋白質的合成還會使質粒拷貝數增至幾千份。
如較早的質粒pbr322即屬於鬆弛型質粒,要經過氯黴素處理才能達到更高拷貝數。一般分子量較大的質粒屬嚴緊型。分子量較小的質粒屬鬆弛型。
質粒的複製有時和它們的宿主細胞有關,某些質粒在大腸桿菌內的複製屬嚴緊型,而在變形桿菌內則屬鬆弛型。
在基因工程中,常用人工構建的質粒作為載體。人工構建的質粒可以集多種有用的特徵於一體,如含多種單一酶切位點、抗生素耐藥性等。常用的人工質粒運載體有pbr322、psc101。
pbr322含有抗四環素基因(tcr)和抗氨苄青黴素基因(apr),並含有5種內切酶的單一切點。如果將dn**段插入ecori切點,不會影響兩個抗生素基因的表達。但是如果將dn**段插入到hind iii、bam h i 或 sal i切點,就會使抗四環素基因失活。
這時,含有dna插入片段的pbr322將使宿主細菌抗氨苄青黴素,但對四環素敏感。沒有dna插入片段的pbr322會使宿主細菌既抗氨苄青黴素又抗四環素,而沒有pbr322質粒的細菌將對氨苄青黴素和四環素都敏感。psc101與pbr322相似,只是沒有抗氨苄青黴素基因和psti切點。
質粒運載體的最大插入片段約為10 kb(kb表示為千鹼基對)。
4樓:匿名使用者
質粒存在於許多細菌以及酵母菌等生物中,是細胞染色體外能夠自主複製的很小的環狀dna分子。
5樓:符愫棟書慧
基因工程中,可以用在載體,將目的基因匯入到細胞內。
6樓:暴莉赧幻楓
(1)抗蟲棉基因是基因範疇,而且基因是片段來的不可以直接進入宿主細胞(容易降解)即需要把抗蟲棉的基因先連線到質粒載體上(或病毒載體),保證基因的穩定性,進入宿主細胞後仍然可以完好存在
(2)質粒載體上帶有複製啟動子和轉錄啟動子可保證,連線到載體上的抗蟲棉基因可以正常複製和表達
(3)連線到抗蟲棉基因的載體,看不見摸不著,你怎麼能確定基因連線入載體呢?即使你確定了連線如載體,載體在進入宿主細胞後是否可以表達呢?這兩個問題,最好的解決辦法是在連線抗蟲棉基因進入載體時候,同時連線一個標記基因,方便觀察你構建好的載體是不是正確的,是不是能夠表達,表達是不是穩定(4)得到可以穩定表達的細胞了,然後植物培養得到抗蟲棉,再去用棉鈴蟲感染抗蟲棉,如果觀察到死亡,說明你抗蟲棉基因不僅表達了,而且有功能,否則蛋白沒有功能
因此,從以上幾個不走來看,棉鈴蟲的作用和標記基因沒有直接關係如果還不清楚,先去搞清楚轉基因植物是怎麼得到的
7樓:我是達浪啊
質粒(plasmid) 廣泛存在於生物界,從細菌、放線菌、絲狀真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人類機體中都含有。從分子組成看,有dna 質粒,也有rna 質粒; 從分子構型看,有線型質粒、也有環狀質粒: 其表型也多種多樣。
細菌質粒是基因工程中最常用的載體。
8樓:匿名使用者
質粒具有自主複製能力,使其在子代細胞中也能保持恆定的拷貝數,並表達所攜帶的遺傳資訊。細菌質粒是dna重組技術中常用的載體。載體是指把一個有用的外源基因通過基因工程手段,送進受體細胞中去進行增殖和表達的工具。
我們實驗室用rfect-dna方法轉染過家兔軟骨細胞
當質粒轉化進大腸桿菌時,通過什麼原理表達目的基因
9樓:聽風
當質粒來轉化進大腸桿菌時,通過源dna複製原理表達目的基因。
baicacl2對特定du的大腸桿菌處理,製備感受zhi態的細菌。dao這些細菌可使每微克超螺旋質粒dna,如一些插入目的dn**段的重組質粒,產生5×106~2×107 個轉化的菌落。當質粒與這些大腸桿菌混合後,質粒粘附在大腸桿菌的表面,在42℃的溫度時,大腸桿菌出現熱休克,質粒可通過大腸桿菌細胞膜上形成的空隙進入菌體內。
隨後,加入lb培養液,於37℃振動培養可使細菌復甦,並且表達質粒編碼的抗生素抗性基因,提高轉化效率。轉化成功的大腸桿菌可以在相應抗生素培養皿中傳代,形成菌落。
由於大腸桿菌繁殖快,在適宜的條件下繁殖一代僅需要20~30分鐘,而且常用質粒可以在大腸桿菌中達到幾百個拷貝,因此,通過對轉化成功的大腸桿菌培養,可以在短時內極大地擴增目的質粒。(作為分子生物學用大腸桿菌,是經過實驗室改造過的工程菌。)
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