1樓：義翹神州加油
一般膜比膠略大，周圍留些地方用於標記、鉗夾…
如果是溼轉的話膜和膠的大小沒有關係；半乾轉才有更多要求。
關於小分子蛋白的western-blot問題，實驗時的膠濃度，電壓，轉膜條件等等 20
2樓：糟油酒丸
我最小bai也只做過十幾kd的。但是根據原
du理呢zhi主要有以下注dao意事項：
1。回當然是膠的濃度。9kda的話要適
答當增大，15-20%應該差不多吧。如果實在不行還能考慮用gradient gel。
2。二是轉膜緩衝液，內要含20%甲醇，新鮮配製，反覆使用的話注意甲醇會蒸發掉。如果連續使用的話兩三次應該還可以。
甲醇一是能夠洗掉跑膠時泡透了的sds(sds使蛋白帶負電，方便移動)，二是幫助蛋白固定到膜上面。它同時有收縮膠的孔徑的***，但對小分子無影響。
3。三是膜的孔徑。很多常規的膜孔徑為0.
45um。你如果做小分子，17kd以下都跑掉了，那你應該試試0.2um孔徑的膜。
有一個小訣竅是轉膜時疊兩張膜一起轉，如果小分子蛋白跑過了前面一張膜，那總還有可能被後面一張膜抓到。
4。四是轉膜時間。小分子的話就不要過夜轉，採取100v一小時應該就可以了，注意降溫。
3樓：匿名使用者
不知道你說的tricine膠是什麼配方 先把跑膠和轉膜時間都縮短點看看唄 反正我之前做過的一個大概10kd的 確實得換另一種膠的配方
4樓：匿名使用者
invitrogen預製膠，別自己配了，不好控制。
5樓：枝基長靜晨
一般濃縮
膠抄為80v，這樣可以達到較好的濃縮效果，當條帶達到分離膠時，可以調到220v，這樣時間快點，做wb時蛋白降解較少。轉膜時一般為100v，轉膜時間要根據蛋白大小確定，130kd蛋白分子較大，最好時間長點，不過太長也不好，蛋白轉透過膜的，大約要1個半小時吧。希望採納.....
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