western blot蛋白質處理要用到超聲波呢?超聲波在裡面起到什麼作用呢?有可以替代的方法嗎

2021-03-22 07:14:59 字數 3655 閱讀 3356

1樓:匿名使用者

wb是從電泳轉膜開始算起的,然後block,孵育一抗二抗,**,不需要超聲

在前面的生化過程中,獲得細胞的裂解液時,是要用到超聲破碎的,適用於少量的細胞,與triton x-100配合使用可以有效的裂解細胞,而不破壞細胞內的蛋白。這一部分你可以參考生化實驗手冊。另外,壓力破碎可以代替超聲,去汙劑(比如triton x-100)配合針筒抽提,都可以,前者可以大量破碎,後者只適用於小量破碎

2樓:匿名使用者

應該是起催化作用吧,找找生化學或者超聲生物學方面的應用。

western blot中為什麼要確定標準曲線

3樓:匿名使用者

一般western blot我都不需要標準曲線,設定好陽性和陰性對照基本可以進行定性的檢測,如果定量檢測蛋白,我推薦elisa,更適於定量檢測。

4樓:匿名使用者

如果你要用western blot方法去對蛋白質進行處理,你當然要在上前進行標曲的處理,以判斷蛋白質的量,這樣你的最後條帶強度會更適合。

5樓:蘑菇龜龜

就類似與測酶活需要標準曲線是一樣的!

western blot中出現皺眉狀條帶咋回事?

6樓:匿名使用者

western blot實驗中會遇到很多問題,最後我決定找公 司做算了,剛開始找了家,感覺比較便 宜就找他們做了,最後跑出來的條帶直接沒法看呀!最後有幸認識了威斯騰的業務員,和他們接觸過後感覺比較靠 譜,雖然**不便宜,但跑出來的條帶還是不錯的。

超聲波發生器有什麼作用??

7樓:太虛夢魘

超聲波發生器,通常稱為超聲波電箱、超聲波發生源、超聲波電源。它的作用是把我們的市電(220v或380v,50或60hz)轉換成與超聲波換能器相匹配的高頻交流電訊號。從放大電路形式,可以採用線性放大電路和開關電源電路,大功率超聲波電源從轉換效率方面考慮一般採用開關電源的電路形式。

線性電源也有它特有的應用範圍,它的優點是可以不嚴格要求電路匹配,允許工作頻率連續快速變化。從目前超聲業界的情況看,超聲波主要分為自激式和它激式電源。

超聲波發生器有頻率微調的功能,調整範圍2%,在不同的工況條件下略微調整使換能器始終工作在最佳狀態下,換能效率達到最大,在不同工況下都能達到最佳效果。

超聲波發生器具有掃頻功能,通過在清洗過程中超聲波頻率在合理的範圍內往復掃動,帶動清洗液形成細微迴流,使工件汙垢在被超聲剝離的同時迅速帶離工件表面,提高清洗效率。

超聲波發生器具有功率調節的功能,輸出功率可實現10%—100%的連續調整,以適應各種清洗物件的要求。

怎麼檢測到超聲波,有什麼儀器可以檢測到超聲波存在嗎 5

8樓:匿名使用者

您好。可以檢測到的。超聲波發射的方向性很強。能量集中,波形為正弦波。

稍微好點的頻率表或者示波器都能感應到!

示波器容易買到。您到電子市場去看看。或者直接到網上採購(阿里巴巴)。

如果您檢測的超聲波是以聲波形式的。您還需要配一個聲波探頭(這個就很貴了,必須要買進口的).

您好。這個肯定是可以測出來的。(潛艇用的就這個方式)。不過這種情況我也沒有實踐過,

不能實際的回答您了。

您好。 聲波探頭有一定的頻率侷限性的。 當然理論上是什麼都能測。但考慮到檢測的精度,探頭有分頻率範圍的。選擇時就看您的需求。

9樓:黑色密碼

超聲波的特點

(一)超聲波在傳播時,方向性強,能量易於集中。   (二)超聲波能在各種不同媒質中傳播,且可傳播足夠遠的距離。   (三)超聲波與傳聲媒質的相互作用適中,易於攜帶有關傳聲媒質狀態的資訊(診斷或對傳聲媒質產生效應)。

(**)   超聲波是一種波動形式,它可以作為探測與負載資訊的載體或媒介(如b超等用作診斷);超聲波同時又是一種能量形式,當其強度超過一定值時,它就可以通過與傳播超聲波的媒質的相互作用,去影響,改變以致破壞後者的狀態,性質及結構(用作**)。

超聲波是如何應用在農業的

westernblot 膜幹了怎麼辦?

10樓:匿名使用者

膜幹了以後可以通過浸泡甲醇恢復,轉膜過程發生幹膜也可以這樣,但是會對結果有一定影響。就像樓上說的,孵育過抗體再晾乾就不能strip了,一般stripping 試劑盒說明書都有強調這個。如果要儲存膜可以浸泡在pbs或tbs中,4度放置。

注意:上過抗體的膜最好不要晾乾,可能會導致無法strip。

11樓:霓裳嵐嵐

如果是pvdf膜就沒事,你掃描了麼?有時候膜幹了條帶更清楚。如果是硝酸纖維素膜就有點麻煩,因為幹了一碰就碎,不知道你是不是用拍照的。

12樓:陳墨徹汗卯

個人建議時間不要再長了,再長蛋白有可能變性造成後續實驗無法進行。我原來遇到這類問題是用以下幾種方法嘗試解決的,你也可以嘗試一下

(1)檢查一下你的三明治結構夾的怎麼樣,尤其是膜及濾紙的邊緣是不是有短接的地方,這個是最容易出現的問題。另外膜和膠之間是不是有氣泡,不推薦用外力去擀壓膜和膠,推薦用緩衝液潤溼膜和膠之後,像做切片蓋蓋玻片一樣從一邊蓋下趕出氣體。要絕對確保沒有短接和氣泡,不然很容易出現轉膜不完全的問題。

(2)換成恆壓的試試,這個方案我不知道原理是什麼,但是有的時候確實能夠解決問題。

(3)換成半乾轉的方法,但是注意半乾轉更要確保沒有短接氣泡,而且時間不能過長,半乾轉的發熱量很大。我不清楚你的蛋白是不是需要活性,如果遇熱失活那就不能用這種方法。

(4)這個方法比較浪費,看老闆讓不讓你用了。換成品緩衝液商品,西格瑪的比較好。另外換24層濾紙成品,用一次不要再使用第二次。

還有就是還一個牌子的膜,我們實驗室曾經遇到過一個牌子的膜完全轉不出來的現象。

以上,希望你的問題早日能夠解決。

超聲波的應用有哪些

13樓:drar_迪麗熱巴

(一)工程學方面的應用:水下定位與通訊、地下資源勘查等(二)生物學方面的應用:剪下大分子、生物工程及處理種子等(三)診斷學方面的應用:

a型、b型、m型、d型、雙功及彩超等(四)**學方面的應用:理療、治癌、外科、體外碎石、牙科等超聲波是一種頻率高於20000赫茲的聲波,它的方向性好,穿透能力強,易於獲得較集中的聲能,在水中傳播距離遠,可用於測距、測速、清洗、焊接、碎石、殺菌消毒等。在醫學、軍事、工業、農業上有很多的應用。

超聲波因其頻率下限大於人的聽覺上限而得名。

科學家們將每秒鐘振動的次數稱為聲音的頻率,它的單位是赫茲(hz)。我們人類耳朵能聽到的聲波頻率為20hz-20000hz。因此,我們把頻率高於20000赫茲的聲波稱為「超聲波」。

通常用於醫學診斷的超聲波頻率為1兆赫茲-30兆赫茲。

理論研究表明,在振幅相同的條件下,一個物體振動的能量與振動頻率成正比,超聲波在介質中傳播時,介質質點振動的頻率很高,因而能量很大.在中國北方乾燥的冬季,如果把超聲波通入水罐中,劇烈的振動會使罐中的水破碎成許多小霧滴,再用小風扇把霧滴吹入室內,就可以增加室內空氣溼度,這就是超聲波加溼器的原理。

14樓:匿名使用者

超聲技術是一門以物理、電子、機械及材料學為基礎的通用技術之一。超聲技術是通過超聲波產生、傳播及接收的物理過程而完成的。超聲波具有聚束、定向及反射、透射等特性。

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