出來的條帶不清晰怎樣才能跑出來好看的條帶

2021-06-07 05:36:53 字數 2138 閱讀 8646

1樓:超級情情情兩難

這個跟引物好壞有很大關係,好的引物易與dna模板特異性結合,gc含量、tm值等也利於pcr擴增產物,不好的引物可能本身與dna結合就不夠緊密或者不能特異性結合,還有就是本身容易形成二聚體,擴增效率也不高,導致pcr產物量少甚至根本沒有,自然跑不出條帶

條帶清晰 英文怎麼說

2樓:匿名使用者

條帶清晰

英文翻譯

clear strip

3樓:心儀物語

clear strips

怎樣跑出漂亮的電泳條帶

4樓:

電壓不要太高,否則會拖尾。電泳緩衝液最好新配,否則溶液中離子濃度會改變。上樣量不可過大,否則會手牽手

5樓:1志邦科技

這個需要很複雜的工藝的。不是一下子就能說清楚的。而且有些還涉及到工藝問題。

所以這個一般都很少人透露

sds-page跑不出條帶是什麼原因啊!急求解決!

6樓:匿名使用者

沒大聽說過,染色以後結合的染料很難去除掉的。

我知道的是做western可以復性。蛋白轉導膜上,顯色(熒光、ecl)後再用tris溶液處理,再上一抗、二抗。

瓊脂糖凝膠電泳圖上樣孔中的條帶跑不出來怎麼回事? 5

7樓:匿名使用者

每次做電泳時有沒有跑marker,如果marker沒有,是膠的問題,可能是核酸染料加少了或者電泳時間過長,染料跑沒了。如果marker有,多半是樣品的問題,或者是跑膠時間過長 樣品都跑出去。

8樓:普黎昕

點樣沒點好或者制孔沒制好,樣品沒提出dna根據目的條帶長度來調整凝膠濃度,一般1.5%左右,也不一定。

紫外燈下沒見帶,不一定沒有出孔,而是量少看不到,可以測一下濃度看一下,或直接試跑一下pcr。

電泳時間可能過長,一般75v×30min左右,但是具體看溴酚藍的離孔距離和目的條帶離孔距離。

9樓:匿名使用者

暈 怎麼會做成這樣的 一個都沒跑出來 樣品是什麼 不會都是非極性分子吧

求問dna pcr跑膠**中的不明顯條帶是什麼,為什麼會出現這些條帶?如下圖

10樓:匿名使用者

非特異性擴增產物。應該優化pcr反應,比如提高退火溫度(首選)、減少酶量(首選)、降低鎂離子濃度、降低模板濃度、降低引物濃度等等。如果不行,還可以重新設計引物,增強引物的特異性。

pcr跑出的條帶與目的條帶不同怎麼辦

11樓:北京索萊寶科技****

存在兩種可能性,

第一,引物設計錯誤,可以將引物和參考序列進行拼接後看看能不能順利拼接,以及拼接之後的目的片段長度;

第二,可能是非特異擴增,這個時侯如果確定引物位置沒有問題,可以調整退火溫度,以及pcr體系內的各種物質濃度,看看能不能得到目的條帶;如果反覆試驗都無法得到目的片段,那麼就說明您的引物在基因組上可能存在2個或2個以上的結合位點,以至於無法得到合格的目的片段,這個時候就只能重新設計引物了.一般重新設計引物都能解決擴增問題的,

pcr跑不出條帶是什麼原因

12樓:南京金益柏

先解決陽性對照再考bai慮你的目的基因du。

陽性對照都沒有zhi的可能

dao性有兩種,陽性對照模板有問題版,權pcr體系的問題(包括引物的問題)。

看你的內參下面沒有引物二聚體,那後面泳道里最下面的那一道就是引物二聚體了。

pcr失敗的原因太多了,

試劑有問題,

或者條件有問題,

第一次用一個引物,建議做梯度

電泳怎麼都跑不出條帶

13樓:北京索萊寶科技****

每次電泳時候跑marker了嗎?如果marker沒有,是膠的問題,可能是核酸染料加少了或者電泳時間過長,染料跑沒了。如果marker有,多半是樣品的問題。

或者是跑膠時間過長 樣品都跑出去

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