1樓:野秀梅實己
細菌質粒上的目的基因不會轉到受體細胞的dna上,只能以質基因形式表達,如果要把目的基因轉到受體細胞的dna分子上,需要把目的基因匯入逆轉錄病毒體內,通過逆轉錄,轉到轉到受體細胞的dna分子上
2樓:
一般利用病毒侵染細菌的原理讓帶有目的基因的質粒匯入受體細胞。
3樓:匿名使用者
1.先加到運載體上:質粒、動植物病毒等
再匯入受體細胞:顯微注射、病毒侵染等方法
2.目的基因匯入受體細胞,需要運輸工具即運載體,如大腸桿菌的質粒。用一種限制性內切酶切斷目的基因和質粒使它們產生相同的粘性末端,在切口加入dna連結酶後,質粒的粘性末端就會與目的基因的粘性末端鹼基互補配對結合,行成重組dna分子,把它匯入受體細胞如細菌、酵母菌,目的基因就能隨受體細胞的繁殖而複製
4樓:匿名使用者
dna連線酶
利用化學或物理的方法誘導如:聚乙二醇
生物方法“滅活的仙台病毒”誘導細胞融合
5樓:匿名使用者
你的受體細胞是什麼?不同種類的細胞方法是不同的,轉化效率也是不同的。所有轉化法都需要先把受體細胞製作成感受態細胞。
最好操作的就是大腸桿菌細胞。可選擇的方法有:熱激法,電穿孔法,化學轉化法等。
酵母:氯化鋰轉化法,電穿孔法,這兩種方法一般需要把環形質粒線性化。
真核細胞:原生質體融合,基因槍法,精子介導法,病毒載體介導法,顯微注射法,花粉管介導法等等。
基因表達載體的構建與將目的基因匯入受體細胞的區別? 15
6樓:匿名使用者
基因表達載體是一種東西,通常是大腸桿菌,土壤融桿菌等細菌中的dna質粒專,這些質粒作為載體通屬過dna連線酶與目的基因結合。
目的基因匯入受體細胞則是一種過程,指通過顯微注射器或加cacl2改變細胞膜通透性後將目的基因的質粒匯入受體細胞的過程。
基因匯入細胞分兩個過程。
1.目的基因與載體(質粒)結合。
2.將結合了目的基因的載體(質粒)匯入受體細胞。
7樓:楊利平
先解釋一下基因copy表達載體
基因表達載體是指已經插入了目
的基因之後的載體像你所說的 插入目的基因之後的質粒一樣 並不是 所謂的 使目的基因匯入受體細胞 ,使目的基因匯入受體細胞 講的是一個過程
再說兩個短語區別
基因表達載體的構建 就是 相當於重組 質粒 使其加上目的基因目的基因匯入受體細胞 顯然也就是將重組好的質粒放入 受體細胞 使其 表達
發表一下看法 不知道對不對 呵呵 應該是這樣的吧
8樓:匿名使用者
no這兩個是
來不同的概念。構建表達載體源,指的是bai構建一個攜帶目的基因的載du體,通常,zhi我們用ti質粒。
而將目的基因導dao入受體細胞,是指將載體匯入受體細胞,從而讓其表達。這個過程我們有很多方法,比如顯微注射技術,或者cacl2改變通透性後注入。
9樓:破曉的霧
匯入時一回事,表達是另一回事
你匯入了不一定會表達,匯入的目的是使目的基因在回受體內表達出來答。
你必需構建好了載體(終止子,開始子,標記基因....等等),再植入到受體細胞中,從而表達出目的基因所控制的形狀。
為什麼把目的基因匯入受體細胞要用載體?
10樓:魚骨頭愛游泳
要考慮目的基因在細胞中表達,直接匯入目的基因無法表達,沒有表達即轉錄相關的原件,而載體具有!
11樓:123來不及
細胞中外來的dna一般都會被降解掉,而且,就算進到細胞中,還要能複製,能表達才行。載體是自然條件下可以進入細胞,並且能夠複製和表達的dna,所以必需要藉助載體才能進入受體細胞。
pcr只能擴增基因片段,並不能表達,目前還沒有脫離細胞進行的表達過程。
12樓:靜軒散人
首先pcr利用的是dna在不同溫度下的變性和復性,與在細胞中的複製是不一樣的。
*************************===就像你說的,用到質粒的原因實際上就是啟動子,終止子,複製原點和標記基因,如果目的基因上有了他們很可能就不用質粒了,可是目的基因上可能有這些東西都有嗎?
事實上質粒上的啟動子和終止子也是後來做上去的,因為它需要適合受體細胞,能讓受體細胞識別。
13樓:匿名使用者
對的,不一定需要載體。
只要你p出來的片段是完整的,外界條件適當,啟動子響應,啟動子下游的目的基因(orf)就有機會轉錄表達出來。(pcr-->切膠**-->轉化-->篩選) (注意是有機會!機會是否比載體匯入的大,不一定。
)通過載體匯入的好處,一是量產;二是有篩選基因方便挑選transformants;三是方便下游的鑑別。
14樓:匿名使用者
遊離的dna進入細胞體,一般會直接被分解,就算可以進行轉錄——翻譯成蛋白,遊離dna也無法跟著細胞**進行復制,導致子代細胞中不再含有目的基因,也就是說,你費力將基因匯入受體細胞,結果只有一個細胞被改變了,整個群體細胞菌落不會有可觀察的任何變化.
而將基因接入載體,由於載體可以在細胞內複製,隨著細胞**,載體會帶著目的基因存在於每個子代細胞中,最終整個菌落髮生可以觀察到的變化,基因工程才有意義.
基因工程是一個巨集觀提取——微觀改造——巨集觀檢驗的過程,就是依靠各種載體實現的
質粒和目的基因的問題急,關於質粒的問題。
是把目的基因連到了質粒的切口上。至於你說的什麼重組產物種質粒和質粒的結合 完全不明白你在說什麼 重組產物已經沒有粘性末端留出來 不可能兩個質粒重組 也不可能有什麼重新修復 是兩個質粒的重組,因為是同一種限制酶切割的,兩個質粒可以重組。而且既然是質粒與質粒,就是指兩個質粒間的重組。dna連線酶連線時,...
為什麼質粒上要有標記基因目的是?詳細點 謝謝
為了檢抄 測目的基因是否成功襲 匯入 假若標記了x黴素的抗性基因 那麼質粒成功匯入的個體中就應該能抗x黴素 在x黴素的環境下培養 生存下來的就是成功匯入質粒的 這樣就能篩選出來成功匯入質粒的個體 畢竟成功匯入質粒的個體並整合的是少數 質粒上有兩個或兩個以上標記基因的作用是什麼?來看看吧 謝謝 有2個...
怎樣防止目的基因和載體的自連
為了防止目的兩端及載體的兩端連線在一起,可以用兩種限制酶切割目的基因兩端,同時也用這兩種限制酶切割載體,這樣就能形成兩種黏性末端,同時也能防止目的基因和載體的自連。如果用單酶切,防止載體自連,可以用鹼性磷酸單酯酶處理載體,而目的基因不作處理。也可以使用不同的酶進行酶切,就不會出現自連問題了。用鹼性磷...