1樓:
為了檢抄
測目的基因是否成功襲
匯入 假若標記了x黴素的抗性基因 那麼質粒成功匯入的個體中就應該能抗x黴素 在x黴素的環境下培養 生存下來的就是成功匯入質粒的 這樣就能篩選出來成功匯入質粒的個體 畢竟成功匯入質粒的個體並整合的是少數
質粒上有兩個或兩個以上標記基因的作用是什麼? 來看看吧 謝謝
2樓:匿名使用者
有2個標記的質粒很常見的,主要為了選用抗生素的時候更加方便,根據實驗的要求選用。和匯入的基因無關,因為在匯入前就存在的。你給的那個連結並沒有全面回答這個問題。
比如ta克隆的質粒,一般帶有2個抗生素抗藥基因。另外,就像樓上說的,還有比如藍白試驗看有無序列插入克隆位點的,那就有至少3個標記基因了
3樓:匿名使用者
目的基因匯入質粒後,質粒匯入受體細胞,是為了檢測受體細胞中是否匯入含目的基因的質粒
4樓:荊國野人
檢驗質粒是否進入細胞等更加方便。檢驗的手段也更加多(手段一多就有更方便、更節約的選項)。在這,限制性內切酶有可能把標記基因給「切沒了」或者「切壞了」,多幾個標記基因保險的多。
運載體上必須有標記基因,以此來了解目的基因是否表達 這句話為什麼錯了 求詳細
5樓:魔力
很簡單,插
bai入失活。剛
du好沒有標記基因,zhi
卻是驗證了表達。
要是從更加dao詳細來看,版運載體上有標記權基因並不能夠了解是否表達,只能是確定了轉化或者轉染,要是想驗證表達,必須從蛋白層面上看。驗證目的基因表達需要抗體驗證,基因只是能夠證明有此基因,並不一定跟表達相關。
如有其它不明,敬請追問,謝謝。
6樓:匿名使用者
應該是以此來了解目的基因和載體組成的重組子是否轉化到宿主細胞了吧
7樓:匿名使用者
標記基因是用來檢測目的基因是否匯入受體細胞的,而不是檢測目的基因是否表達的。
標記基因的作用質粒上有兩個或兩個以上標記基因的作用是什麼?
8樓:百優生物
質粒上有兩個或兩個以上
標記基因是為了使用方便。而且兩個標記基因的功能是不一樣的。比如我們最常用的puc18/19等,一個是氨苄抗性,另一個是lac z基因。
前一個基因的存在,讓我們在培養時加入氨苄可以讓細菌時刻把這個質粒帶著,如果不加氨苄,細菌肯定會把這個質粒丟掉的(畢竟質粒相對於細胞來說是一個包袱,但當氨苄存在時,如果細菌把質粒丟了,細菌便不能抗氨苄而被殺死)。
而lac z基因是為我們插入目的基因篩選而用的。lac z基因本身在iptg和x-gal的作用下,而產生蘭斑。而且這個基因上有很多的酶切位點,方便我們插入自己想要的基因。
而我們的基因插入後,把lac z基因破壞了,不能產生蘭斑。這就是蘭白斑篩選。
9樓:嗚咔咔
跟你簡單的說吧
首先質粒是細菌擬核裸露dna外的遺傳物質,真核細胞是沒有質粒的,目的基因先與質粒連線,經過一定的方法鑑定,一般是酶切、電泳,看目的基因是否與質粒連線上,將連線成功的重組質粒匯入受體細胞,這裡的受體細胞一般是真核細胞,如果帶標記基因的重組質粒匯入細胞了就可以用選擇培養基篩選了。
10樓:丈八蛇矛
區分重組質粒與普通質粒的方法有很多,比如利用α-互補原理進行藍白斑篩選,利用插入失活原理進行雙抗篩選,以及針對插入目的片段功能的底物篩選等。對於一般的質粒載體,則可隨機挑取單菌落,採取菌落pcr、southern blot、質粒抽提及酶切等方法來判斷是否重組質粒。
11樓:玄楓
檢測標記基因,就是看一看質粒是不是已經轉入了,在此基礎上還要進行目的基因的檢測,mrna的檢測和表達產物的檢測,分別利用dna分子雜交,dna-rna分子雜交,以及抗原抗體雜交
12樓:匿名使用者
在插入位點兩邊設計引物pcr,看電泳條帶大小,或者直接測序看是不是目標序列
或者雙酶切,再電泳看看匯入進去了沒,質粒上應該有酶切位點的吧
標記基因和目的基因的區別
質粒和重組質粒中標記基因的作用分別是什麼?
13樓:清風白酒留故人
1、質粒中標記基因的作用是有利於對目的基因是否匯入進行檢測。
2、重組質粒上的標記基因的作用是鑑別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。
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