為什麼要構建基因文庫?直接從含有目的基因的生物體內提取不行嗎

2021-09-15 03:41:16 字數 3692 閱讀 2225

1樓:匿名使用者

基因文庫技術分離目的基因 所謂文庫(1ibrary)是指一種全體的集合。基因文庫(gene library)則是指某一生物型別全部基因的集合。這種集合是以重組體形式出現。

某生物dn**段群體與載體分子重組,重組後轉化宿主細胞,轉化細胞在選擇培養基上生長出的單個菌落(或噬菌斑)(或成活細胞)即為一個dn**段的克隆。全部dn**段克隆的集合體即為該生物的基因文庫。 構建基因文庫的意義不只是使生物的遺傳資訊以穩定的重組體形式貯存起來,更重要的是它是分離克隆目的基因的主要途徑。

對於複雜的染色體dna分子來說,單個基因所佔比例十分微小,要想從龐大的基因組中將其分離出來,一般需要先進行擴增,所以需要構建基因文庫。在很多情況下目的基因的分離都離不開基因文庫。此外基因文庫也是複雜基因組作圖的重要依據。

基因文庫構建包括以下基本程式: ① dna提取及片段化,或是cdna的合成。 ② 載體的選擇及製備。

③ dn**段或cdna與載體連線。 ④ 重組體轉化宿主細胞。 ⑤ 轉化細胞的篩選。

當獲得了含重組體的宿主細胞時,即完成了基因的克隆。基因的克隆只是分離基因的基礎,基因克隆後還要對克隆的基因進行分離,即利用各種手段把目的基因從文庫中分離出來。分離出目的基因還必須對其進行必要的檢測與分析:

如進行序列測定,體外轉錄及翻譯、功能互補實驗等。通過這些實驗確定出基因的結構及功能。到這時才能算分離到了目的基因。

所以,基因的克隆、克隆基因的分離、分離基因的鑑定是利用基因文庫技術分離目的基因的主要內容

2樓:匿名使用者

1.構建基因文庫一是為了儲存住現有的物種基因,二是為了研究的時候可以不用去原生物體內去取。全球有很多這樣的機構,atcc就是一家。

為什麼構建基因文庫?直接從生物體內提取不行嗎

3樓:

當然不能直接提取。

基因是一個人為概念,但從分子角度上看,基因與非基因沒有分子水平的差異。而我們要操作分子,必須找到目標靶序列。所以,不可能直接提取任何一個基因,只能通過探針或者其他方式找到基因,並作相應的處理。

使之可以識別。

另外,不同基因在體內的拷貝數和表達頻率差異都很大,例如指導胚胎髮育的基因在成體內不表達,不可能從成體體內找到其表達產物,也就無法定位該基因,而例如核糖體dna之類的基因,表達活躍,拷貝數多,它們往往掩蓋了低丰度基因的檢測。所以必須構建基因文庫,使得高丰度與低丰度的基因都能被覆蓋並檢測到。

最後,理論上,可以直接提取,但是實際和理論是由很大差異的。所以人們才構建許多方法以達到要求。所以不能光因理論可行,就忽略實際情況。

4樓:匿名使用者

構建基因文庫是獲取目的基因的方法之一,並不是惟一的方式。如果所需要的目的基因序列已知,就可以通過pcr方式從含有該基因的生物的dna中,直接獲得,也可以通過反轉錄,用pcr方式從mrna中獲得,不一定要構建基因文庫。但如果所需要的目的基因的序列完全不知,或只知道目的基因序列的一段,或想從一種生物體內獲得許多基因,或者想知道這種生物 與另一種生物之間有多少基因不同,或者想知道一種生物在個體發育的不同階段表達的基因有什麼不同,或者想得到一種生物的全基因組序列,往往就需要構建基因文庫。

為什麼要構建基因文庫?直接從含有目的基因的生物體內提取不行嗎?

5樓:手機使用者

基因文庫技術分離目的基因 所謂文庫(1ibrary)是指一種全體的集合。基因文庫(gene library)則是指某一生物型別全部基因的集合。這種集合是以重組體形式出現。

某生物dn**段群體與載體分子重組,重組後轉化宿主細胞,轉化細胞在選擇培養基上生長出的單個菌落(或噬菌斑)(或成活細胞)即為一個dn**段的克隆。全部dn**段克隆的集合體即為該生物的基因文庫。 構建基因文庫的意義不只是使生物的遺傳資訊以穩定的重組體形式貯存起來,更重要的是它是分離克隆目的基因的主要途徑。

對於複雜的染色體dna分子來說,單個基因所佔比例十分微小,要想從龐大的基因組中將其分離出來,一般需要先進行擴增,所以需要構建基因文庫。在很多情況下目的基因的分離都離不開基因文庫。此外基因文庫也是複雜基因組作圖的重要依據。

基因文庫構建包括以下基本程式: ① dna提取及片段化,或是cdna的合成。 ② 載體的選擇及製備。

③ dn**段或cdna與載體連線。 ④ 重組體轉化宿主細胞。 ⑤ 轉化細胞的篩選。

當獲得了含重組體的宿主細胞時,即完成了基因的克隆。基因的克隆只是分離基因的基礎,基因克隆後還要對克隆的基因進行分離,即利用各種手段把目的基因從文庫中分離出來。分離出目的基因還必須對其進行必要的檢測與分析:

如進行序列測定,體外轉錄及翻譯、功能互補實驗等。通過這些實驗確定出基因的結構及功能。到這時才能算分離到了目的基因。

所以,基因的克隆、克隆基因的分離、分離基因的鑑定是利用基因文庫技術分離目的基因的主要內容

6樓:將建安磨貞

構建基因文庫是獲取目的基因的方法之一,並不是惟一的方式。如果所需要的目的基因序列已知,就可以通過pcr方式從含有該基因的生物的dna中,直接獲得,也可以通過反轉錄,用pcr方式從mrna中獲得,不一定要構建基因文庫。但如果所需要的目的基因的序列完全不知,或只知道目的基因序列的一段,或想從一種生物體內獲得許多基因,或者想知道這種生物與另一種生物之間有多少基因不同,或者想知道一種生物在個體發育的不同階段表達的基因有什麼不同,或者想得到一種生物的全基因組序列,往往就需要構建基因文庫。

關於相關問題你可以使用下101教育ppt裡面有相關的課件可以讓你更加了解。

為什麼要構建基因文庫直接從含目的基因的生物體內提取不行嗎

7樓:鄒晨夕

理論上是可以,但是很麻煩;首先取得目的基因後的擴增,轉入受體細胞等操作都需要載體。目的基因片段是無法直接在其他細胞內表達的;當然還有很多的問題。

高中生物 為什麼基因文庫裡的受體菌不能直接用來表達目的基因 還要從基因文庫裡提取目的基

8樓:匿名使用者

一、dna文庫和cdna文庫的概念將某種生物的基因組dna切割成一定大小的片段,並與合適的載體重組後匯入宿主細胞進行克隆。這些存在於所有重組體內的基因組dn**段的集合,即基因組文庫,它包含了該生物的所有基因。以mrna為模板,經反轉錄酶催化,在體外反轉錄成cdna,與適當的載體(常用噬菌體或質粒載體)連線後轉化受體菌,則每個細菌含有一段cdna,並能繁殖擴增,這樣包含著細胞全部mrna資訊的cdna克隆集合稱為該組織細胞的cdna文庫。

二、dna文庫和cdna文庫的構建原理dna文庫:用限制性內切酶切割細胞的整個基因組dna,可以得到大量的基因組dn**段,然後將這些dn**段與載體連線,再轉化到細菌中去,讓宿主菌長成克隆。這樣,一個克隆內的每個細胞的載體上都包含有特定的基因組dn**段,整個克隆群體就包含基因組的全部基因片段總和稱為基因組文庫。

cdna文庫:以mrna為模板,經反轉錄酶催化,在體外反轉錄成cdna,與適當的載體常用噬菌體或質粒載體連線後轉化受體菌,則每個細菌含有一段cdna,並能繁殖擴增,這樣包含著細胞全部mrna資訊的cdna克隆集合稱為該組織細胞的cdna文庫。三、dna文庫和cdna文庫的用途基因組含有的基因在特定的組織細胞中只有一部分表達,而且處在不同環境條件、不同分化時期的細胞其基因表達的種類和強度也不盡相同,所以cdna文庫具有組織細胞特異性。

cdna文庫顯然比基因組dna文庫小得多,能夠比較容易從中篩選克隆得到細胞特異表達的基因。但對真核細胞來說,從基因組dna文庫獲得的基因與從cdna文庫獲得的不同。dna文庫所含的是帶有內含子和外顯子的基因組基因,而從cdna文庫中獲得的是已經過剪接、去除了內含子的cdna

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