1樓：回家種紅薯去不
實驗方法
hoechst-pi染色法檢測細胞凋亡
亞「g1 」峰方法簡便，但只是代表g0 /g1 期發生凋亡的細胞，s期和g2 期細胞凋亡發生於g1 峰後，無法觀察。此外，由於全部細胞均經固定，因此不能區別死細胞和活細胞。hoechst-pi染色則可彌補上述不足。
hoechst 33258 可被活細胞攝取，與dna結合在紫外光下呈藍色熒光。繼而pi使死細胞著染產生紅色熒光。因此在細胞二維直方圖上根據紅藍兩種熒光可分辨三種細胞：
正常活細胞對染料有拒染性，藍色和紅色熒光均較少；凋亡細胞有膜通透性改變，主要攝取hoechst染料，表現為強藍色熒光，弱紅色熒光；壞死細胞由於有很強的pi嗜染性並可覆蓋hoechest染色，故呈弱藍色強紅色熒光。
【材料及試劑】
（1）碘化丙啶（pi）貯存液：100mg/ml，4℃避光儲存。
（2）hoechst 33258貯存液：100mg/ml，4℃避光儲存。
（3）0.01mol/l pbs ph 7.0~7.2
【操作步驟】
（1）常規制備單細胞懸液；
（2）加入hoechst 33258 溶液，使其終濃度為1mg/ml，37 ℃水溶，7分鐘；
（3）冰上冷卻， 離心棄染液， pbs重懸；
（4）加入pi染液，使其終濃度為5mg/ml，冰浴；
（5）離心棄染液，pbs洗一次，進行流式細胞儀進行分析，、直外鐳射檢測記錄400~500nm處藍色熒光和大於630nm處紅色熒光；
【結果判斷】
正常對照細胞呈弱藍色及弱紅色熒光；凋亡細胞呈藍色及弱紅色熒光，壞死細胞呈強紅色及弱藍色。
求助hoechst33258染色步驟
hoechst33258染色細胞所用的濃度一般是多少
2樓：匿名使用者
該用多少濃度的hoechst33342染活細胞的細胞核
測細胞凋亡，貼壁細胞dapi染色，最好是固定。
dapi溶液是半通透性的，不固定的話，細胞染色時間得長，染料進入細胞會比較少，所以建議是固定。
dapi 可以透過完整的細胞膜，它可以用於活細胞和固定細胞的染色。
dapi溶液使用步驟：
固定細胞或組織樣品，經過固定後，適當洗滌除去固定劑。如果需要進行免疫熒光染色，可先進行免疫熒光染色，染完畢後再進行 dapi 染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行 dapi 染色。
對於貼壁細胞或組織切片，加入少量 dapi 染色液，覆蓋住樣品即可；對於懸浮細胞，至少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液，混勻。
室溫染色 5-10 分鐘。
吸除 dapi 染色液，用 tbst、pbs 或生理鹽水洗滌 2-3 次，每次 3-5 分鐘。
置於熒光顯微鏡下觀察，激發波長 360-400nm。
dapi溶液注意事項：
dapi 被普遍認為具有致癌性，操作時應戴手套，並避免交叉汙染。
dapi溶液需避光，並儘量避免反覆凍融。
熒光染料都存在淬滅問題，建議染色後儘量當天完成檢測。
3樓：匿名使用者
hoechst33258的染色細胞濃度：測試之前製備濃度範圍為10-3-10-6mol / dm3的工作溶液
hoechst 33258是一種熒光染料，當與 dsdna 結合時會發出藍色熒光
hoechst 3325的細胞分析
所有實驗一式三份進行至少三次。計算gi50值，定義為導致細胞生長抑制50％的化合物濃度（μm）
希望以上答案能幫助到你，謝謝採納！！！
4樓：匿名使用者
hoechst 33258的是高純水中的儲備溶液。 在測試之前製備濃度範圍為10-3-10-6mol / dm3的工作溶液
通過mtt測定確定hoechst 33258對測試細胞系的細胞毒性作用
將細胞以2×10 4個細胞/ ml的濃度接種在96微孔平底板中hoechst 33258分子量：424.50以上的方法僅供參考哦！希望能給你帶來幫助哈！！！
hochest33258，hochest33342有何區別
怎樣的細胞染色方法最好
5樓：社南夜春
常用的trypan blue, 可以分辨出死亡細胞。 oil-red-o, 可以染出細胞內的脂肪類物質。其他不常用的也有一些。
hochest 33258
6樓：匿名使用者
雙苯咪唑類的染料,可滲透細胞膜進入細胞內，與dna結合，使之染色
hochest染色和dapi染色有什麼區別
7樓：北京索萊寶科技****
1、每個染料有自己獨特的激發譜線和發射譜線.這也是以上兩個染料的主要區別. 另外hoechest 33258 是膜透性的,因此在活細胞時候能輕鬆進入;dapi是半透性的,有選擇性的進入.
因此hoechest 33258 一般用來染活細胞,可以長驅直入;dapi一般是染固定細胞.
2、兩者都可以用紫外看，參見以下的激發發射波長
hoechst 33258的最大激發波長為346nm，最大發射波長為460nm；hoechst 33258和雙鏈dna結合後，最大激發波長為352nm，最大發射波長為461nm。
dapi的最大激發波長為340nm，最大發射波長為488nm；dapi和雙鏈dna結合後，最大激發波長為364nm，最大發射波長為454nm。
dapi和hoechst染色的區別
8樓：鹽山小夥啊
1、hoechest 33258 是膜透性的,因此在活細胞時候能輕鬆進入;dapi是半透性的,有選擇性的進入.因此hoechest 33258 一般用來染活細胞,可以長驅直入;dapi一般是染固定細胞.
2、兩者都可以用紫外看，參見以下的激發發射波長
hoechst 33258的最大激發波長為346nm，最大發射波長為460nm；hoechst 33258和雙鏈dna結合後，最大激發波長為352nm，最大發射波長為461nm。
dapi的最大激發波長為340nm，最大發射波長為488nm；dapi和雙鏈dna結合後，最大激發波長為364nm，最大發射波長為454nm。
3、dapi 可以穿透細胞膜與細胞核中的雙鏈dna結合而發揮標記的作用，和eb相比，對雙鏈dna的染色靈敏度要高很多倍。顯微鏡下可以看到顯藍色熒光的細胞，熒光顯微鏡觀察細胞標記的效率高(幾乎為100 %) 。dapi染色常用於細胞凋亡檢測，染色後用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。
hoechst 33342、 dapi染料與dna的結合是非嵌入式的，主要結合在dna的a-t鹼基區。紫外光激發時發射明亮的藍色熒光,同時，由於對細胞毒性小，hoechst可以用於幹細胞（spcell)的富集。
9樓：匿名使用者
1、每個染料有自己獨特的激發譜線和發射譜線.這也是以上兩個染料的主要區別.
另外hoechest 33258 是膜透性的,因此在活細胞時候能輕鬆進入;dapi是半透性的,有選擇性的進入.% g& m- q5 n# g5 y) x0 x- h
因此hoechest 33258 一般用來染活細胞,可以長驅直入;dapi一般是染固定細胞./ z: h: {" s, r, s( r
2、兩者都可以用紫外看，參見以下的激發發射波長
hoechst 33258的最大激發波長為346nm，最大發射波長為460nm；hoechst 33258和雙鏈dna結合後，最大激發波長為352nm，最大發射波長為461nm。' j8 i, d. q; y' n, ^' l
dapi的最大激發波長為340nm，最大發射波長為488nm；dapi和雙鏈dna結合後，最大激發波長為364nm，最大發射波長為454nm。
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煲耳機跟新車試發動機一個道理
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12樓：火車恨不
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brdu 和hoechst 33342標記間充質幹細胞的區別
13樓：
1、每個染料有自己獨特的激發譜線和發射譜線.這也是以上兩個染料的主要區別. 另外hoechest 33258 是膜透性的,因此在活細胞時候能輕鬆進入;dapi是半透性的,有選擇性的進入.
因此hoechest 33258 一般用來染活細胞,可以長驅直入;dapi一般是染固定細胞.
2、兩者都可以用紫外看，參見以下的激發發射波長
hoechst 33258的最大激發波長為346nm，最大發射波長為460nm；hoechst 33258和雙鏈dna結合後，最大激發波長為352nm，最大發射波長為461nm。
dapi的最大激發波長為340nm，最大發射波長為488nm；dapi和雙鏈dna結合後，最大激發波長為364nm，最大發射波長為454nm。
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