1樓：不知道不問無悔
1、色譜方法根據分離機制的不同可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠過濾（分子篩）色譜和親和色譜等.2、（1）吸附色譜法是指混合物隨流動相通過吸附劑時,由於該吸附劑對不同物質有不同的吸附力而使混合物分離的方法.（2）分配色譜系法是利用固定相與流動相之間對待分離組分溶解度的差異來實現分離.
（3）離子交換色譜法是利用離子交換原理和液相色譜技術的結合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法.凡在溶液中能夠電離的物質通常都可以用離子交換色譜法進行分離.（4）凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術,是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術,由於裝置簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質有很高的分離效果.
（5）親和色譜法是將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相,利用與固定相不同程度的親和性,使成分與雜質分離的色譜法.
2樓：紫冰雨的季節
色譜有多種，按固定相型別和分離原理可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、親和色譜、大孔吸附樹脂、凝膠色譜、聚焦色譜等。最常用的是吸附色譜分離技術。
吸附色譜法是指混合物隨流動相通過吸附劑（固定相）時，由於吸附劑對不同物質具有不同的吸附力而使混合物中各組分分離的方法。此法特別適用於脂溶性成分的分離。被分離的物質與吸附劑、洗脫劑共同構成吸附層析的三要素，彼此緊密相連
一、凝膠過濾
凝膠過濾又叫分子篩色譜，其原因是凝膠具有網狀結構，小分子物質能進入其內部，而大分子物質卻被排除在外部。當一混合溶液通過凝膠過濾色譜柱時，溶液中的物質就按不同分子量篩分開了。
二、離子交換色譜
離子交換色譜是在以離子交換劑為固定相，液體為流動相的系統中進行的。離子交換劑是由基質、電荷基團和反離子構成的。離子交換劑與水溶液中離子或離子化合物的反應主要以離子交換方式進行，或藉助離子交換劑上電荷基團對溶液中離子或離子化合物的吸附作用進行。
三、吸附色譜
1、 吸附柱色譜
吸附柱色譜是以固體吸附劑為固定相，以有機溶劑或緩衝液為流動相構成柱的一種色譜方法。
2、 薄層色譜
薄層色譜是以塗布於薄板或滌綸片等載體上的基質為固定相，以液體為流動相的一種色譜方法。這種色譜方法是把吸附劑等物質塗布於載體上形成薄層，然後按紙色譜操作進行展層。
3、 聚醯胺薄膜色譜
聚醯胺對極性物質的吸附作用是由於它能和被分離物之間形成氫鍵。這種氫鍵的強弱就決定了被分離物與聚醯胺薄膜之間吸附能力的大小。色譜時，展層劑與被分離物在聚醯胺膜表面競爭形成氫鍵。
因此選擇適當的展層劑使分離在聚醯胺膜表面發生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續過程，就能導致分離物質達到分離目的。
四、 親和色譜
親和色譜是根據生物大分子和配體之間的特異性親和力，將某種配體連線在載體上作為固定相，而對能與配體特異性結合的生物大分子進行分離的一種色譜技術。親和色譜是分離生物大分子最為有效的色譜技術，解析度很高。
親和色譜的原理與眾所周知的抗原一抗體、激素一受體和酶一底物等特異性反應的機理相類似，每對反應物之間都有一定的親和力。正如在酶與底物的反應中，特異的廢物（s''）才能和一定的酶（e）結合，產生複合物（e－s''）一樣。在親和色譜中是特異的配體才能和一定的生命大分子之間具有親和力，併產生複合物。
而親和色譜與酶一底物反應不同的是，前者進行反應時，配體（類似底物）是固相存在；後者進行反應時，底物呈液相存在。實質上親和色譜是把具有識別能力的配體l（對酶的配體可以是類似底物、抑制劑或輔基等）以共價鍵的方式固化到含有活化基團的基質m（如活化瓊脂糖等）上，製成親和吸附劑m－l，或者叫做固相載體。而固化後的配體仍保持束縛特異物質的能力。
因此，當把圍相載體裝人小色譜柱（幾毫升到幾十毫升床體積）後，讓欲分離的樣品液通過該柱。這時樣品中對配體有親和力的物質s就可藉助靜電引力、範德瓦爾力，以及結構互補效應等作用吸附到固相載體上，而無親和力或非特異吸附的物質則被起始緩衝液洗滌出來，並形成了第一個色譜峰。然後，恰當地改變起始緩衝 液的ph值、或增加離子強度、或加人抑③劑等因子，即可把物質s從固相載體上解離下來，並形成了第m個色譜峰（見圖6－2）。
顯然，通過這一操作程式就可把有效成分與雜質滿意地分離開。如果樣品液中存在兩個以上的物質與固相載體具有親和力（其大小有差異）時，採用選擇性緩衝液進行洗脫，也可以將它們分離開。用過的固相載體經再生處理後，可以重複使用。
上面介紹的親和色譜法也是特異性配體親和色譜法。另外還有通用性配體親和色譜法。這兩種親和色譜法相比，前者的配體一般為複雜的生命大分子物質（如抗體、受體和酶的類似底物等），它具有較強的吸附選擇性和較大的結合力。
而後者的配體則一般為簡單的小分子物質（如金屬、染料，以及氨基酸等），它成本低廉、具有較高的吸附容量，通過改善吸附和脫附條件可提高色譜的解析度。
五、聚焦色譜
聚焦色譜也是一種柱色譜。因此，它和另外的色譜一樣，照例具有流動相，其流動相為 多緩衝劑，固定相為多緩衝交換劑。
聚焦色譜原理可以嘗試從ph梯度溶液的形成、蛋白質的行為和聚焦效應三方面來闡述。
1、ph梯度溶液的形成
在離子交換色譜中，ph梯度溶液的形成是靠梯度混合儀實現的。例如，當使用陰離子 劑進行色譜時，製備ph由高到低呈線性變化的梯度溶液的方法是，在梯度儀的混合室（這色譜柱者）中裝高ph溶液，而在另一室裝低ph極限溶液，然後開啟色譜柱的下端出口，讓洗脫液連續不斷地流過柱體。這時從柱的上部到下部溶液的ph值是由高到低變化的。
而在聚焦色譜中，當洗脫液流進多緩衝交換劑時，由於交換劑帶具有緩衝能力的電荷基團，故ph梯度溶液可以自動形成。
2．蛋白質的行為
蛋白質所帶電荷取決於它的等電點（pi）和色譜柱中的ph值。當柱中的ph低於蛋白質的pi時，蛋白質帶正電荷，且不與陰離於交換劑結合。而隨著洗脫劑向前移動，固定相中的ph值是隨著淋洗時間延長而變化的。
當蛋白質移動至環境ph高於其pi時，蛋白質由帶正電行變為帶負電荷，並與陰離子交換劑結合。由於洗脫劑的通過，蛋白質周圍的環境ph 再次低於pi時，它又帶正電荷，並從交換劑解吸下來。隨著洗脫液向柱底的遷移，上述過程將反覆進行，於是各種蛋白質就在各自的等電點被洗下來，從而達到了分離的目的。
不同蛋白質具有不同的等電點，它們在被離子交換劑結合以前，移動之距離是不同的，洗脫出來的先後次序是按等電點排列的。
分離純化微生物的方法有哪些？各方法適用分離什麼菌種？
3樓：花花
主要有1.劃線法
2.倒平板法
3.塗布法
稀釋混合倒平板法、稀釋塗布平板法、平板劃線分離法、稀釋搖管法、液體培養基分離法、單細胞分離法、選擇培養分離法等。其中前三種方法最為常用,不需要特殊的儀器裝置, 分離純化效果好。
從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學的研究及應用中，不僅需要通過分離
從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學的研究及應用中，不僅需要通過分離純化技術從混雜的天然微生物群中分離出特定的微生物，而且還必須隨時注意保持微生物純培養物的「純潔」，防止其他微生物的混入。
1、用固體培養基分離和純化
單個微生物在適宜的固體培養基表面或內部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態結構的子細胞生長群體，稱為菌落。當固體培養基表面眾多菌落連成一片時，便成為菌苔。不同微生物在特定培養基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩定的特徵，可以成為對該微生物進行分類、鑑定的重要依據。
大多數細菌、酵母菌、以及許多真菌和單細胞藻類能在固體培養基上形成孤立的菌落，採用適宜的平板分離法很容易得到純培養。所謂平板，即培養平板的簡稱，它是指固體培養基倒入無菌平皿，冷卻凝固後，盛固體培養基的平皿。這方法包括將單個微生物分離和固定在固體培養基表面或裡面。
固體培養基用瓊脂或其它凝膠物質固化的培養基，每個孤立的活微生物體生長、繁殖形成菌落，形成的菌落便於移植。最常用的分離、培養微生物的固體培養基是瓊脂固體培養基平板。這種由kock建立的採用平板分離微生物純培養的技術簡便易行，100多年來一直是各種菌種分離的最常用手段。
1.1 稀釋倒平板法
首先把微生物懸液作一系列的稀釋（如1:10、1:100、1:
1000、1:10000），然後分別取不同稀釋液少許，與已熔化並冷卻至50℃左右的瓊脂培養基混合，搖勻後，傾入滅過菌的培養皿中，待瓊脂凝固後，製成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養一定時間即可出現菌落。如果稀釋得當，在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落，這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。
隨後挑取該單個菌落，或重複以上運算元次，便可得到純培養。
1.2 塗布平板法
因為將微生物懸液先加到較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，且採用稀釋倒平板法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長，因此在微生物學研究中常用的純種分離方法是塗布平板法。其做法是先將已熔化的培養基倒入無菌平皿，製成無菌平板，冷卻凝固後，將一定量的微生物懸液滴加在平板表面，再用無菌玻璃塗棒將菌液均勻分散至整個平板表面，經培養後挑取單個菌落。
圖1 塗布平板法
1.3 平板劃線法
最簡單的分離微生物的方法是平板劃線法，即用接種環以無菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行連續劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，並逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養後，可在平板表面得到單菌落。有時這種單菌落並非都由單個細胞繁殖而來的，故必須反覆分離多次才可得到純種。其原理是將微生物樣品在固體培養基表面多次作「由點到線」稀釋而達到分離目的的。
劃線的方法很多，常見的比較容易出現單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法、四格法等。
提高氣相色譜分離度的方法有哪些,在氣相色譜法中如何提高分離度
1.增加柱長可bai以增加分離度。2.減少進du樣量 zhi固體樣品加大溶劑dao量 3.提高進樣專 技術防止屬造成兩次進樣。4.降低載氣流速。5.降低色譜柱溫度。6.提高汽化室溫度。7.減少系統的死體積,如色譜柱連線要插到位,不分流進樣要選擇不分流結構汽化室。8.毛細管色譜柱要分流,選擇合適的分流...
請教有關微生物分離與純化的問題，有關土壤中微生物分離與純化實驗的問題 菜鳥問，勿嘲笑
用劃線培養的方法，用挑針沾有含有要分離的菌株的培養液，在培養皿上劃線，到入培養基培養，張成菌落後再用上述方法分離一次，直到菌落單一，就行了，這是微生物學裡的內容，建議找課本和試驗指導看看 這個應該是高中的知識 具體的操作不記得了 你去看看 高中教材 劃線分離 或者 逐步稀釋分離 其實意思都差不多 一...
對氣相色譜柱分離度影響最大的因素是
1 色譜長度和填料的性質，色譜柱越長，組分之間分辯效果越好，但色譜柱越長壓降越大，而輸入的壓力是有限的。色譜柱過長會增大進出口壓力比，相反會降低分離度。2 色譜柱填料顆粒大小也是主要因素，粒子越細，由於表面積增加，分辯效果越好，但是顆粒細會增大柱壓降，也會起反作用。3 柱溫對分辯效果也有很大影響，因...