1樓：匿名使用者
核酸包括dna、rna兩種分子，在細胞中都是以與蛋白質結合的狀態存在。真核生物的染色體dna為雙鏈線性分子，原核生物的「染色體」、質粒及真核細胞器dna為雙鏈環狀分子；有些嗜菌體dna有時為單鏈環狀分子，rna分子在大多數生物體內均是單鏈線性分子，不同型別的rna分子可以具有不同的結構特點，如真核mrna分子多數在3』端帶有poly(a)結構，至於病毒的dna、rna分子，其存在形式多種多樣，有雙鏈環狀、單鏈環狀、雙鏈線狀及單鏈線狀等。
95%的真核生物dna主要存在於細胞核內，其它5%為細胞器dna，如線粒體、葉綠體等。rna分子則主要存在於細胞質中，約佔75%，另有10%在細胞核內，15%在細胞器中，rna以rrna的數量最多（80％-85%），trna及核內小分子rna佔10%-15%，而mrna分子大小不一，序列各異。總的來說，dna分子的總長度一般隨著生物的進化程度而增大，而rna的分子量與生物進化無明顯關係。
分離純化核酸總的原則：
1.應保證核酸一級結構的完整性；2.排除其它分子的汙染。
為了保證核酸結構與功能的研究，完整的一級結構是最基本的要求，因為遺傳資訊全部貯存在一級結構之中，核酸的一級結構還決定其高階結構的形式以及和其它生物大分子結合的方式。對於核酸的純化應達到以下三點要求：
1.核酸樣品中不存在對酶有抑制作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；
2. 其它生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的汙染應降到最低程度；
3. 排除其它核酸分子的汙染，如提取dna分子時應去除rna，反之亦然.
為了保證分離核酸的完整性和純度，在實驗過程中，應注意以下事項:
1. 儘量簡化操作步驟，縮短提取過程，以減少各種有害因素對核酸的破壞；
2.減少化學因素對核酸的降解，為避免過酸、過鹼對核酸鏈中磷酸二酯鍵的破壞，操作多在ph4-10的條件下進行;
3.減少物理因素對核酸的降解，物理降解因素主要是機械剪下力，其次是高溫。機械剪下力包括強力高速的溶液振盪、攪拌，使溶液快速地通過狹長的孔道，細胞突然置於低滲液中，細胞**式破裂以及dna樣本的反覆凍貯。
這些操作細節在實驗操作中應倍加註意。機械剪下作用的主要危害物件是大分子量的線性dna分子，如真核細胞的染色體dna。對分子量小的環狀dna分子，如質粒dna及rna分子，威脅相對小些。
高溫如長時間煮沸，除水沸騰帶來的剪下力外，高溫本身對核酸分子中的有些化學鍵也有破壞作用。核酸提取過程中，一般在低溫操作，但現在發現在室溫快速提取與低溫提取，獲得核酸的質量沒有太大差異.
4.防止核酸的生物降解，細胞內或外來的各種核酸酶消化核酸鏈中的磷酸二酯鍵，直接破壞核酸的一級結構，其中dna酶，需要金屬二價離子mg2 、ca2 的啟用，使用edta、檸檬酸鹽螯合金屬二價離子，基本可以抑制dna酶活性。而rna酶不但分佈廣泛，極易汙染樣品，而且耐高溫、耐酸、耐鹼、不易失活，所以是生物降解rna提取過程的主要危害因素.
核酸提取的主要步驟，無外乎破碎細胞，去除與核酸結合的蛋白質以及多糖、脂類等生物大分子，去除其它不需要的核酸分子，沉澱核酸，去除鹽類，有機溶劑等雜質，純化核酸等。核酸提取的方案，應根據具體生物材料和待提取的核酸分子的特點而定，對於某特定細胞器中富集的核酸分子，事先提取該細胞器，然後提取目的核酸分子的方案，可獲得完整性和純度兩方面質量均高的核酸分子。
2樓：匿名使用者
核酸包括dna、 rna兩種分子， 在細胞中都是以與蛋白質結合的狀態存在。 真核生物的染色體dna為雙鏈線性分子， 原核生物的「染色體」、 質粒及真核細胞器dna為雙鏈環狀分子； 有些嗜菌體dna有時為單鏈環狀分子， rna分子在大多數生物體內均是單鏈線性分子， 不同型別的rna分子可以具有不同的結構特點， 如真核mrna分子多數在3』端帶有poly(a)結構， 至於病毒的dna、 rna分子， 其存在形式多種多樣，有雙鏈環狀、 單鏈環狀、 雙鏈線狀及單鏈線狀等。
>生物幫上面有詳細介紹。
簡述核酸分離的基本 原理?
3樓：浦恐
通過機械磨碎細胞或加入表面活性劑裂解細胞使內容物提取出來，再加入蛋白變性劑變性沉澱蛋白質。最後靠核酸在醇溶液中溶解度下降的特點提取純的核酸。
臨床分子生物學檢驗
4樓：楊風遊
核酸分離與純化
核酸分離提取的原則
1、選擇原則，一是保證提取核酸一級結構的完整性，二是儘量排除其他分子的汙染
2、保持核酸結構的完整性，應儘量減少破壞核酸的有害因素，儘量簡化操作步驟。
技術路線的設計
1、核酸的釋放，有物理法和化學法，化學法又分為溶胞法（應用最多最廣泛）與乾燥法
2、核酸的分離純化，須去除三方面的雜質：非核酸大分子物質，不需要的核酸分子，分離純化過程中新加入的有機溶劑和金屬離子等。
3、核酸的濃縮、沉澱和洗滌
濃縮：若溶液中dna含量低且容積較大，不易進行乙醇沉澱時，可用固體聚乙二醇吸水濃縮法或丁醇抽提濃縮法濃縮dna。
沉澱與洗滌：有機溶液沉澱核酸主要是利用核酸可與納鉀等陽離子形成鹽，遮蔽了帶負電的磷酸基團，使核酸分子聚集在一起而不溶於有機溶劑；鹽類可使核酸沉澱，但往往含有少量共沉澱的鹽，此時可經70-75%的乙醇洗滌而除去。
核酸的鑑定
首先是含量的鑑定
1、紫外分光光度法：核酸分子中的鹼基對波長260nm的紫外光有強烈吸收作用（最大吸收峰），1微克dna鈉鹽的吸光度之為0.02，也就是a260=1時雙鏈dna含量為50μg/ml，單鏈dna/rna含量為40μg/ml，單鏈寡核苷酸的含量為33μg/ml。
適用於濃度大於0.25μg/ml的核酸溶液。
2、熒光光度法，以熒光染料嵌入鹼基平面，則核酸在紫外線的激發下發出熒光，且熒光強度積分與核酸含量成正比，有三個特點：靈敏度高；受rna，ssdna和其他物質的干擾小；對分子生物學中的常用酶無抑制作用。
其次是純度鑑定
1、紫外分光光度法：最常用，核酸在260nm處有最大吸收峰，蛋白質則在280nm處；鹽和小分子在230nm處，酚在270nm處，這個差別可區分到底是什麼汙染；
純dna的a260/a280=1.8，若高出說明rna汙染，若低於則說明殘餘蛋白質；
a260/a280=2.0為高質量rna的標誌（1.8-2.1都可以） a230/a260=0.4-0.5，若升高則說明有殘餘鹽。
2、熒光光度法
利用熒光染料溴化乙錠嵌入鹼基平面後，核酸在紫外線的激發下發出橙紅色熒光，作為熒光染料示蹤。可鑑定dna製品有無rna干擾，反之亦可。
rna變性電泳後有特徵性的三條帶，原核生物為23s、16s、5s的rrna條帶，真核生物則由28s、18s的rrna和5s、5.8s的rrna和trna；（mrna代表基因轉錄水平，行使模版功能）
還有完整鑑定性：
以溴化乙錠為示蹤染料的核酸瓊脂糖凝膠電泳結果可用於判斷核酸完整性
1、完整無降解或降解很少的總rna電泳圖，除具特徵性三條帶外，三條帶的熒光強度應為一特定比值
2、降解係數大的核酸條帶相對分子質量大，電泳遷移率低，溴化乙錠嵌入核酸中的數量也增多，熒光強度高；反之~
3、一般28s或23srna的熒光強度約為18s或16s的2倍，否則提示有rna降解，若在加樣槽附近有條帶，則dna有汙染。
儲存：dna：原則是減少dna脫氨基，抑制dna酶、減少dna分子的各種反應、避免微生物汙染
一般將dna儲存於ph8.0的te緩衝溶液中，可減少dna脫氨/抑制dna酶，加少量氯仿可抑制細菌汙染；在零下70度可儲存5年+
rna：主要是抑制rna酶
以焦炭酸二乙酯水溶解rna，或在rna溶液中加入rnasin（rna酶阻抑蛋白）等rna酶抑制劑，可延長儲存時間；另外將rna以沉澱形式儲存於70%乙醇溶液或去離子甲醯胺溶液中，可於零下20度長期儲存。
核酸在細胞中的分佈實驗選取實驗材料的原則是什麼
5樓：馮秀花乾碧
觀察dna和rna在細胞中的分佈應該選擇的實驗材料應符合：
1、符合實驗要求；
2、易獲取的原則；
3、不對實驗結果產生干擾，如果顏色過深會覆蓋原有細胞的顏色，觀察不到實驗效果。
核酸標準品 直接用提取的dna可以嗎
6樓：南京金益柏生物科技****
提取dna總的原則
1.保證核酸一級結構的完整性；
2.核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；
3.其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的汙染應降低到最低程度；
4.其他核酸分子，如rna，也應儘量去除。
什麼是限制性核酸內切酶，它們是怎樣命名的？
7樓：御阪638號
我只知道dna限制性內切酶,一種限制酶只能切一種特定的核苷酸序列.就是將dna分子切斷,命名不知道
蛋白質化學結構測定的基本原則是什麼?
交友的原則是什麼,交朋友的原則是什麼
簡單 以誠待人 你想別人怎麼對你,你必須首先怎麼對別人 交朋友的原則是什麼?做人要講原則,交朋友亦是如此。每個人都有缺點和不足,但如果連最基本的誠實守信都做不到,其他就無從談起。在交友中,第一條原則就是誠實守信。言必信,行必果,與誠實的人打交道,我們有安全感,所以,我們在很小的時候,父母就教導我們說...
交朋友的原則是什麼交友的原則是什麼
做人要講原則，交朋友亦是如此。每個人都有缺點和不足，但如果連最基本的誠實守信都做不到，其他就無從談起。在交友中，第一條原則就是誠實守信。言必信，行必果，與誠實的人打交道，我們有安全感，所以，我們在很小的時候，父母就教導我們說老實話 辦老實事 做老實人，這句話在社會交往中可以靈活一些，但對朋友不能虛情...
試簡述材料選擇的原則是什麼應考慮的因素有哪些內容
一來.材料的使用效能 二.材料的工自 藝效能三.材料的經濟效能 一.材料的使用效能 選材的最主要依據 指的是零件在使用時所應具備的材料效能，包括機械效能 物理效能和化學效能。對大多數零件而言，機械效能是主要的必能指標，表徵機械效能的引數主要有強度極限 b 彈性極限 e 屈服強度 s或 0.2 伸長率...