請問 培養基倒平板後應注意哪些才能劃線分離? 20

2025-01-23 14:30:06 字數 1246 閱讀 5638

請問:培養基倒平板後應注意哪些才能劃線分離?

1樓:北京索萊寶科技****

平板劃線法分離菌種實驗步驟。

1、融化培養基。

將裝有伊紅美藍瓊脂培養基的三角瓶放入熱水浴中加熱至沸,直至充分融化。

2、倒平板。

待培養基冷卻至50℃左右後,按無菌操作法倒平板(每皿約倒15ml),平置,待凝。

操作方法:右手持盛培養基的三角瓶置火焰旁邊,用右手手掌和小指將瓶塞輕輕地撥出,瓶口保持對著火焰;然後左手拿培養皿並將皿蓋在火焰附近開啟一條稍大於瓶口的縫隙,迅速倒入培養基約15ml,加蓋後輕輕搖動培養皿,使培養基均勻分佈在培養皿底部,然後平置於桌面上,待凝後即為平板。

3、作分割槽標誌(操作熟練後此步驟可省略) 在皿底用記號劃分成4個不同面積的區域,使a<>

4、劃線操作。

1)挑取菌樣:選用平整、圓滑的接種環,按無菌操作法挑取少量含菌試樣。

2)先劃a區:將平板倒置於酒精燈火焰旁,用左手取出平板的皿底,使平板表面大致垂直於桌面,並讓平板面向火焰。右手持含菌的接種環,先在a區輕巧地劃3~4條連續的平行線當作初步稀釋的菌源。

燒去接種環上的殘餘菌樣。

3)劃其餘區:將燒去殘菌後的接種環在平板培養基邊緣冷卻一下,並使b區轉至劃線位置,把接種環通過a區(菌源區)而移至b區,隨即在b區輕巧地劃上6~7條緻密的平行線,接著再以同樣的操作在c區和d區劃上更多的平行線,並使d區的線條與a區平行(但不能與a區或b區的線條接觸!),最後,將左手所持皿底放回皿蓋中。

燒去接種環上的殘菌。

5、恆溫培養。

將劃線後的平板至37℃倒置培養2~3天。

6、挑單菌落。

良好的結果應在c區出現部分單菌落,而在d區出現較多獨立分佈的單菌落。然後從典型的單菌落中挑取少量菌體至試管斜面,經培養後即為初步分離的純種。

7、清洗培養皿。

將廢棄的帶菌平板作煮沸殺菌後進行清洗、晾乾。

2樓:網友

可以將平板放到培養箱或者烘箱裡,溫度調到35~40 (不能培養菌) 比較容易幹。 注意 不要放得太久 容易將培養基放幹。 還有,倒平板前要將平板烘乾,倒好後要方成一排,除了第一層容易產生水蒸氣的冷凝水。

但是要注意放平要。

3樓:網友

新制成的平皿培養基(以下簡稱平皿),表面水分較多,不利於細菌的分離,通常應將平皿倒扣置於37℃培養箱內30分鐘,待平皿表面乾燥後使用。或開蓋放在百級淨化工作臺中,直至培養基表面的水滴消失為止。注意不要過度乾燥。

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