1樓:
過柱子要具體問題具體分析。你提供的資訊太少了。tlc上有幾個點,你確定的rf是多少,柱子的大小,分離物質的量。
目前的極性過大了。減小極性,比如ea:pe=1:
1-1:2(找用tlc趴一下,我只是估計值),將第2點壓制到rf=之間巖運清,用該極性洗脫劑過柱。可以保證1,2,3點完全分開。
或者將第2點趴到rf=,然後將極性減小一倍。該極性和前面方法得到的差不多大。
柱子大小和樣品量還可以。先將樣品上柱,幹法最好,若用溼法上樣則先用石油醚衝下50ml,再改用洗脫劑淋洗。淋洗液的極性從第2點rf=時候的極粗前開始性,當出現第一點時,逐漸放大淋洗液的極性,到出現第2點時,繼續放大到rf=時候的極性。
其間具體放大多少,視第1點和第3點的rf而定,與距離第2點的遠近悄公升有關。
2樓:多多麥
啊,你是要寫作業還是要真的過柱呀?過柱每個人的經如陪驗都不一樣的,一樣都過得很好的。
首先,你要確定好洗脫畢腔劑體系和極性。你給的資訊看,極性真的很大呀。你確定是用石油醚乙酸乙酯體系麼?
在你的渣數蠢體系和極性下,你的板3個點距離怎樣,你要看三個點分得開不開呀,只看乙個點的rf值是遠遠不夠的。
用矽膠的目數,裝多高都和點分得開不開有關,尤其你還是要中間的乙個點。
樣品,柱子的大小還是合適的。通常裝好柱子先用最小極性的組分也就是石油醚衝一下。後面的梯度沒有那麼絕對的。多過幾個柱子瞭解了。不動手永遠不知道。
怎樣結束akta梯度洗脫程式
3樓:為水情狂
2)三分離柱設計,雙六通閥設計,配套自動收集器;採用三個螺旋柱串聯連線,在高速轉動時保持平衡,穩定,噪音小;
3)增設了一體褲棚碧化設計的溫控模組,可精確控制分離的溫度,有效提高實驗的應用範圍和重複性,拓寬溶劑體系的選擇範圍,有助於摸索最佳的實驗條件;
4)對於對環境溫度有嚴格要求的活性成分分離,更能發揮高速逆流色譜的優勢;
5)快速,操作簡便,系統平衡不受溶劑體系改變的影響,工作穩定性高;
6)無不可逆胡舉吸附,**和中率高。
請教各位關於多羥基產品過柱子純化的問題
4樓:網友
多羧基的過柱是要加冰醋酸的,至於過柱體系的配比得你自己多爬爬板子來確定,加三乙胺的是用於過含有氨基的化合物的!
可以試試氧化鋁,因為它是中性的,不容易與羥基結合。
液相梯度洗脫設定問題
5樓:注音臺
設定多出來的分鐘是轉換流動相比例,其實分鐘是不夠的。
過離子交換柱時,ph梯度洗脫緩衝液一般用什麼緩衝液
6樓:千勝學院
如果不限定純化方法,可以考慮親和層析或離子交換,但根據你問題的意思,是選定離子交換。
此時就要考慮你蛋白的等電點了,如果等電點在你穩定ph之上,就用陽離子交換柱:
設計陽離子交換層析:將你的樣品置換到你所指的穩定ph的running buffer。同時裝柱,平衡,然後上樣,平衡,洗脫(因為你的ph不穩定,建議鹽洗脫),收峰。得你的蛋白;
如果你的等電點在穩定ph之下,就用陰離子交換柱,其步驟如上,只是改變柱子型別。
在高效液相色譜中梯度洗脫裝置的作用是什麼
7樓:網友
梯度洗脫裝置分兩種:
高壓梯度:用兩臺高壓輸液幫浦將兩種溶劑輸入。
低壓梯度:在常壓下將兩種溶劑(或多元溶劑)混合,然後用高壓輸液幫浦將流動相輸入到色譜柱中。
梯度洗脫可提高分離度、縮短分離時間、降低最小檢測量和提高分離精度。
但在使用中,梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。
梯度洗脫時應注意:
1、注意各溶劑間的互溶性。
2、對溶劑的純度要求更高(影響重現性)。
3、注意梯度變化時系統壓力的變化,防止超出限度。
4、梯度結束後,用初始流動相沖洗,使柱子平衡一段時間(再生),使系統回覆到初始狀態。(梯度週期)
5、低壓梯度要注意脫氣,混合後容易產生氣泡。
6、容易出現鬼峰,應作空白試驗。
7、梯度選擇時儘量幾相之間相變化要小,否則不易平衡。
8、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的選擇性檢測器(如紫外吸收檢測器或螢光檢測器),而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器(如示差折光檢測器)。
9、要注意水相中鹽的濃度,防止在有機相提公升過程中鹽的析出。
化合物的極性,洗脫劑的極性如何影響洗脫順序
8樓:布樂正
利用化合物在兩種互不相溶(或微溶)的溶劑中溶解度或分配係數的不同,使化合物從一種溶劑內轉移到另外一種溶劑中。經過反覆多次萃取,將絕大部分的化合物提取出來。
先用非極性溶劑洗,一般使用石油醚,實驗室合成的產物都是極性比較大的,所以洗不出來,在產物中的大分子類似於色素的東西也不會出來。
然後逐漸增大極性,如ch2cl2+石油醚,洗一會,然後換成純二氯甲烷,三氯甲烷等等。一般實驗室過柱子使用的最大極性的流動相是甲醇,一般這個還洗不出來那就不是產物而是大分子色素了,沒有實際意義。當然如果是做高聚物的就不是這個順序了。
劑的選擇條件:
對的所需成分有良好的溶解性;
可使成分間分開;
待測組分的rf在之間,定量測定在之間;
不與待測組分或吸附劑發生化學反應;
沸點適中,黏度較小;
後組分斑點圓且集中;⑦混合溶劑最好用新鮮配製。
9樓:
不是有種說法叫做相似相溶麼,極性物質能溶於極性溶劑,因此用極性大的溶劑洗脫極性大的物質先被洗脫出來,非極性物質留在柱子裡用,同理極性小或非極性溶劑洗脫則非極性物質先被洗脫出來。不過很多時候都是用的混合溶劑來調節極性,可以讓幾種物質同時走的。
10樓:網友
一般先爬板確定洗脫劑比例,再過柱子確定洗脫順序。
11樓:網友
哈哈,近十年沒整這些了,以為忘了,結果還是能回憶一些。
過離子交換柱時,pH梯度洗脫緩衝液一般用什麼緩衝液
呵呵,剛才加了akta的培訓,就獻醜了。離子交換色譜中,ph的影響極大。要知道為何能夠利用ph梯度改善分離選擇性?就得知道其原理 離子色譜是利用相反電荷之間的相互作用來分離的,當檢測物質帶負電荷時,要選擇陰離子色譜柱,陰離子色譜柱帶正電荷的配基,進行陰離子 陽離子交換,結合帶負電荷的分子,經過交換後...
高等數學,關於等值線的梯度這個知識點,說梯度方向和法向量方向
這個可以嚴格證明的,梯度方向是函式值增加的方向。為什麼梯度的方向是等值面法線方向 簡單來說,梯度方向是函式增長最快的方向,很顯然增長最快的方向是過該點的等量面的法線方向,所以,函式在一點的梯度方向是這點的法線方向 所謂梯度的方向,是函式值增大最快的方向,從一條等值線到下一條等值線,斜著走是不是需要走...
關於燕子的問題,關於養燕子的問題(養過燕子的高手請進)
針對性回答 一般家燕是不是南方北方兩個窩啊?在我國分佈的家燕在南方只是越冬地,在那裡是不繁殖後代的,只是在北方築巢 秋天燕子南飛是到 秋天家燕會結群飛越海洋,去南半球越冬,但是也有少部分家燕會留在海南島和臺灣等地 一對燕子到了壽命掛掉了它的窩是不是就廢了?其實燕子每年在遷徙途中的死亡率是很高的,尤其...