1樓：璩楚扈鴻振
hplc所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響幫浦的工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測襲模敬器的靈敏度、基線穩定性，甚至使無法檢測。
雜訊增大，基線不穩，突然跳動。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。溶解氣體還會引起溶劑ph的變化，對分離或分析結果帶來誤差。
常用的脫氣方法有：加熱煮沸、抽真空、超聲、吹氦等。
高效液相色譜是色譜法的乙個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相幫浦入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。
擴充套件資料：液相色譜和質譜連線，可以增加額外的分析能力，能夠準確鑑定和定量像細胞和組織裂解液，血液，血漿，尿液和口腔液等複雜樣品基碼鄭質中的微量化合物。
流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有乙個明顯的分介面。當試樣進入色譜柱，溶質在兩相間進行分配。
達到平衡時，服從於高效液相色譜計算公式。
式中，cs—溶質在固定相中濃度；cm—溶質在流動相中的濃度；
vs—固定相的體積；vm—流動相的體積。llpc與gpc有相似之處，即分離的順序取決於k，k大的組拍慎分保留值大；但也有不同之處，gpc中，流動相對k影響不大，llpc流動相對k影響較大。
液相流動相如何脫氣？
2樓：手機使用者
流動相溶液往往因溶解有氧氣或混入了空氣影響液相色譜的操作效能，在幫浦中產生氣泡使流速不穩，氣泡大時會在幫浦頭形成空穴。氣泡進入檢測器後會在色譜圖上出現尖銳的噪音峰，降低響應甚至導致訊號消失。流動相中的氧對光電檢測器影響最大，使紫外檢測器基線增高，低波長檢測時訊號被抵消。
在螢光檢測中，溶解氧還會使螢光淬滅。溶解氣體還可能引起某些樣品的氧化或使溶液ph值發生變化。二、流動相脫氣的方法液相色譜流動相脫氣使用較多的方法大概有四種：
氦氣脫氣、真空脫氣、超聲波脫氣、加熱脫氣。
1.氦氣脫氣：氦氣脫氣是很有效的脫氣方法。
氦氣緩緩的通過流動相趕去溶入的空氣，如果使用得當，在10min內可除去80%～90%的溶入氣體。由於氦氣在流動相中的溶解度極低，所以用氦氣脫氣保護的流動相可以認為是乙個無氣體溶解體系。我們單位waters液相色譜就是使用氦氣脫氣，效果很好。
其缺點是氦氣**比較昂貴，會增加檢驗成本。
2.真空脫氣：也是比較常用的脫氣方法。
貯液器被抽成部分真空，溶入的氣體蒸發形成氣泡溢位，其效果僅次於氦氣脫氣。我們單位agileng1200液相色譜使用的是**脫氣機。其缺點是需要配備抽氣幫浦或脫氣機，增加儀器投資。
3.超聲波脫氣：將配製好的流動相連容器放入超聲水槽中脫氣10-20min。
這種方法比較簡便，又基本上能滿足日常分析操作的要求，所以，目前仍廣泛採用。這種方法只能除去30%的溶解氣體，有時還會引起氣體溶解度的增加。對氧敏感的檢測器不宜用此法。
4.加熱迴流脫氣：該方法雖然效果很好，但是適用範圍較窄。對於有機溶劑或混合流動相不適合用此法，因為揮發性組分會損失掉，改變流動相的組成。
三、注意事項現在液相色譜大多都是多元系統，可以同時輸送幾種不同的流動相。但需要注意的是，有些流動相不同組分混合時會有氣體產生，對於這種流動相應改系統內混合為系統外預混合。測定三聚氰胺使用乙腈和辛烷磺酸鈉作為流動相，我們乙個檢驗員當時就是分別脫氣後將流動相放在兩個瓶子裡，結果基線波動很大，一直不能平穩；後來採用預先混合脫氣的方式問題就解決了。
液相色譜使用前為什麼要過濾和脫氣？
3樓：千葉雅之
一般流動相在上儀器前必須經過兩個步驟：減壓抽濾和超聲減壓抽濾有兩個目的，乙個是過濾掉氣體，尤其是有機相和水相混合的時候，會產生大量的氣泡。這些氣泡進入儀器就會堵住儀器和色譜柱，所以要除掉。
乙個是過濾掉不溶性微粒。你看一般的過濾膜是孔徑的，這個是針對你的色譜柱而定的。色譜柱一般是5um的粒徑，保證過濾的流動相里面小的毛絮啊，顆粒啊都不會進入色譜柱。
超聲的主要目的也是為了脫氣，另外還有助溶和令溶液混合均勻等作用。不過超聲主要是為了去掉溶劑瓶瓶壁和瓶底的氣泡，所以沒必要超聲太久的時間，3-5min足夠了。
總而言之，都是為了保護儀器和色譜柱，防止氣泡和雜質進入。
高效液相色譜儀流動相脫氣方法有哪些？
4樓：匿名使用者
一、脫氣的必要性。
流動相脫氣是hplc系統能得到可靠資料的乙個很有效的措施。hplc幫浦在輸送液體時要產生很大的力量，由於氣體的壓縮比與液體相比大的多，因而當氣泡存在時，我們發現瞬間的流速降低和系統壓力下降，如果這個氣泡足夠大，液相幫浦將不能輸送任何溶劑，而且如果壓力低於預先設定的壓力低限，幫浦將停止工作。當乙個氣泡通過輸液幫浦時，由於系統壓力大，氣泡通常會溶解在流動相溶液中，隨流動相通過柱子，但是到達檢測器流通池時，系統壓力又恢復到了大氣壓，因而氣泡可能在檢測器流通池中又顯現出來，在色譜圖上會出現不規律的毛刺。
因此，為了保證高效液相色譜結果的準確性，脫氣是乙個相當重要的環節。
二、脫氣方法。
1.吹氦脫氣法。
利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性，在壓力下，以約60ml/min流速通入流動相儲液容器中10～15min，可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣，能排除接近80%的氧氣。採用乙個高效分散式噴射流裝置，一體積的氦氣可從流動相中將等體積的幾乎全部氣體排除。這意味著1l氦氣通過1l流動相就可完成排氣這個工作。
這種脫氣方法雖然好，但氦氣**較高，很少使用。
2.加熱迴流法。
此法的脫氣效果較好。在操作時要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會丟失，混合流動相的比例會有變化。
3.抽真空脫氣法。
此法可使用真空幫浦，降壓至，即可除去溶解的氣體。但是由於真空脫氣會使混合溶劑組成發生變化，從而影響到實驗的重現性，因此多用於單溶劑體系的簡單分析。
4.超聲波脫氣法。
將欲脫氣的流動相置於超聲波清洗器中，用超聲波**10～20min。此法的脫氣效果最差。
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