1樓：千葉雅之
一般來說反相色譜中提高甲醇或者乙腈等有機相比例之後，樣品的保留時間會縮短，出峰會提前。
如果將流動項中甲醇的比例提高,對測樣品的保留時間有何影響?
2樓：匿名使用者
看你是用哪幾相來做的分析呀。如果你只用甲醇和水相的話，提高甲醇的量，會使洗脫能力提高，樣品保留時間應該整體前移。
高效液相色譜法流動相配比的改變
3樓：密碼是
不知道你做的是不是中藥成分。甲醇和冰醋酸的話，隨著甲醇比例的提高，保留時間會提前，隨著冰醋酸的比例提高，保留時間會滯後。而分離效果來說隨著保留時間滯後，圖形一般情況下都會出現，峰與峰之間的距離變大的現象，這有利於分離，但是缺點是保留時間變長。
試過改變流動相配比後峰形還是不好的話，建議你改變冰醋酸的含量。
4樓：微笑炒麵
極性流動相的增加會使出峰時間提早，分離效果的話要看你分離的是什麼啦，兩峰之間的時間也會縮短的，要是太靠近的話，分離效果肯定是不好的
高效液相色譜法流動相如何設定比例
5樓：匿名使用者
1、流動相對樣品具有一定
的溶解能力，保證樣品組分不會沉澱在柱中(或長時間保留在柱中)。
2、流動相與樣品不產生化學反應。
3、流動相的黏度要儘量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。
4、流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用uv檢測器，最好使用對紫外吸收較低的溶劑配製。
5、流動相沸點不要太低，否則容易產生氣泡，導致實驗無法進行。
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點：
（1）流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉澱在柱中(或長時間保留在柱中)。
（2）流動相與樣品不產生化學反應
（3）流動相的黏度要儘量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。
（4）流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用uv檢測器，最好使用對紫外吸收較低的溶劑配製。
（5）流動相沸點不要太低，否則容易產生氣泡，導致實驗無法進行。
（6）在流動相配製好後，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利於檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發生作用
6樓：匿名使用者
與樣品有關係啊，就是讓流動相讓樣品有一個合適的分離度
7樓：匿名使用者
流動相的比例與柱子的效能、你所需要的保留時間以及樣品的區分度有關係，這個要是具體情況而定。
用高效液相色譜測杜仲含量，流動相比例為甲醇比水 25:75。結果峰分不開
8樓：千葉雅之
沒圖啥也說不清楚。到底是峰分成什麼樣子分不開呢？調一下流動相比例情況怎麼樣呢？
首先你看一下你的峰型，如果是新實驗，最好標定一下色譜柱的塔板數。有的時候色譜柱踏板坍塌，跑出的色譜峰後面總有一個肩峰，讓人誤以為是分不開。
色譜條件是流動相乙腈-水（65:35），波長254nm，流速1.0ml/min，進一針稀釋一兩千倍的甲苯。
如果你的理論板數低於5000，那板數就是非常差了。不建議做新實驗，最好是換根新柱子，或者重生一下。
如果實在是分不開，那就調整實驗方法吧。調整流動相中有機相的比例，或者調整水相加入緩衝鹽，調整ph值，更換溶劑，或者變成梯度洗脫。沒有圖譜我也沒辦法詳細解釋。
高效液相色譜儀流動相選擇應該遵循什麼樣的原則？
9樓：深水◇靜流
1．流動相的性質要求
一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器相容性好、易於得到純品和低毒性等特徵。
選擇流動相時應考慮以下幾個方面：
①流動相應不改變填料的任何性質。低交聯度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質。鹼性流動相不能用於矽膠柱系統。
酸性流動相不能用於氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統。
②純度。色譜柱的壽命與大量流動相通過有關，特別是當溶劑所含雜質在柱上積累時。
③必須與檢測器匹配。使用uv檢測器時，所用流動相在檢測波長下應沒有吸收，或吸收很小。當使用示差折光檢測器時，應選擇折光係數與樣品差別較大的溶劑作流動相，以提高靈敏度。
④粘度要低（應<2cp）。高粘度溶劑會影響溶質的擴散、傳質，降低柱效，還會使柱壓降增加，使分離時間延長。最好選擇沸點在100℃以下的流動相。
⑤對樣品的溶解度要適宜。如果溶解度欠佳，樣品會在柱頭沉澱，不但影響了純化分離，且會使柱子惡化。
⑥樣品易於**。應選用揮發性溶劑。
2．流動相的ph值
採用反相色譜法分離弱酸（3≤pka≤7）或弱鹼（7≤pka≤8）樣品時，通過調節流動相的ph值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，並改善峰形的技術稱為反相離子抑制技術。對於弱酸，流動相的ph值越小，組分的k值越大，當ph值遠遠小於弱酸的pka值時，弱酸主要以分子形式存在；對弱鹼，情況相反。分析弱酸樣品時，通常在流動相中加入少量弱酸，常用50mmol/l磷酸鹽緩衝液和1%醋酸溶液；分析弱鹼樣品時，通常在流動相中加入少量弱鹼，常用50mmol/l磷酸鹽緩衝液和30mmol/l三乙胺溶液。
注：流動相中加入有機胺可以減弱鹼性溶質與殘餘矽醇基的強相互作用，減輕或消除峰拖尾現象。所以在這種情況下有機胺（如三乙胺）又稱為減尾劑或除尾劑。
流動相選擇方法
1：由強到弱： 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩衝溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然後根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。
2： 三倍規則 ：每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中，注意觀察各個峰的分離情況。
3： 粗調轉微調：當分離達到一定程度，應將有機溶劑10%的改變數調整為5%，並據此規則逐漸降低調整率，直至各組分的分離情況不再改變。
10樓：匿名使用者
有機相和非有機相，一般有乙腈+水，甲醇+水，有時候還可以有三相或四相，加酸和加鹽改善分離
高效液相色譜法測定中標準溶液的溶劑與樣品溶劑不同會造成保留時間不同嗎
11樓：上海波粒儀器
標準溶劑是指什麼？流動相？樣品溶劑最好用流動相，否則會出現溶劑效應，影響分離效果
高效液相色譜儀的使用和原理分析
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