1樓：徐天來
我認為你需要作的是在酵母表達系專統和昆蟲桿狀屬病毒載體表達系統之間作出選擇。昆蟲桿狀病毒載體表達系統比較好，但條件要求高、純化比較難，如果你處沒有細胞培養的技術和條件，你還是選酵母表達系統比較好一些，關於酵母表達系統我知道的就較少了，很抱歉。
原核表達載體和真核表達載體的區別
2樓：威海博銳化機
一、表達載體不同：
原核表達載體構建重組表達載體：
1、載體酶切：將表達質粒用限制性內切酶（同引物的酶切位點）進行雙酶切，酶切產物行瓊脂糖電泳後，用膠**kit或凍融法**載體大片段。
2、pcr產物雙酶切後**，在t4dna連線酶作用下連線入載體。
真核細胞表達載體之一為pegfp-n1載體，具有對方面的優點。pegfp-n1載體上攜帶有egfp蛋白表達基因。
二、表達實現方式不同：
真核表達載體具有neo基因，可以採用g418來篩選已成功轉染了該載體的靶細胞。這些特殊的結構可以實現目的基因在靶細胞內的穩定表達。
三、獲得目的基因方式不同：
pegfp-n1載體從結構上看，質粒具有很強的複製能力，可以滿足隨宿主細胞**時跟隨胞質遺傳給新生的子細胞，這是真核細胞表達載體保證目的基因穩定表達的因素之一。
原核表達載體獲得目的基因：
1、通過pcr方法：以含目的基因的克隆質粒為模板，按基因序列設計一對引物（在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點），pcr迴圈獲得所需基因片段。
2、通過rt-pcr方法：提取總rna，以mrna為模板，逆轉錄形成cdna第一鏈，以逆轉錄產物為模板進行pcr迴圈獲得產物。
3樓：匿名使用者
原核載體可以將真核基因表達，但是表達出來的蛋白是沒有活性的，因為缺少翻譯後修飾系統。。。真核的表達載體呢 由於比較大 不適合大量快速擴增，所以要在其載體上構建可以在原核生物 如大腸桿菌中複製的所需的複製原件 。。。。綜上 在應用的時候 要構建 穿梭質粒 可以穿梭於 原核和 真核 呵呵 還有就是 原核表達載體的基本元件和真核的有不同的地方 。。。。。
總覺得不夠正確答案 。。。。。有些人緣的蛋白在原核裡沒有蛋白翻譯後修飾，表達後沒有活性，這時候就得在真核裡表......
4樓：匿名使用者
主要是因為原核和真核表達系統所需的表達元件不同。
比如說啟動子，終止子在兩種表達系統中是不一樣的。
帶有真核表達元件的是真核載體，能在真核生物內表達；
帶有原核表達元件的是原核載體，能在原核生物內表達。
兩者都具有的為穿梭載體。
1)真核表達載體和原核表達載體就是能在真核生物或原核生物中表達的載體,它們一般都帶有能在真核生物或原核生物中表達的必需表達元件;
2)真核表達和原核表達的目的都是為了能夠大量獲得自己所需要的目的基因的表達產物,最好有生物活性,以便下一步的實驗需要.
3)原核表達載體一般只能在原核生物中表達外源基因,但有些穿梭載體可以分別在真核和原核生物中表達它們的表達元件.
大家都常用哪些真核表達載體質粒
5樓：匿名使用者
這要看載體是否具有原核啟動子了。
一般的真核表達載體都是穿梭載體，載體上的氨苄青黴素等抗性基因就是可以再原核生物中表達的。但是你連線在載體上的真核基因是不會在原核生物中表達的，因為基因前邊只有載體上的真核啟動子，而且可能基因裡面也會有內含子。
真核表達載體和原核表達載體的區別越詳細越全面越好
6樓：天馬行空設計
應該是bai原核表達宿主du菌比較準確 原核表達zhi宿主菌之前可以表達蛋白dao，版放一段時間不表達權蛋白原因很多 首先要確認其他條件是否也有改變，比如其他基因，質粒載體，表達條件等等 原核表達宿主菌儲存條件沒有控制好可能導致宿主菌退化，被汙染等等，結果。能抑制多長時間你需要自己檢測。不同細胞、不同sirna、不同轉染試劑都會影響效率。
但是假設你轉染之後48小時或者72小時之後passage 細胞做mtt或者克隆形成實驗，個人覺得是可以的（前提是你有48小時或72小時knockdown證據）。
請說明真核表達載體中應具備的各種元件 5
7樓：匿名使用者
是在真核生物細胞中的基因表達載體的元件麼？
如果是，元件是啟動子，終止子，複製原點，目的基因，標記基因
8樓：匿名使用者
啟動子、核糖體結合位點、克隆位點、轉錄終止訊號，以及dn**段複製起始位點
如何採用一個真核表達載體中表達多個蛋白
9樓：阿魯巴星人
方法有好多的：
分開表達，裝不同的promoter，啟動不同的蛋白轉錄。
融合蛋白，就是把兩個蛋白融合在一起表達。如果要用酶切開，可以在中間加入一段link。
加入ires--內部核糖體進入位點，雖然兩個蛋白是用一個promoter啟動的，但是蛋白石分開翻譯的。
等等~不多舉例啦~
10樓：廣州源井生物
目前主要有三種方式，直接把2個蛋白序列連線進行融合表達；兩個蛋白之間通過2a肽的方式連線；兩個蛋白之間通過ires連線，3種方式各有優劣，可以根據實驗目的進行選擇
真核表達載體與染色體能整合嗎
11樓：
不是整個重組載bai
體都跟染色體du整合。
目的基因是否zhi整合到
dao染色體上，要看你是內怎麼設計這個質粒容的。如果質粒上目的基因的兩端有與染色體上相同的同源序列，就可以整合到染色體上。
如果沒有同源序列 的話，就沒法整合到染色體上。
在酵母細胞中，有時候也可以轉一個質粒進去表達蛋白，不整合到染色體上。動物細胞裡能不能我不知道。
原核表達載體和真核表達載體的區別
一 表達載體不同 原核表達載體構建重組表達載體 1 載體酶切 將表達質粒用限制性內切酶 同引物的酶切位點 進行雙酶切，酶切產物行瓊脂糖電泳後，用膠 kit或凍融法 載體大片段。2 pcr產物雙酶切後 在t4dna連線酶作用下連線入載體。真核細胞表達載體之一為pegfp n1載體，具有對方面的優點。p...
真核表達載體和原核表達載體的區別
原核bai載體可以將真核基因表達，du 但是表達出zhi來的蛋白dao 是沒有活性的，因專為缺少翻譯後修飾系統屬。真核的表達載體呢由於比較大 不適合大量快copy速擴增，所以要在其載體上構建可以在原核生物如大腸桿菌中複製的所需的復知制原件 綜上 在應用的時候 要構建穿梭質粒 可以穿梭於 原核和真核 ...
急，如何構建原核表達載體？如何構建真核表達載體？（不要具體例子）
最簡單的就是用現有的載體就行改建，除非你自己做表達載體優化，一般實驗室都是用現成的載體，匯入目的片段那樣做得！真核表達載體就是多一個轉移片段，原理都是一樣的！急，如何構建原核表達載體 大體分為一下幾步 bai 1.設計目du的片段引 zhi物 含限制性酶切位點dao，要求 表達載體上有內而目的容片段...