1樓：匿名使用者
t克隆的原理是基於常規pcr反應中所使用taq聚合酶能夠在pcr產物的3『末端非特異版性新增一個a,這樣實際上
權常規pcr產物都含有3端突出一個a的粘性末端.基於這個原理,常規的線性t－克隆載體（puc18和puc19等）在其3』末端新增一個t,這樣的載體能夠和任何pcr產物進行連線克隆,並不需要新增任何特異性的粘性末端位點.這個就是t克隆的原理了.
簡述用t-克隆載體進行pcr產物克隆的原理
2樓：法師藥材店
t克隆的原理是基於常規pcr反應中所使用taq聚合酶能夠在pcr產物的3『末端非特異性新增回一個a，這樣實際上常答規pcr產物都含有3端突出一個a的粘性末端。基於這個原理，常規的線性t－克隆載體（puc18和puc19等）在其3』末端新增一個t，這樣的載體能夠和任何pcr產物進行連線克隆，並不需要新增任何特異性的粘性末端位點。這個就是t克隆的原理了。
3樓：
pcr產物末端都有a尾巴，與t-a克隆載體上的t互補連線到載體上
為什麼pcr產物可以直接連t載體
4樓：匿名使用者
普通的taq聚合酶會在pcr反應過程中在3』末端加入一個鹼基a，線性化平末端t載體的兩端分別又人工加上一個額外的t鹼基，從而可與pcr克隆產物的a末端互補配對，提高了pcr產物連線和克隆的效率。
pcr產物與t載體連不上 求助
5樓：南京金益柏生物科技****
前一段時bai間我也是，不du知道為毛，t-a克隆就是不成zhi功。。。以前的以dao前輕鬆的事情，前段內時間就是塞不進容去。後來，我試了平末端克隆，反而長菌了。。
菌落數比較少，但是陽性率還行。
由於平末端克隆試劑盒一般小貴，所以我把某個試劑盒提供的載體改造了，只要用ecorv酶切就是平端載體，如果用eam1101i酶切就是t載體。。嗯。。這樣就不用再買t載體或者平端載體了。。
哇咔咔。。如果你需要的話站短我吧
t載體克隆的實驗原理
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