1樓：劇竹秋茶
看了你空間裡的溶解曲線，你可以看到溶解峰的溫度都很低，全在80以下，你擴出來的東西多半隻是引物，你跑定量的時候有做ntc的孔嗎，如果有做，可以對照ntc組和加了模板的組，溶解峰還是一樣的話，那你擴出來的產物100%是引物了。
再有，你的擴增曲線問題，ct太了，一般做定量認為ct=25時，是一個模板擴出來的，所以當大於25擴出來的結果都不可信。
還有，你反轉錄的時候rna加多少，2微克？，反轉錄體系是多少,20微升？反轉錄之後按照多少比例稀釋，1比4？
總之，問題可以再問詳細一點，也可以直接hi我
如果做過ntc那溶解峰就沒問題了，而且都很單一，特異性蠻好的。沒稀釋的cdna做的定量，ct大於30？你p的什麼基因呢，表達量也太低了吧，內參的ct呢，也是這麼低嗎
2樓：秦秀芳管汝
所謂ct值，就是最先出現超過閾值訊號的那個迴圈數。或者說是到了第幾個迴圈才出現超過閾值的訊號。
c代表的是cycle，迴圈數目，t代表的是threshold,閾值。
所以表達量越少的話，需要越多的迴圈才能擴增出來。也就是ct值越高
實時熒光定量pcr是否能需要延伸
1.sybrgreen 法 在pcr反應體系中，加入過量sybr熒光染料，sybr熒光染料特異性地摻入dna雙鏈後，發射熒光訊號，而不摻入鏈中的sybr染料分子不會發射任何熒光訊號，從而保證熒光訊號的增加與pcr產物的增加完全同步。sybr定量pcr擴增熒光曲線圖 pcr產物熔解曲線圖 單一峰圖表明...
乙肝病毒HBV DNA實時熒光定量PCR檢測結果是1 79E
不知道你是不是首次發現肝功能不正常。如果是建議你觀察兩三個月再說。每個月檢查一次肝功能，如果穀草轉氨酶 谷丙轉氨酶持續升高超過80，那麼就可以進行抗病毒 了。抗病毒 你要做好長期抗戰的準備。dna6次方屬於中等偏上，很正常的情況，無需給自己太大壓力。找個三甲醫院看病，以免被騙。這份結果是黃疸型肝炎與...
為什麼實時熒光定量pcr做不出來,普通pcr可以
為什麼實時熒光定量pcr做不出來,普通pcr可以普通的pcr大多數是定性實驗回 而實時熒光定量pcr則定量和答定性都可以做。應用領域也不一樣,普通pcr一般應用於基因組克隆 dna測序 rna反轉錄等,而實時熒光定量pcr一般應用於mrna表達量分析 絕對定量 蛋白表達 snp分析 陰陽性解析等領域...