1樓：網友
我有乙個問題就是：我養的這個細胞今天換了液，明天就會飄很多很混的東西，就像汙染了似的，但是其實是沒有汙染的，細胞也長滿了，就是液體在鏡下看很渾濁，是什麼問題呢？？請教高手。
我也在養這個細胞，最近也很苦惱，細胞會長，但是好像這個細胞很輕，離心4分鐘1000轉的話好像離的不太好，即使離好了，倒掉上清液的時候好像也會帶出細胞倒掉，所以苦惱死了。
關於消化我也是總要消化兩次，因為時間太短的話，還會有很多細胞貼在上面，根本吹不下來，只能消化第二次。所以我建議你加了胰酶（後可以放在37度溫箱裡3-5分鐘，自己掌握一下消化的時間，慢慢的你就能摸到最適合你條件的消化時間了。我這兩次的細胞都是成片掉下來很多的，好像也沒什麼損害，傳到瓶子裡都還是貼的好好的。
你可以試一下。
至於你的細胞形態，我覺得是不是汙染了別的細胞，還是長太滿了。
2樓：網友
我說說我的經驗 就是消化的時候我放孵箱裡 35秒後 再加培養基終止 效果還可以。
a549細胞培養技術
3樓：一顆小糯公尺，小丫小開心
a549細胞為人肺腺癌細胞，屬於傳代細胞系，可穩定地傳代培養。一般用胰酶消化後，加入生長液稀釋，以1：2～1：3傳代培養都是可行的。
4樓：網友
這個細胞還是比較好養的，常規凍存、復甦，我們的一般傳代比例是一傳三。。。
5樓：網友
沒什麼特別的，就復甦，貼壁培養，貼滿後胰酶消化，離心重懸，1傳3-5繼續培養。
如何鑑定培養出來的細胞是a549細胞
6樓：匿名使用者
如何鑑定培養出來的細者辯胞是a549細胞。
除非你給a549做了的螢光或者抗原標記，我們主要是看細胞的密度，大概有80-90%鋪滿培養瓶底就可以傳代了，時間長短不一，大概有5-7天吧，一瓶一般傳3-4瓶，中間一般會有一次換液的。
培養基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml慶大黴素。傳代時先倒掉就培養基，然後用pbs洗一兩次，然後再用胰酶消化（100ml培養瓶蓋住表面大概要兩滴管左右）,可鏡經下觀察細胞間已出現細胞胞質回縮變圓，縫隙變大（我的細胞大概要2min左右）,即可倒去消化液，加入培養基，吹打細胞（我們這大概吹打150次左右，注意四周邊緣的細胞較密，要多吹打幾次，最好慢慢吹不要產生泡泡）,然後分裝侍塌，如果分裝時細胞液不夠，可再分別加入培養基老嫌圓。
7樓：
體外細胞轉化試驗是以細胞形態惡性轉化為檢測終點。對轉化細胞的判定通常採用細胞灶法，計數轉殖數，飢液寬觀察鑑定轉化灶，單盲法觀察，由2人共同認定。轉化灶的判定標準採用「第二屆全國細胞和組織培養專題研討會」通過的鑑定指標[1]：
凡有50個以上聚集的埋棗細胞可認為是乙個細胞灶。正常細胞灶，灶內細胞排列規則，束狀，細胞灶外圍區的細胞單層生長，規則。轉化細胞灶，灶內細胞由正常的長梭形變為短梭狀，失去接觸抑制，呈復層生長，排列紊亂，形成交爛亮叉和旋渦。
8樓：網友
目的通過對大鼠下丘腦神經元培養方法的改進研究，尋找更佳的下丘腦神經元培養方法。方法基於目前常用的neurobasal+b27+glumaxⅰ的神經元培養體系，採用多重過濾替代原來的取上清過濾的方法處理神經元，並對換液方式作出相應調整。以nf-200對細胞猛銷悶進行免疫組織化學染色鑑定。
通過觀察比較培養下丘腦神經元的細胞密度、神經元軸突長度和胞體面積枝彎等指標，對培養方法作出評價。鬥唯結果2種培養方法均獲得良好的培養效果，改進的方法在細胞密度d4個時間點均優於原培養方法；神經元軸突長度和胞體面積方面，新方法只在3d時優於原方法，至7d時二者差異已不明顯。結論新方法具有穩定的可重複性，可應用於神經元的培養實驗。
逆轉錄病毒感染a549細胞的方法 請問這是什麼方法： 培養瓶中的a549細胞長至70%~80%融合時，用吸管吸棄培養
9樓：網友
細菌侵染實驗可以用放射性同位素標記示綜法探求寄生感染過程，細胞培養是前提，試劑操作嚴密。
a549細胞最好用什麼培養基
10樓：匿名使用者
1、培養a549細胞。
瞭解a549細胞的倍增週期，擴增a549細胞；2、收集a549細胞並計數，按照一定的密度如2500細胞/孔，25ul/孔(參考值，需進行優化)進行鋪板；3、在細胞板內培養一定時間，如24h等，該時間需要根據具體實驗和鋪板密度來確定，並且需要優化，至少要等到細胞貼壁之後才可以進行下一步；4、配製abcd化合物溶液，通常將化合物溶解在dmso中。由於細胞對dmso敏感，因此在進行正式實驗之前需要羨早隱對實驗體系進行dmso耐受測試，獲得a549在該實驗體系中的最大dmso耐受量。假設a549能夠耐受1%的dmso，那麼需要配製100×終濃度的abcd化合物溶液，並用培養基。
稀釋到終濃度。5、棄掉細胞培養板中的培養液，將配好的化合物溶液轉移到細胞培養板中，進行加藥處理；6、培養一段時間，例如24h，48h等(該時間需要進行優化)，取出細胞培養板，向其中加入promegacaspase3/7glo檢測試劑，**10分鐘後用酶標儀。
讀板。7、將獲得的數值與陰性對照。
陽性對照進行比較並轉換成作用百睜祥分比，即可判斷該化合物是否有效。如果化合物配製時是配製的梯度溶液，還能獲得活性兄廳化合物的ic50.
為什麼癌症研究要用a549細胞癌症細胞a549細胞特點 生物通
11樓：北京索萊寶科技****
a549細胞是腺癌人類肺泡基底上皮細胞。
在自然界中，這些細胞是鱗狀的，它們可以通過肺泡擴散傳播一些物質，如水和電解質。如果將a549細胞體外培養，它們會成長為單層細胞，附著或緊貼在培養瓶上。人肺泡上皮細胞株a549可以固定或懸掛在體外的溶液。
這些細胞的另乙個特點是他們能夠合成卵磷脂，並且含有高度不飽和的脂肪酸，這對於維持細胞膜磷脂有重要意義。 a549細胞廣泛用於ii型肺上皮細胞模型在藥物代謝的體外模型，還可以作為轉染宿主。
做肺癌a549細胞培養都需要什麼試劑啊？大概多長時間啊？
12樓：網友
首先，普遍觀點是你買的a549是用什麼培養基凍存的，就用什麼培養基（這個要諮詢賣家），當然我們常用1640或者dmem，養的還是不錯。
癌細胞長的還是很快的，除了復甦第一次長的慢一點（我有一次等了一星期，被老闆狂罵），其餘如果有時候消化後細胞留得多的話，第二天就能長滿。
13樓：匿名使用者
呃。。。這個問題好專業耶，不太清楚。
a549細胞過度增殖會怎樣？我的細胞培養基渾了鏡下像沙塵暴一樣，感覺不太像沒有傳代導致的，求大神指點
14樓：匿名使用者
扔了，重新復甦新細胞吧，看你描述像是細胞已經汙染了，就算沒有汙染，生長密度已經超過100%了，細胞的性質就變了，再傳代凍存會有很大差異，最後可能導致重複組細胞實驗結果差異很明顯，貼壁細胞一般養到70%-80%密度就得傳代。
15樓：畜牧小新人
有沒有鏡下**？a549是癌細胞系本身增殖速度快，你多久沒有傳代？也有可能是汙染導致的。
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